Срок хранения микропрепарата опухоли головного мозга

1. Состояние мягкой и твёрдой мозговых оболочек:

- наличие отёка различной степени выраженности (оболочки утолщены, разрыхлены, расслоены),

- кровенаполнение сосудов оболочек мозга (полнокровны, неравномерного кровенаполнения, слабого кровенаполнения, с преобладанием сосудов с пустыми просветами, в спавшемся состоянии),

-состояние сосудистых стенок (наличие патологических их изменений в виде склероза, плазматического пропитывания, гиалиноза, некроза, острого гнойного и продуктивного воспаления, аномалий строения),

-наличие кровоизлияний, клеточной инфильтрации (лептоменингит и пахименингит), некрозов в толще оболочек,

-наличие субарахноидальных кровоизлияний (без признаков организации, с признаками организации), эпи - и субдуральных гематом (острых, подострых и хронических), интрадуральных гематом с клеточной реакцией.

2.Состояние вещества мозга:

- степень кровенаполнение венозно-капиллярного русла, артерий, состояние сосудистых стенок (не изменены, с картиной склероза, плазматического пропитывания, гиалиноза, фибриноидного некроза, острого гнойного и продуктивного васкулита, аномалии развития),

- наличие очагов организации, глиальных рубцов,

- наличие и степень выраженности отёка вещества мозга (просветление периваскулярных, перицеллюлярных пространств и пространств вокруг глиальных элементов), наличие очагового или диффузного сетчатого (криброзного) отёка различной степени выраженности (вплоть до резко выраженного, деструктивного),





ГОЛОВНОЙ МОЗГ (3объекта):

КОРА, ПОДКОРКОВАЯ ОБЛАСТЬ (2объекта) - мягкая мозговая оболочка (ММО) - значительно утолщена, разрыхлена, разволокнена за счёт отёка, со слабо выраженной пролиферацией соединительнотканных элементов, слабым и умеренным диапедезом эритроцитов. Сосуды ММО различного кровенаполнения, стенки большей части сосудов утолщены, уплотнены и гомогенизированы за счёт умеренно выраженных склероза, плазматического пропитывания, элементов гиалиноза. Единичные сосуды с картиной продуктивного васкулита. В веществе мозга - неравномерное кровенаполнение сосудов (сосуды слабого, умеренного кровенаполнения, умеренно полнокровны), в ряде сосудов разделение крови на плазму и форменные элементы, плазмостазы, внутрисосудистый лейкоцитоз, внутрисосудистая агрегация эритроцитов, слабые и умеренные склероз и плазматизация стенок, а также их некроз, фибриноидный некроз. Слабые и умеренные плазморрагии. Диапедезные микрогеморрагии. Неравномерно выраженный отёк вещества мозга: просветление периваскулярных, перицеллюлярных пространств и пространств вокруг элементов глии варьирует от слабо-умеренного до выраженного и резко выраженного. Умеренный очаговый сетчатый отёк различной распространённости. Преобладают выраженные дистрофические изменения нейроцитов, видны нейроны с кариолизисом, в состоянии нейроцитолизиса. Мелкие скопления гематоксилиновых шаров (как признак хронической гипоксии ткани мозга). Умеренно выраженное обеднение коры пирамидными клетками. Признаки энцефалопатии.

СТВОЛ МОЗГА (1объект) - неравномерное кровенаполнение сосудов (одни из них слабого кровенаполнения, спавшиеся, другие - умеренно полнокровны). Стенки ряда сосудов со слабыми и умеренными склерозом, плазматизацией, с элементами гиалиноза. Единичные слабо выраженные плазморрагии. Диапедезные микрогеморрагии. Неравномерно выраженный отёк вещества головного мозга: просветление периваскулярных, перицеллюлярных пространств и пространств вокруг элементов глии варьирует от слабо-умеренного до резко выраженного. Крупные очаги резко выраженного сетчатого отёка. Выраженные дистрофические изменения нейроцитов, часть из них выглядит набухшей, с явлением кариолизиса, нейроцитолизиса, с наличием золотисто-жёлтого пигмента липофусцина в цитоплазме.



