Персин капли от рака


Почему возникают
онкологические заболевания

Современные ученые выделяют широкий перечень негативных факторов, которые могут приводить к развитию онкологических заболеваний (радиация, электромагнитное излучение, неблагоприятная экология, пестициды, хронические стрессы). Рак может принять форму лейкемии, которая развивается в костном мозге из белых кровяных телец (лейкоцитов), или твердых опухолей, обнаруженных в любой части тела. Одним из механизмов считается нарушение оксидантно-антиоксидантного баланса и образование большого количества свободных радикалов, которые повреждают клетки, и могут приводить к формированию злокачественных процессов. Основной причиной развития данных негативных эффектов в организме человека является локальное снижение pH – ацидоз, усиление гидроперекисного окисления липидов (избыточное образование свободных радикалов).


Один из важных компонентов в приготовлении экстракта из листьев и цветков очанки является подготовленная (структурированная) вода
Структурированная (талая) вода издавна применялась в народной медицине, где она использовалась как универсальное средство при лечении многих заболеваний.

Такая вода способствует:
- снижению количества холестерина в крови
- нормализации артериального давления
- улучшению обмена веществ
- выведению песка и мелких камней из почек и желчного пузыря
- улучшению сна
- улучшению реакции организма на прием лекарственных средств.
- восстановлению нормальной кислотности.
Регулярное полоскание полости рта помогает:
- удалить зубные камни
- вылечить пародонтоз
- очистить зубную эмаль от мягкого налета.

В лечении применяется надземная часть растения. Очанку лекарственную собирают на территории Краснодарского края, в момент цветения. Траву сушат, разложив тонким слоем на специальных поддонах, в проветриваемом, сухом помещении без доступа солнечного света.
По результатам проведённых работ, в состав Очанки входят следующие ценнейшие для организма вещества:
жирные масла, эфирные масла, кумарины, гликозиды, сапонины, органические кислоты, горечи, смолы, антоцианы, синее красящее вещество, дубильные вещества, сахара, галлотанин, лигнан и флавоноиды.
Помимо этого, в очанке имеется в высокой концентрации витамины С, А и большая часть витаминов группы В.
Богато растение ещё и макро- и микроэлементами. В состав травы входит: хром, магний, бор, марганец, цинк, железо, медь, кремний.
За счёт такого разнообразия компонентов в химическом составе, очанка имеет весьма широкий спектр действия и может использоваться при множестве заболеваний:
1. При лечении глаз
водный экстракт из Очанки
следует применять, как внутрь, так и наружно при всех видах заболеваний глаз, экстракт растения положительно влияет на остроту зрения, уменьшает воспалительные процессы, даже оказывает лечебно-профилактическое воздействие на дегенеративно-дистрофические процессы в оболочке глаза, а также уменьшает отёчность глаз и замедляет возрастные обменные нарушения.

Применяется при глаукоме, катаракте, травматических повреждениях, повышенной утомляемости глаз и различных патологических процессах, ведущих к снижению остроты зрения.
Антисептические действия экстракта Очанки очень сильны, поэтому этот водный раствор способен уничтожить большинство болезнетворных бактерий и тем самым остановить вызываемый воспалительный процесс.
Кроме этого, обеспечивая глазам полноценное питание, эта лекарственная трава поддерживает здоровье сетчатки и укрепляет глазной нерв.

2 При болезни желудка и кишечника с повышенной кислотностью
Экстракт Очанки стимулирует рост и активность полезной микрофлоры кшечника (лакто и бифидум бактерии)
Она не только приведёт кислотность в норму, но и окажет обволакивающее действие, собствуя заживлению раздражённой слизистой.

3.При воспалительных заболеваниях предстательной железы
Экстракт Очанки применяется как антибактериальное, противовоспалительное и обезболивающее средство. По мере снятия воспаления восстанавливается нормальное мочеиспускание, а за счёт того, что трава оказывает лёгкое мочегонное действие, происходит промывка мочевого пузыря и мочеточников, которые могли быть инфицир



Спаситель!──☆*:・ﾟ

Привет всем (ﾉ´ヮ`)ﾉ*: ･ﾟ

!ОСТОРОЖНО, МНОГО БУКАВ!

Давно я не писала отзывов на Рекомменде - руки не доходили, но в основном не было ничего достойного, о чём прям хочется взять и написать! И вот свершилось, я здесь и я пишу свой отзыв (самой не верится), но начнётся он не с приятных хвалебных слов..

В сентябре 2016г в связи с образованием не прогрессирующей кисты (научного названия этого недуга я не помню, помню только то, что такая киста образуется во время овуляции, растёт, а во время кд рассасывается и с новым циклом снова по кругу (>_



Высокоактивный натуральный продукт растительного происхождения, изготовленный по запатентованной технологии, обеспечивающей полное сохранение полезных свойств листа персика. Действующими являются полифенольные вещества и витамин С, обеспечивающие более выраженное проявление полезных свойств.

Адаптогенные свойства препарата способствуют повышению качества жизни, выражающееся в увеличении мышечной и умственной работоспособности. Повышает порог болевой чувствительности, то есть обеспечивает выраженный обезболивающий эффект. Укрепляет сосудистую стенку, препятствует образованию тромбов, тем самым благоприятно воздействует на сердечно-сосудистую систему. Нормализуя работу иммунной системы, угнетает развитие аллергических реакций. Ограничивая неблагоприятное воздействие стресса, стимулирует устойчивость к агрессивным факторам внешней среды.



Награждён автор препарата Сафонова Г.М. медалью И.И.Мечникова "за практический вклад в укрепление здоровья нации" Российской Академии науки золотой медалью П.Эрлиха "Valetudo est bonum optimum" Европейской комиссии по академическим наградам.

Состав: вода подготовленная, листья персика обыкновенного, аскорбиновая кислота.

Мама рассказала мне, что этот БАД они пили всей семьёй (и знакомых "подсадили") всю осень и за зиму ни разу не заболели, а меня он поставил на ноги всего за месяц, но курс я не бросаю

Не скажу, что это ПАНАЦЕЯ ото всех болезней, хотя Персин упорно доказывает обратное, но результаты кое о чём всё-таки говорят - это отличная находка для тех, кто хочет быть здоровым и красивым, быть в гармонии с собой и своим организмом!

Маме так понравился Персин, что она открыла склад продукции фирмы Инфинити в нашем маленьком городке! Вот такие пироги (=^･ω･^=)

Спасибо Вам, за внимание к моему отзыву! Здоровья и счастья в Новом 2017 году!

Восстанавливает и сохраняет здоровье организма

Вес: 54 гр.

В наличии

  • Описание
  • Отзывы

Персин - концентрат безалкогольного напитка из листьев персика. Натуральный продукт, источник более 45-ти соединений флавоноидов, полифенолов, фитонцидов и дубильных веществ. Продукт произведен из листа персика, собранного в экологических районах Краснодарского края по новейшей технологии. В нем сохранены все полезные свойства исходного сырья.

Состав

Вода подготовленная, листья персика обыкновенного (Persica vulgaris), аскорбиновая кислота (витамин С).

Полезные свойства продукта:

  • Укрепляет все звенья иммунитета.
  • Защищает организм от негативного действия климатических, экологических и психоэмоциональных факторов (стресс, нервозность).
  • Флавоноиды и органические кислоты, содержащиеся в продукте, обладают бактерицидным, антисептическим и противовоспалительным действием. Они способны уменьшать проницаемость и повышать прочность капилляров.
  • Полифенолы в составе Персина – мощные антиоксиданты. Они очищают организм от свободных радикалов, замедляют процессы старения.
  • Жидкий экстракт листьев персика используют при экземе и для снятия симптомов опоясывающего лишая и псориаза.
  • Сапонины, содержащиеся в экстракте оказывают отхаркивающее действие, успокаивают нервную систему, улучшают пищеварение.
  • Природные соединения, которые присутствуют в продукте из листьев персика способствуют избавлению от головных и ревматических болей.
  • Исследования специалистов Онкологического центра им. Н.Н. Блохина РАМН (Москва) показали, что компоненты экстракта листа персика обладают противоопухолевой активностью, снижают негативные последствия лучевой терапии, улучшает качество жизни онкобольных.
  • Травники применяют лист персика для профилактики и избавления от целого ряда гинекологических проблем.