Рис. 1. Небольшой сосуд в толще отёчной мягкой мозговой оболочки головного мозга с умеренно выраженными склерозом и плазматическим пропитыванием (стенка умеренно утолщена, гомогенизирована). Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 250.

Рис. 2. Умеренно выраженное плазматическое пропитывание сосудистой стенки с элементами её некроза (стенка утолщена, гомогенизирована, с потерей клеточной структуры). Внутрисосудистая агрегация эритроцитов. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 250.



Рис. 3. Фибриноидный некроз сосудистых стенок. Периваскулярное кровоизлияние. Сетчатый отёк. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 250.

Рис. 4. Ствол мозга с крупноочаговым резко выраженным сетчатым отёком. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 250.



Рис. 1, 2. В веществе головного мозга из зоны подкорковых ядер зональное обызвествление (практически без признаков склероза) стенок небольших сосудов (капилляров, мелких артерий и артериол) различной степени выраженности (от пылевидного включения солей кальция в толще стенки до полного замещения сосудистых стенок кальцинатами). Некоторые сосудистые стенки полностью замещены пылевидными солями кальция, сосуды выглядят как практически гомогенные кольца насыщенно сине-фиолетового цвета. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 100 и х 250.



Рис. 3, 4. Вдоль стенок большинства капилляров густо расположены небольшие округло-овальные кальцинаты по типу псаммом, вокруг отдельных капилляров образованы целые муфты петрификатов. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х 100 и х 400.

ГОЛОВНОЙ МОЗГ (4объекта, подкорковая область)- сосуды слабого и умеренного кровенаполнения, стенки ряда из них циркулярно утолщены, уплотнены за счёт слабого-умеренного склероза, гомогенизированы за счёт слабого-умеренного плазматического пропитывания. Неравномерная очагово-диффузная пролиферация элементов глии (глиоз). Слабо выраженное просветление периваскулярных, перицеллюлярных пространств и пространств вокруг элементов глии. На большей площади срезов крупные компактные включения густо расположенных слоистых округлых кальцинатов (псаммом).



Рис. 1, 2. Крупное компактное скопление псаммом в толще вещества подкорковой области. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х100, х250.

1. Наличие неравномерной окраски миокарда (при стандартном срезе миокарда толщиной 10-12 мкм, одинаковой толщины обусловлена наличием субсегментарных контрактур кардиомиоцитов - мелкие участки пересокращения кардиомиоцитов окрашены в более насыщенный цвет, соседние участки перерастяжения кардиомиоцитов более бледной окраски).

Найдите препарат и опишите микроскопические изменения головного мозга.

3. Какие пигменты могут быть обнаружены в гематоме? Дайте их характеристику.

Накопление какого вещества в сосудистой стенке могло наблюдаться у пациента длительно страдавшего гипертонической болезнью.

1. Макропрепарат: гематома головного мозга. Расширены боковые желудочки. В ткани головного мозга образуется полость, заполненная сгустками крови. Полость соединяется с боковыми желудочками мозга, которые также заполнены кровью.

2. Микропрепарат №13: кровоизлияние в головной мозг. Полость заполнена кровью, стенки также пропитаны кровью Отек ткани. В стенках ткань подвергается некрозу. Сохранная ткань с явлениями отека и гиалинозом артериол.

3. а) Гемосидерин – полимер ферритина, образуется при расщеплении гема, представляет коллоидную гидроокись железа, связанную с белками, ГАГами и липидами клетки.

б) Гематоидин – не содержащий железо пигмент, кристаллы которого имеют вид ярко-оранжевых пластинок или иголок, реже зерен; образуется внутриклеточно при распаде эритроцитов и гемоглобина, но в отличие от гемосидерина не остается в клетках и при их гибели оказывается свободно лежащим среди некротических масс; скопления – вдали от живых масс.