Рекомендации по применению

Дозировка

При первом приеме или в период обострения: 10 -15 капель растворить в 100 мл теплой воды. Принимать натощак 3 раза в день, курсом от 3-х до 6-ти месяцев.

Профилактика, а также для укрепления иммунитета: 7-10 капель растворить в 100 мл. теплой воды.
Принимать с утра натощак, рекомендовано к постоянному применению.

Срок годности: 12 месяцев

Противопоказания

Индивидуальная непереносимость компонентов продукта.

НЕ ЯВЛЯЕТСЯ БАД И ЛЕКАРСТВОМ (ПИЩЕВОЙ ПРОДУКТ)
Перед применением проконсультироваться с лечащим врачом.

Подробнее о листьях персика читайте в нашем блоге

Отзывы

Одна моя знакомая приехала с работы так как она стояла за гладильной, и то тепло которая исходила от утюга, ей мешало здоровью. Я ей посоветовала один Персин, и ничего больше. 3 месяца. На что она согласилась, и строго по режиму пила 9 фл. Персина. По 3 фл. в месяц. После обследования в Астрахани у неё полностью исчезла фибромастопатия.

Начал принимать ПЕРСИН 2 года назад. Первое что заметил, это бодрость в течении всего дня, потом заметил, что ушла седина и нормализовался сон. Укрепился иммунитет. Все зимние эпидемии обходят стороной.

получила посылочку. Спасибо за Персин. Пью по 7 капель. Немного даже полегчало вроде бы. Жаль что в Краснодаре нет офиса и этой продукции, что бы можно было покупать ее для себя. Дай Вам Бог крепкого здоровья на долгие годы.

У моей подруге в мае 2016 г. отцу в 80 лет поставили диагноз - злокачественная опухоль желудка распадная 2степень. Прогнозы врачей - скорая смерть, т.к. распад опухоли плохо поддается лечению и способствует быстрому распространению метастаз. Пил Персин 3 раза в день по 10 капель в течение года. Чувствовал себя все это время неплохо, ел нормально, можно сказать без всякой диеты, был в том же весе. Присутствовали несильные боли, которые снимались обезболивающими. Умер через год. Вскрытие показало, что смерть наступила в результате острой почечной недостаточности. Сопутствующий диагноз- злокачественная опухоль желудка. Т.е. благодаря приему Персина у него не появились метастазы ни в одном органе, и он еще бы пожил, если бы не отказали почки. Когда вызывали врача при сильных болях они говорили что Вы хотите у него же онкология и уже пошли по всему организму метастазы. А на самом деле их не оказалось. Другую причину не хотят искать

Брала Персин для мамы, после приема она стала чувствовать себя хорошо, появилась энергия, улучшилось настроение, даже просто хорошо себя стала чувствовать. Персином очень довольны , как и в целом продукцией компании! Спасибо вам большое за такие прекрасные продуты здоровья

Мои ощущения по персину -просто очень энергоемкий продукт!Мне 61 год и я работаю на даче и забываю про усталость. Слава Богу нет особых причин более сложного характера!

Я 8 лет мучаюсь от аллергии, много раз лежала в больнице и лечение результата не давало, сразу как выписывали из стационара, аллергия возвращалась . Три года назад начала принимать персин , после первого курса я поняла что препарат действительно работает , аллергия прошла, восстановился иммунитет , так же он мне помог при бронхите! Вашей продукцией я очень довольна! Буду пользоваться еще !

Хочу поделиться своим результатом. Два дня назад простудился супруг, он до этого не принимал продукты Инфинити, пока принимала все только я. Но вот его состояние меня обеспокоило и я предложила ему попробовать Персин. Единоразово накапав в в ложку с водой 10 капель!И о чудо, вчера спрашиваю, как ты себя чувствуешь, говорит все нормально.

У девочки 8ми лет была аллергия с 2,5 лет. Лечили в Ставрополи, но эффекта не было. С ноября 2017 г. принимает персин.И за все это время не было никаких обострений, ни разу не делали ингаляцию. Теперь будет продолжать принимать профилактическую дозу.. Родные девочки благодарны руководству и партнерам НПК ИНФИНИТИ.

Результат моей мамы, у мамы были полипы в кишечнике и желудке, я дала ей персин, и после второго флакона, гастроскопии и калоноскопии, полипы не были обнаружены.

Хочу вам рассказать кое что, у меня была дисплазия шейки CiN 2-3, предраковое состояние, и всему причина вирусы. А вот Персин как раз повышает иммунитет, и тем самым дат силы нашему организму бороться с вирусами. Я запустила это состояние, то есть противовирусное из аптеки типа Ацикловир, Ищопринозин и другие, это все очень сильно подпортило мою печень, одно лечила, другое калечила, при том, пока принимала все было более менее,но после отмены сразу все вернулось. То есть дисплазия продолжала развиваться. Иммунитет ослабел совсем м, болела часто. С Персином я познакомилась примерно в ноябре. Начала пить его с Тибетом5 параллельно, Капен капаю на копчик и яичники.Операцию мне пришлось сделать, 3.12.,так как у меня была уже тяжёлая степень, нужно было убирать поражен.часть. Мне удалили часть пораженной шейки. И я оч.переживала, что покажет гистология, хирург меня запугала, что может показать раковые клетки так как у меня с ее слов шейка была оч.рыхлая и большой очаг. Но! Я принимала Персин ещё до операции, и скажу так, чувствовала себя великолепно, иммунитет повысился, я ни разу не заболела, и не мерзну, как раньше))) Так вот, сейчас еду из онко центра, все нормально!

  • Живопись (370)
  • Духовное (305)
  • Здоровье (285)
  • Кулинария (121)
  • Интересности со всего света (113)
  • Люди и судьбы (105)
  • Разное (97)
  • Юмор (79)
  • Полезные советы. Обо всём. (78)
  • Музыка (78)
  • Арт, дизайн и креатив (70)
  • Мир природы (67)
  • Размышления (54)
  • Политика (53)
  • Мудрые мысли (46)
  • Города и страны (34)
  • Для новичков Лиру (29)
  • Армения (27)
  • Стихи (27)
  • Природа (25)
  • Психология (22)
  • Интересные рассказики и истории (20)
  • Тесты, загадки (17)
  • Мой опыт (13)
  • Фотоподборка (13)
  • Притчи (12)
  • Русский язык (11)
  • АСТРОЛОГИЯ (9)
  • Пословицы (5)
  • Учим английский (5)
  • Все (6)

Персик
Его листья содержат набор биологически активных азотистых полифенольных и других веществ. Учитывая, что персик и лавровишня относятся к одному семейству розоцветных, необходимо отметить большую схожесть их химического состава, а также биологически активных веществ. Также необходимо отметить схожесть заболеваний, при которых их рекомендуют.

Это объясняет, почему сочетание их в одном препарате лишь усилит их общее действие, проявит эффект синергизма, то есть взаимоусиления действия друг друга.

В народной медицине давно уже применяют экстракты из листьев персика для лечения ряда заболеваний, в том числе и онкологических. Например, А.А. Плешаков применял водный экстракт из листьев персика для лечения даже запущенных онкобольных на III и IV стадиях. При этом отмечались длительные ремиссии у 25% онкобольных сроком до 5 лет и почти у 15% — более 5 лет.

В официальной медицине были проведены клинические испытания специалистами Онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН (Москва), которые показали, что профилактическое введение препарата мышам в течение 10 дней до прививки злокачественной опухоли приводило к тому, что у 25% мышей опухоль не развивалась совсем. А у остальных — рост ее замедлялся.

Клинические испытания подтвердили эффективность применения препарата при лечении больных, страдающих онкозаболеваниями даже на III и IV стадиях в самых разных органах. Известно, что течение болезни у многих больных сочетается с невыносимыми болями.