4. Гиалиноз сосудов. Гиалин обнаруживается в субэндотелиальном пространстве, он оттесняет кнаружи и разрушает эластическую пластинку, средняя оболочка истончается, в финале артериолы превращаются в утолщенные стекловидные трубочки с резко суженным или полностью закрытым просветом.

Задача № 15

Проведите дифференциальный диагноз между различными видами обызвествления (на соответствующих препаратах).

1. Найдите препараты и дайте макро- и микроскопическую характеристику процесса

2. Селективная окраска, используемая для идентификации фокусов обызвествления

3. Механизм развития фокусов обызвествления в каждом случае. Необходимые условия. Название очагов обызвествления.

4. Укажите характер обызвествления по распространённости в каждом случае.

5. Как изменяется функция органов

2. Гематоксилин-эозин (дает сине-фиолетовый цвет на известь).

3. а) Метастатическое обызвествление: Гиперкальциемия – соли кальция выпадают в осадок в легких, слизистой желудка, почке, миокарде, стенке артерий, т. к. выделяют кислые продукты (большая щелочность => не могут удерживать соли в растворе; в сердце – артер кровь – мало углекислоты)

б) Дистрофическое (петрификация): НЕТ гиперкальциемии! В омертвевшей ткани или в состоянии глубокой дистрофии. Причина: физико-химическое изменение тканей = адсорбция кальция из крови в ткань. + ощелачивание среды и из некротизированной ткани выдел-ся фосфатазы. В казеозных очагах при туберкулезе; в рубцовой ткани, хрящи, погибшие паразиты, мертвый плод при внематочной беременности (литопедион).

в) Метаболическое обызвествление (интерстициальный кальциноз): НЕТ гиперкальциемии, НЕТ дистрофии и некроза. Причина: нестойкость буферных систем (рН и белковых коллоидов) – кальций не удерж-ся в крови и тканевой жидкости = кальцергия (кальцифилаксия). Системный: В коже, подкожной клетчатке, по ходу сухожилий, фасций, мышц. Местный: в виде пластинок в коже пальцев рук, реже ног.

4. а) Метастатическое обызвествление – распространенный характер.

б) Дистрофическое (петрификация) – местный.

в) Метаболическое обызвествление (интерстициальный кальциноз) – системный и ограниченный.

5. а) Метастатическое обызвествление – в стенках артерий = тромбоз.

б) Дистрофическое (петрификация) - в казеозных очагах при туберкулезе = его заживление (репаративный характер).

в) Метаболическое обызвествление – известковая подагра: развитие подагрического артрита и мочекаменной болезни. Сама по себе подагра не может стать причиной летального исхода, однако она способна спровоцировать образование камней в почках, приводящее к опасной для жизни печеночной недостаточности.

Задача № 16

У больного, страдающего атеросклерозом с развитием крупноочагового постинфарктного кардиосклероза, осложнившегося хронической сердечной недостаточностью и аневризмой аорты, внезапная боль в пояснице, падение артериального давления. Смерть. На вскрытии в забрюшинной клетчатке массивное скопление свернувшейся крови. Выраженное малокровие внутренних органов.

1. Какой вид кровоизлияния имеет место в данном случае

2. Механизм развития

3. Какой вид малокровия имеет место. Назовите другие виды

4. Дайте микроскопическую характеристику изменений в почке

5. Перечислите возможные процессы в паренхиме органов

6. Найдите препарат и дайте микроскопическую характеристику изменений лёгких, обнаруженных на вскрытии. Их морфогенез.

1. Кровотечение в результате разрыва аневризмы аорты.

2. Воспаление средней оболочки аорты (мезаортит) => разрыв стенки аорты и кровотечение.

3. Хроническое обтурационное малокровие вследствие сужение просвета артерии атеросклеротической бляшкой.

Другие виды малокровия:

1) Общее (анемия), 2) Местное.