Исследованиями показано, что применение препарата в течение 4-5 недель приводило к значительному уменьшению и даже полному исчезновению болевого синдрома. Также повышается аппетит, увеличивается продолжительность ночного сна, повышается работоспособность. Препарат существенно сглаживал или устранял негативные последствия от химиотерапии почти у всех пациентов. Все это говорит о научно доказанном повышении качества жизни онкобольных.

Это позволило Минздраву России официально рекомендовать препараты из персика в качестве дополнительных методов лечения.

Основные лечебные и профилактические противоопухолевые свойства персика обусловлены выраженной антиоксидантной активностью за счет удачно сочетающейся группы полифенольных веществ, а также иммуностимулирующих свойств, благодаря, по-видимому, содержанию особых азотистых веществ, в том числе амигдалина. Также препарат обладает и адаптогенными свойствами, что проявляется в увеличении мышечной и силовой выносливости, повышении порога болевой чувствительности, снижении потенциальных последствий стресса, его профилактике, а также ослаблении симптоматики уже имеющегося стресса.

Показания: исследованиями показана эффективность применения при лечении гинекологических заболеваний.

У мужчин отмечается положительный результат при лечении заболеваний простаты.

У детей отмечено улучшение показателей иммунной системы, а также концентрация гемоглобина в крови.

Аналогично успокаивающему эффекту настоек из лавровишни, препараты из персика обладают подобным действием и проявляют способность ограничивать действие стресса. Известно, что хронический стресс, как экзогенной природы, так и эндогенной — приводит всегда к выраженным нарушениям иммунитета.

Препараты из лавровишни и персика сглаживают, смягчают эти негативные последствия стрессовых состояний, в том числе и стресса из-за внутренних хронических болезней, болей, переутомления, интоксикаций, онкологии и т.д., а также действуют профилактически, то есть предупреждающе на возможные в последующем стрессы.

Снижение потенциальных последствий стресса, его профилактика, а также ослабление симптоматики уже имеющегося стресса говорит о типичных адаптогенных свойствах препаратов из персика. Итак, этот препарат следует относить и к разряду адаптогенов.

Не зря в Китае персик ценился и применялся наряду с женьшенем и почитался как символ долголетия. Официально препараты из персика рекомендуется применять с целью профилактики онкозаболеваний и повышения иммунного статуса. Для повышения сопротивляемости организма людей, при повышенных неблагоприятных экологических нагрузках. При лечении заболеваний органов дыхания, пищеварения, простаты, гинекологических, сердечно-сосудистых, онкологических. Для предотвращения последствий интоксикаций и сдерживания процессов старения.

В последнее время женские доброкачественные опухоли все чаще перерастают в злокачественные.
Но рака можно и не допустить: листья персика способны повернуть развитие опухоли вспять.

Лечение, которое обычно предлагает маммолог или гинеколог, связано с операцией или приемом гормонов. И то, и другое плохо.

- Хирург лишь убирает проявления болезни. Фиброзно-кистозная мастопатия через два-три года появится снова. При этом вдоль шва, который оставил скальпель, образуется кист еще больше, чем было, - говорит фитотерапевт.

Гормональное лечение еще хуже. Оно ведет к полному расстройству организма. Нарушается баланс эндокринной системы, выходят из строя почки, печень, сердечно-сосудистая система.

- А тот водный экстракт из листьев персика, что используем мы, появился благодаря уральским народным знахарям. Листьями персика они лечили запущенных раковых больных, от которых уже отказались онкоцентры, - рассказывает Владимир Глебов.

Через месяц-полтора практически у всех проходили боли. Персик снимал токсикоз болезни. И жили люди в несколько раз дольше того срока, что был им отпущен врачами. Это при том, что их болезнь достигла очень поздней стадии!

Информация об одном таком целителе дошла до Вениамина Петрова, директора пермского научно-производственного объединения. И он пригласил знахаря в качестве консультанта для создания препарата. Препарат получился, его возможности превзошли все ожидания.

Три месяца лечения экстрактом персика - и молочные железы, пораженные фиброзно-кистозной мастопатией, становятся мягкими и безболезненными у 95 процентов женщин.