1) Острое (при исчезновении из ткани гликогена, снижение активности ОВР и деструкция митохондрий), 2) Хроническое (атрофия паренхимы, склероз ткани): а) ангиоспастическое (боль, адреналин, отриц эмоции), б) обтурационное (тромб, эмбол, атеросклеротические бляшки), в) компрессионное (опухоль, выпот, жгут, лигатура), г) ишемия в результате перераспределения крови (гиеперемия после анемии: ишемия мозга при извлечении большого кол-ва жидкости из брюшн полости – туда устремляется много крови).

4. Ишемический инфаркт почки вследствие атеросклероза. Белый с геморрагическим венчиком. конусовидный участок некроза охватывает либо корковое вещество, либо всю толщу паренхимы.

5. Очаги некроза вследствие ишемии (атеросклероз).

Задача № 17

На вскрытии обнаружены варикозное расширенные вены голеней, заполненные в одних участках плотными сероватого цветы массами, прочно фиксированными к стенке на всем протяжении, в других же участках – темно-красными массами, фиксированными к стенке лишь на небольшом протяжении. В сегментарных ветвях легочной артерии – плотные темно-красные массы, не связанные со стенкой сосуда. В легком обнаружен инфаркт.

1. Какие образования обнаружены в венах голени (в разных участках)

2. Найдите препараты и дайте микроскопическую характеристику этих образований

3. Причина их образования

4. Найдите препарат и дайте макроскопическую характеристику инфаркта легкого. Объясните характерную форму и вид инфаркта.

5. Найдите препарат и дайте микроскопическую характеристику инфаркта легкого

6. Назовите образования, обнаруженные в сегментарных ветвях легочной артерии

7. Причина инфаркта легкого

1. Серые – атеросклеротические бляшки, красные – тромбы.

2. Микропрепарат №5 Смешанный тромб в сосуде. Тромб своей головкой связан со стенкой сосуда, а своим телом и хвостом напрввлен в просвет сосуда. Просвет обтурирован тромбом. Тромб состоит из лейкоцитов, тромбоцитов и нитей фибрина.

Атеросклероз сосудов. Интима неровная за счет многочисленных фибринозных бляшек округлой формы, желтовато-серого цвета, возвышающихся над ее поверхностью. Часть бляшек с поверхностными изъявлениями, пристеночными тромбами крошащейся консистенции, серо-красного цвета.

6. Посмертные сгустки крови (т.к. не прикреплены к стенке сосуда).

7. Ишемия вследствие атеросклероза

Задача № 18

Дайте характеристику морфологических признаков некроза: продемонстрируйте и опишите микропрепараты, в которых имеются микроскопические признаки гибели ядра, цитоплазмы, реакции сохранившейся ткани на некротические изменения.

см. стр. 129 – 131 (Струков 2013)

Задача № 19

Проведите дифференциальный диагноз между общим и местным гемосидерозом.

1. Опишите возможные причины двух типов гемосидероза

2. Какой вид гемолиза характерен для того или иного типа гемосидероза

3. Найдите препараты и дайте макро- и микроскопическую характеристику изменений при местном гемосидерозе.

4. Селективная окраска, используемая для идентификации гемосидерина.

1. Общий – анемия, малярия.

Местный – местные кровоизлияния (мб диапедезные) – при ревматическом митральном пороке сердца, кардиосклерозе.

2. Общий – внутрисосудистый гемолиз. Местный – экстраваскулярный гемолиз.

Микро 26: а) г-э: в просвете альвеол и бронхиол, в межальвоел перегородках, периваскулярно – гранулы гемосидерина бурого цвета, чатсь из которых свободна, часть – внутриклеточно в сидерофагах и сидеробластах. Периваскулярный склероз. б) р-ия Перлса: гемосидерин окрашивается в голубовато-зеленоватый цвет – берлинская лазурь

4. Присутствие в гемосидерине железа позволяет выявлять его с помощью характерных реакций: образование берлинской лазури (реакция Перлса), турнбулевой сини (обработка срезов сульфидом аммония, а затем железисто-синеродистым калием и хлористоводородной кислотой).

Задача № 20

У больного К., 45 лет, длительно злоупотреблявшего алкоголем, выявлено значительное увеличение размеров печени.

1. Какой вид дистрофии развился в печени.

2. Найдите микропрепарат, иллюстрирующий данный процесс, опишите его.

3. Образное название печени по макроскопической картине

4. Найдите препарат и опишите микроскопические изменения печени

5. Селективная окраска, необходимая для подтверждения этой дистрофии. Опишите соответствующий микропрепарат.

1. Жировая дистрофия печени.

2,4,5. а) окраска г-э: В гепатоцитах преимущественно периферических отделов печеночной дольки при окраске г-эобнаруживаются васкулопободные включения (капли жира) оранжевого цвета. В зависимости от размера вакуоли ожирение может быть крупнокапельным или мелкокапельным. Жир оттесняет ядра клеток к периферии (клетки-цисты).

б) Селективная окраска суданом-3: Вакуоли окрашиваются в оранжево-красный цвет.

(При алиментарном ожирении – крупные капли жира – на периферии дольки, мелкие – в центральных отделах; При хронич серд-сосуд недостаточности – крупные – в центральных отделах. НО у нас АЛКОГОЛИК, про его образ жизни ничего не сказано).

Задача № 21

Мужчина 35 лет. В автомобильной катастрофе произошел закрытый перелом бедра. Через 10 часов больной доставлен в больницу с резко выраженным малокровием. Еще через 2 часа умер от острой почечной недостаточности (ОПН).

1. С какими изменениями в почках связана ОПН

2. Опишите микроскопическую картину

3. Причина возникновения патологии

1,3. Травматический шок => кровопотеря и перераздражение ЦНС. В связи с гиповолемией, падением артер давления и гипоксией => шоковая почка: включ р-ия юкстагломерулярного аппарата – выброс ренина, гипертензиногена – падает градиент давления между капилляром и гломерулярной капслулой = прекращение фильтрации = дистрофия и некроз проксимальных канальцев = некротический нефроз, а в связи с длительно сохраняющейся ишемией коры – симметричные кортикальные некрозы почек = острая почечная недостаточность.

Задача № 22 (7)

У больного, страдавшего трансмуральным инфарктом миокарда, внезапно появилось боли в левой поясничной области, появилась кровь в моче. В дальнейшем развился правосторонний паралич с последующей потерей сознания и смертью.

1. Найдите препарат и дайте характеристику изменениям в сердце.

2. Укажите стадию развития инфаркта

3. Объясните характерный вид инфаркта

4. Назовите наиболее частые причины развития инфаркта миокарда

5. Дайте микроскопическую характеристику инфаркта миокарда

6. Назовите процессы, развившиеся в почке, головном мозге

7. Причина их возникновения

8. Возможные их исходы

1. Инфаркт миокарда : в области левого желудочка очаг неправильной формы, желтоватого цвета. Очаг некроза окружен геморрагическим венчиком

2. Некротическая стадия развития инфаркта: область инфаркта некротизированная ткань. В которой периваскулярно сохраняются островки неизмененного миокарда. Область некроза отграничена от сохранившегося миокарда зоной полнокровия и зоной демаркационного воспаления.

3. Характерная неправильная форма инфаркта объясняется характером ангиоархитектоники, где преобладает не магистральный, а рассыпной или смешанный тип ветвления артерий. Венчик обусловлен зоной кровоизлияний, которая образуется в результате спазма сосудов по периферии инфаркта, который сменяется паретическим их расширением и развитием кровоизлияний.

4. Наиболее частые причины: атеросклероз, гипертоническая болезнь сердца, тромб, спазм

5. 3 зоны: 1) в зоне некроза – КМЦ с признаками некроза: кариолизис, плазмолизис, плазморексис, лишенные поперечной исчерченности. По периферии – зоны некроза – 2 зона – демаркационного воспаления (расширенные полнокровные сосуды, диапедезные кровоизлияния и выраженная лейкоцитарная инфильтрация). 3 зона – сохранная ткань.

6. В почке и головном мозге – инфаркты. В почке инфаркт белый, с геморрагическим венчиком, конусовидный участок некроза охватывает либо корковое вещество, либо всю толщу паренхимы.

В головном мозге инфаркт белый, быстро размягчается (очаг серого размягчения мозга)

7. Обусловлен ишемией этих органов. Возможно также возникновение на фоне атеросклероза или гипертонической болезни.

8. Благоприятные исходы: в почке и миокарде – организация и образование рубца, в головном мозге – киста. Неблагоприятные исходы: гнойное расплавление.

Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.

О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.

Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?

Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.

Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.

Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?

Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.

Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.

Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.

2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.

В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).


Процесс получения парафиновых блоков.

3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.


4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.

Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.

Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).

Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.

Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.


Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.


Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).

Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?

  • Гистологическое исследование
  • Иммуногистохимия (ИГХ)
  • Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH), может быть хромофобной (принцип тот же, другой тип метки)

Что позволяют определить разные виды гистологических исследований

Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).

Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):

  • воспаление,
  • специфическое воспаление,
  • аномалия развития,
  • опухоль.

Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.

Инвазивный протоковый рак er 100%.

Карцинома сигмовидной кишки.

Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.

МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.

Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.

Низкодифферинцированный рак пищевода.

При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.

Во время гистологического исследования изучаются все стекла от одного образца – материала, полученного от одного вмешательства — одной операции или одной биопсии, вне зависимости от их количества, это считается одной консультацией.

Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.

Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.


Один из этапов ИГХ

ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.

При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).

Стекла окрашиваются последовательно — различными антителами красятся наборы маркеров в несколько этапов, процесс окраски стекол одним антителом занимает 48 часов.

Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.

Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.

Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.

Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.

В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.

  • Наличие рецепторов гормонов прогестерона и эстрогена при раке молочной железы;
  • Экспрессию HER-2/neu в клетках при раке молочной железы, раке желудка;
  • Определить ходжкинские и неходжкинские лимфомы — установить точный диагноз лимфомы на сегодняшний день невозможно без применения этого вида исследования.
  • Определить первичная это опухоль или метастазы, тканевую принадлежность метастазов.

Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.

Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.

FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.

В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.

Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.


Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.

Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.

FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.

  • определяется наличие амплификации HER2 в случаях пограничного результата по данным ИГХ, что необходимо для назначения таргетной терапии;
  • проводится диагностика, то есть выявление генетических перестроек специфичных для определенного типа опухолей, когда невозможно окончательно установить диагноз при помощи более простых методик, чаще всего это саркомы мягких тканей и опухоли головного мозга;
  • генетические отклонения, вызывающие рак того или иного органа;
  • при лимфомах эта методика используется в диагностических целях и для выявления факторов неблагоприятного прогноза, то есть показаний для ранней интенсификации лечения.

Проведение гистологического исследования, и в первую очередь FISH-теста — это экспертная работа, которая зависит от квалификации специалиста. Очень многие мутации, которые выявляются в опухолях, не всегда являются метками опухолей, они могут находиться и в доброкачественных образованиях или нормальных тканях.

За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.

Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.

Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:

  • Качества стекол и блоков;
  • Комплектности предоставления стекол (необходимо предоставить все стекла и блоки);
  • Предоставление пациентом дополнительной информации, которая поможет верно интерпретировать данные гистологического исследования, ИГХ и FISH-теста, а именно: данные анамнеза заболевания, данные о сопутствующих заболеваниях, в первую очередь инфекционных (ВИЧ, гепатиты); все данные всех проведенных обследований и вмешательств: снимки — рентген, КТ, МРТ, УЗИ, протоколы операций, выписки.

После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.

Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?

Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):

Заполняется как для биоптатов — не обязательно, так и для операционного материала, для которого имеет крайне важное значение в ряде случаев.

В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.

Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:

  • Это первичная опухоль или метастаз?
  • Где локализован первичный опухолевый очаг?
  • Каков гистологический тип опухоли (из клеток какого типа она состоит).

Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.

Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.

Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.

Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!



Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.