Миомы размером 9 - 16 недель после полугода применения экстракта уменьшаются вдвое. Обратите внимание - применяется только экстракт! Если же принимать его в комплексе с травами, то результаты можно получить просто потрясающие.

Рубрики: Здоровье

Процитировано 2 раз
Понравилось: 3 пользователям

Эти авторы внесли одинаковый вклад в эту работу.

Настоящий адрес: Исследовательский центр исследований трансляционного рака Wolfson Wohl, Университет Глазго, Garscube Estate, Switchback Road, Bearsden, Glasgow, Scotland G61 1BD.

Настоящий адрес: Национальный фонд рака молочной железы, уровень 9, 50 Питт-стрит, Сидней, NSW 2000, Австралия.

Персин является растительным токсином, который проявляет синергическую цитотоксичность с тамоксифеном в клеточных линиях рака молочной железы человека. Здесь мы рассмотрели способность persin обходить резистентность к тамоксифену и обозначили вовлеченные внутриклеточные сигнальные пути.

Индукцию апоптоза в тамоксифен-устойчивых и чувствительных клетках рака молочной железы измеряли с помощью проточной цитометрии после лечения пертин-тамоксифеном. Маркеры эндоплазматического ретикулярного стресса (ERS) анализировали после лечения, а их причинная роль в опосредующем индуцированном персином апоптозе определялась с использованием химических ингибиторов и интерференции РНК.

Клетки, которые были устойчивы к апоптотической концентрации тамоксифена, сохраняли апоптотический ответ на персин. Перпин-индуцированный апоптоз ассоциировался с увеличением маркеров ERS, то есть экспрессии CHOP и сплайсинга XBP-1 и был снижен с помощью сиРНК CHOP. Ингибитор CASP-4 Z-YVAD-FMK заметно ингибировал индуцированный персинами апоптоз как в чувствительных к тамоксифену, так и в резистентных клетках.

Цитотоксические эффекты персина зависят от CASP-4 и опосредуются CHOP-зависимыми и независимыми сигнальными каскадами ERS. Повышенная сигнализация ERS способствует реинвазированному сопротивлению тамоксифена.

Рак молочной железы остается наиболее распространенным раком женщин и второй по частоте причиной смерти от рака, несмотря на значительное снижение смертности от рака молочной железы за последнее десятилетие. Однако, несмотря на широко распространенную клиническую эффективность эндокринной терапии для лечения рака молочной железы, они неэффективны как терапия для рецепторов эстрогеновых рецепторов (ER), и даже среди тех пациентов с ER-положительным заболеванием, которые изначально реагируют, являются собственными или приобретенными терапевтическая устойчивость остается основным препятствием для эффективного лечения (рассмотрено в Musgrove and Sutherland, 2009). Таким образом, существует явная потребность в разработке новых терапевтических стратегий, которые могут усилить и расширить чувствительность, особенно при гормональной рефрактерной болезни.

В настоящее время накоплены доказательства того, что аберрантная регуляция апоптоза играет важную роль в развитии эндокринной резистентности (Butt et al, 2007; Musgrove and Sutherland, 2009). Более конкретно, недавние исследования подчеркнули роль эндоплазматического ретикулума в инициировании патологически и терапевтически релевантной апоптотической программы (Moenner et al., 2007; Liao et al., 2008), которая, будучи нарушена, может быть связана с антиэстрогенной резистентностью (Gomez et al, 2007). Дисбаланс в гомеостазе эндоплазматического ретикулума, вызванный клеточными стрессами, такими как гипоксия, низкий уровень глюкозы или накопление несогласованных белков, приводит к генерации опосредованной эндоплазматическим ретикулумом реакции стресса и инициированию собственного апоптотического пути, опосредованно, частично, посредством образование церамида (Liao et al, 2008).

Реакция эндоплазматического ретикулярного стресса (ERS) также была в последнее время сосредоточена на терапевтической перспективе рака, учитывая ее новую роль в качестве защитного механизма против цитотоксичности, вызванной химиотерапией, и в качестве потенциального инициирующего этапа в развитии хеморезистентности (обзор в Schönthal, 2009 ). Раковые клетки часто демонстрируют повышенные уровни маркеров ERS по сравнению с их незлокачественными аналогами, что приводит к гипотезе о том, что они существуют в состоянии хронической ERS низкого уровня как адаптивный механизм, позволяющий рост и выживание в неблагоприятных условиях, таких как гипоксия и низким питательным средам. Этот дифференциальный статус ERS нормальных и злокачественных клеток также дает возможность для терапевтического вмешательства, поскольку он может сенсибилизировать раковые клетки к индукторам апоптоза.

Фитохимические вещества предоставили особенно обильный источник противораковых агентов (Nishino et al, 2005), и мы ранее описали новый растительный токсин, персин, который обладает уникальными действиями in vivo в эпителии молочной железы и мощными апоптозными эффектами в молочной железе человека раковых клеток in vitro (Butt et al, 2006). Персин является авокадином авокадо, полученным из биосинтеза длинноцепочечных жирных кислот с близкой структурной гомологией к существенной n-6 полиненасыщенной жирной кислоте (PUFA), линолевой кислоте. Интересно, что конъюгированные линолевые кислоты (изомеры линолевой кислоты) обладают антиканцерогенными свойствами с особой эффективностью против рака молочной железы (Ip et al, 2002). Кроме того, другие PUFA, структурно сходные с персинами, могут ослаблять чувствительность рецепторов стероидных гормонов к циркулирующим эстрогенам путем прямой модуляции уровней рецепторов, и эти данные создали обоснование для многообещающего клинического испытания II фазы гамма-линолевой кислоты и антиэстрогена, тамоксифена как первичной терапии рака молочной железы, которая продемонстрировала значительное улучшение общего клинического ответа (Kenny et al, 2000). Персин также проявляет сильную синергическую цитотоксичность с активным метаболитом тамоксифена, 4-гидрокситамоксифена (4-OHT) in vitro как в ER-положительных, так и ER-отрицательных клетках рака молочной железы, но не в фенотипически нормальных грудных эпителиальных клетках (Roberts et al, 2007). Этот синергизм опосредуется с помощью усиленной церамидной сигнализации — более конкретно, персин генерирует продукцию de novo ceramide, которая дополнительно усиливается ингибированием цеоламидогликозилированием 4-OHT (Roberts et al, 2007). Таким образом, генерация ERS-ответа, опосредованного церамид-сигнализацией, может представлять собой инициирующее начало восходящее событие в цитотоксичности, вызванной персинами, что, в свою очередь, может влиять на его способность модулировать чувствительность к тамоксифену.

Здесь мы дополнительно определили механистическую основу цитотоксичности и синергии, индуцированной персинами, с 4-OHT в клетках рака молочной железы человека, путем определения ее влияния на пути ERS в 4-OHT-чувствительных и -резистивных клеточных линиях. Мы демонстрируем, что персин вызывает апоптоз как в 4-OHT-чувствительных, так и в устойчивых клеточных линиях. Лечение персинами приводит к устойчивому ответу ERS с доказательством того, что способность персина увеличивать проапоптотический ответ на 4-OHT опосредуется посредством расширенной сигнализации ERS. Эти данные не только определяют внутриклеточные пути, опосредующие действия персина в клетках рака молочной железы, но также выделяют потенциальные терапевтические стратегии, через которые можно преодолеть сопротивление 4-ОНТ.

Ранее была описана изоляция и очистка персина от вымороженных лиофилизированными листьями авокадо, P. americana и мониторинга чистоты партии (Oelrichs et al., 1995).

Линии клеток рака молочной железы человека MCF-7 (Мичиганский раковый фонд, Детройт, Мичиган) и T-47D (EG & G Mason Research Institute, Worcester, MA, USA) поддерживали в среде RPMI-1640, дополненной 5% фетальной телячьей сывороткой (FCS ), 10 мкг мл-1 инсулина и 2 мМ глутамина в стандартных условиях. Линия клеток TAM-R была получена из клеток MCF-7, как сообщалось ранее (Knowlden et al, 2003), и содержалась в не содержащем фенола крахмал RPMI-1640, дополненном 5% FCS, обедненным углеродом стероидами, 4 мМ глутамина , и 100 нМ 4-OHT. MC-5-21 (4-OHT-чувствительный) и MCF 5-23 (4-OHT-устойчивые) субклоны клеток MCF-7 (Hu et al, 1993) поддерживались в 10% FCS, 10 мкг мл-1 инсулина, и 4 мМ глутамина. 4-OHT был приобретен у Sigma (Сент-Луис, Миссури, США), ингибитора CASP-4, Z-YVAD-FMK и ингибитора панкаспазы, Z-VAD-FMK были приобретены у R & D Systems (Миннеаполис, США, США) и туникамицин был приобретен у Merck Pty. Ltd. (Kilsyth, VIC, Australia).

Для анализа M30 плавающие и прикрепленные клеточные популяции объединяли, фиксировали и пермеабилизировали в ледяном метаноле, а затем ресуспендировали в PBS / 0,5% бычьего сывороточного альбумина с FITC-конъюгированным моноклональным антителом M30 CytoDEATH (Enzo Life Sciences, Farmingdale, NY, USA ) до того, как M30-положительная (апоптотическая) популяция была определена проточной цитометрией на BD FACSCantoII (Becton Dickinson, Mountain View, CA, USA).

Белки из цельноклеточных лизатов разрешались при восстановительных условиях на 12% SDS-полиакриламидных гелях с использованием стандартных методов. Резолированные белки переносили на мембраны из поливинилидендифторида и зондировали антителами против связывающего белка иммуноглобулина (BiP) (Cell Signaling Technology, Danvers, MA, USA), CCAAT / энхансер-связывающий белок, гомологичный транскрипционный фактор / остановка роста и разрушающий ДНК ген-ген 153 ( CHOP / GADD153) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, США), Bim (Calbiochem, Дармштадт, Германия) и ERα (Santa Cruz Biotechnology) в течение ночи при 4 ° C. Иммунореактивные белковые полосы были обнаружены соответствующими анти-IgG-антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена, с последующей повышенной хемилюминесценцией (Pierce, Rockford, IL, USA). Блоты проверяли на равную загрузку путем повторного заражения анти-β-актин-антителом (Sigma).

Клетки инкубировали в течение 8, 16 или 24 ч с помощью регуляции туникимицина, пертина или транспортного средства, общую РНК выделяли с использованием набора RNeasy (Qiagen, Limberg, The Netherlands) и 1 мкг транскрибировали с обратной транскрипцией с использованием системы обратной транскрипции (Promega, Madison, WI, США) в соответствии с инструкциями производителя. КДНК XBP-1 амплифицировали с использованием человеко-специфических праймеров (GeneWorks, forward: 5′-AAACAGAGTAGCAGCTCAGACTGC-3 ‘reverse: 5′-GTATCTCTAAGACTAGGGGCTTGGTA-3’) и ДНК-полимеразы Pfu (Promega) и продукт ПЦР, расщепленный рестрикционным ферментом PstI (Promega) в течение 6 ч. Переваренный продукт ПЦР затем отделяли, используя 2% -ный электрофорез в агарозном геле.

Клетки инкубировали в течение 24 ч с персинами, персинами и CASP-4 -специфическим ингибитором Z-YVAD-FMK (20 мкМ), персином и ингибитором панкаспазы Z-VAD-FMK (20 мкМ) или с контролем на транспортном средстве. Для определения апоптоза использовался анализ М30.

Небольшая интерферирующая РНК (siRNA), специфичная для CHOP (ON-TARGETplus SMART pool human DDIT3) и нецелевое управление (ON-TARGETplus siCONTROL), была приобретена у Dharmacon Inc. (Lafayette, CO, USA). При посеве клетки трансфицировали Lipofectamine 2000 (Invitrogen Life Technology Inc., Carlsbad, CA, USA) в присутствии siRNAs в соответствии с протоколом производителя. После инкубации в течение ночи клетки обрабатывали персином и / или 4-OHT в течение еще 24 часов.

Читайте также: