Мутация гена braf при колоректальном раке
Биологические функции генов семейства RAS
Одно из ключевых свойств любой опухоли — это нарушение баланса между клеточным делением, т.е. размножением клеток, и клеточной гибелью. Для того, чтобы процесс деления осуществлялся в норме, необходимо поступление верного сигнала в клеточное ядро. Подобным сигналом являются специальные белки – факторы роста. Они прикрепляются к определённым рецепторам на поверхности клеточной оболочки и запускают внутри клетки ряд последовательных биохимических реакций. Результатом становится производство и накопление внутри клетки белков, которые необходимы для дальнейшего деления.
Необходимо отметить, что активирующие мутации не только в этих генах, но и в других звеньях сигнальной цепочки могут приводить к постоянной стимуляции клеточного деления. К таким событиям относятся, например, мутации в генах EGFR, BRAF и др. Упомянутые генетические повреждения в разной степени свойственны опухолям различных органов. Например, мутации в генах семейства RAS (KRAS, NRAS, HRAS) встречаются при раке поджелудочной железы, толстой кишки, лёгкого, кожи и т.д. Мутации EGFR характерны для немелкоклеточного рака легкого, а повреждения BRAF с наибольшей частотой обнаруживаются при меланоме.
В каких случаях нужно сделать тест на мутацию в генах KRAS и NRAS?
Тестирование опухоли на наличие мутаций в генах KRAS и NRAS выполняется пациентам с опухолями толстой кишки. Тест позволяет лечащему онкологу решить вопрос о возможности использования в терапии антител к определенному фактору роста и деления клеток ‒ EGFR. Данные препараты – панитумумуаб или цетуксимаб ‒ блокируют расположенные на мембране клеток рецепторы эпидермального фактора роста (EGFR) и препятствуют росту опухоли.
Более того, существуют сведения о том, что ошибочное назначение анти-EGFR терапии пациентам, у которых мутация в перечисленных генах не выявлена, может ускорять рост опухоли. Частота мутаций в гене KRAS при опухолях толстой кишки достигает 50%. Ещё около 10-20% приходится на мутации в генах NRAS и BRAF. Таким образом, при правильном обследовании лечение антителами к EGFR должно назначаться не более 30-40% пациентов с раком толстой кишки, в остальных случаях используются другие схемы терапии.
Что делать, если в опухоли толстой кишки обнаружена мутация в гене KRAS или NRAS?
Обнаружение мутации в гене KRAS или NRAS является абсолютным противопоказанием к использованию цетуксимаба или панитумумаба, т.к. присутствие этих мутаций полностью препятствует противоопухолевому действию данных препаратов. Как упоминалось выше, при ошибочном назначении антител к EGFR пациентам с мутациями в генах RAS может наблюдаться ускорение роста опухоли – именно поэтому полноценное исследование данных генов является обязательным условием для подбора правильной терапии. В случае наличия мутаций в генах KRAS и NRAS в клетках опухоли успешно используются другие разновидности лечения.
Как сдать анализ на мутации в гене KRAS, NRAS, EGFR, BRAF?
Чтобы провести молекулярно-генетическое тестирование, специалистам необходимы опухолевые клетки. Они могут быть получены либо при биопсии, либо в ходе хирургической операции по удалению новообразования. При этом, материал для исследования должен быть подготовлен определенным образом. В противном случае тестирование будет невозможно.
В ходе первичного обследования онкологическому пациенту практически всегда выполняют биопсию, на основании которой происходит патоморфологическое подтверждение диагноза. Для этого полученные клетки пациента проходят многоэтапную химическую обработку. В результате из них создаётся специальный парафиновый блок. С одной стороны, он необходим для получения качественного тонкого среза (толщиной 5 мкм) с целью патоморфологической диагностики. С другой стороны, в правильно подготовленном парафиновом блоке молекулы ДНК надёжно сохраняются на протяжении десятилетий.
Аналогичные манипуляции патологи проводят в отношении опухолевых тканей, удалённых во время операции. Правильное выполнение процедуры фиксации тканей позволяет использовать образцы опухолей для молекулярно-генетического исследования ДНК спустя месяцы и годы после заливки образца в парафин.
Идеальным набором для молекулярно-генетического исследования является следующий комплект: парафиновый блок c тканью опухоли и одно стекло, окрашенное специальными красителями (гематоксилином и эозином). Всё перечисленное хранится в патологоанатомических архивах медицинских учреждений, а окраска гематоксилином и эозином – основная окраска, используемая в современной патоморфологической диагностике. Если медицинское учреждение по какой-либо причине не может предоставить блоки, то для молекулярно-генетического тестирования достаточно 5-10 неокрашенных срезов ткани опухоли на непокрытых стёклах толщиной 3-5 мкм и одно стекло, окрашенное гематоксилином и эозином.
Требования к упаковке материала перед транспортировкой
- Закрывающийся пластиковый пакет или контейнер, либо картонная коробка
- Полное соответствие номеров отправляемых блоков и стёкол в направлении на тест и копии патоморфологического заключения.
- Лабораторные стекла должны быть обёрнуты плотной бумагой для избежания повреждений.
- Хранение производится при комнатной температуре, не допустим нагрев блоков и стёкол выше +50 о С.
В настоящее время многие молекулярно-диагностические исследования выполняются за счет средств территориальных фондов ОМС регионов России (как Санкт-Петербурга, так и остальных субъектов РФ).
В норме ген BRAF вместе с факторами роста и гормонами участвует в регуляции деления клеток за счет активации специфического сигнального пути. Если же его структура изменяется, то процесс деления выходит из-под контроля. Мутации в гене BRAF выявляются при различных видах рака, однако на первом месте в списке онкологических заболеваний стоит меланома. Определить статус гена при данной болезни крайне важно, так как от этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения.
Частота и виды мутаций BRAF
Методы диагностики
Выявить мутации BRAF можно при помощи молекулярно-генетических методов диагностики. Для проведения исследования необходим образец тканей меланомы кожи, в которых содержится не менее 20% опухолевых клеток. Как правило, такой материал поступает в лабораторию после удаления, после чего он фиксируется в формалине и заключается в парафиновые блоки. Перед определением мутаций необходимо выполнить пробоподготовку. Материал извлекается из парафина, затем выполняется процесс экстракции ДНК, которая исследуется.
Базовым методом, который позволяет выявить мутации в гене BRAF, является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Это исследование является относительно простым и дешевым, обладает хорошей чувствительностью и специфичностью, однако имеет существенный недостаток. Один анализ позволяет определить только одну мутацию BRAF. Если же стоит задача выявить несколько мутаций, то исследование придется повторять.
Более совершенным считается секвенирование, при помощи которого можно установить точную последовательность ДНК целого гена. Данный метод более затратный и требует дорогостоящего оборудования, но при этом он позволяет одновременно выявить все мутации в гене BRAF за одно исследование. Среди недостатков секвенирования можно отметить риск получить ложноотрицательный результат (выявляется в 2%-10% случаев) из-за присутствия в материале большого количества нормальных клеток с неизмененной ДНК.
Зачем определять BRAF мутацию при меланоме
Определение мутации в гене BRAF имеет важное значение при подборе лечения меланомы. Одним из современных методов является таргетная терапия, которая направлена на устранение конкретного механизма образования опухолевых клеток. В случае с меланомой применяются ингибиторы мутированного фрагмента гена BRAF, которые прерывают цепочку биохимических реакций и не дают опухоли развиваться дальше. При назначении таких препаратов определение статуса гена BRAF должно проводиться в обязательном порядке. При отсутствии мутации дорогостоящее лечение окажется неэффективным, а в некоторых случаях может и ускорить прогрессирование опухолевого процесса.
Препараты из группы ингибиторов BRAF могут применяться только при лечении метастатической меланомы. При этом не изучена эффективность лечения в адъювантном режиме, поэтому такие препараты не назначают пациентам, у которых выполнялось хирургическое удаление опухоли или метастазов, а также химио- и лучевая терапия.
Первыми зарегистрированными препаратами из группы ингибиторов BRAF, которые начали применяться при лечении метастатической и неоперабельной меланомы, стали вемурафениб и дабрафениб. При проведении клинических испытаний, они показали очень хорошие результаты. В настоящее время применяется комбинированное лечение меланомы, при котором, кроме ингибиторов BRAF назначаются ингибиторы МЕК. Такое сочетание позволяет максимально замедлить прогрессирование заболевания и увеличить продолжительность жизни пациентов.
Несмотря на большие успехи в лечении меланомы, все еще остаются нерешенными несколько проблем. Во-первых, отсутствуют эффективные методы терапии, которые можно применять при отсутствии мутаций в гене BRAF. Во-вторых, при назначении ингибиторов BRAF у пациентов спустя некоторое время развивается устойчивость к такому лечению, и меланома начинает снова прогрессировать.
Результаты клинического исследования II фазы, проведенного Southwest Oncology Group (SWOG) 1406 у больных метастатическим колоректальным раком (КРР) с наличием мутации в гене BRAF V600, демонстрируют возможность значительного увеличения выживаемости без прогрессирования (ВБП) при добавлении ингибитора BRAF-киназ вемурафениба к комбинации цетуксимаба и иринотекана.
Частота мутаций в гене BRAF у больных метастатическим КРР достигает 7%. Ее наличие ассоциируется с агрессивной биологией опухоли, снижением эффективности стандартных режимов лекарственной терапии, включающих 5-фторурацил, иринотекан, оксалиплатин и ингибиторы рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR), и, как следствие, ухудшением показателей общей выживаемости больных. По мнению большинства исследователей, необходим поиск принципиально новых режимов противоопухолевой терапии в отношении данной небольшой, но неблагоприятно протекающей подгруппы метастатического КРР.
В основе научного обоснования клинического изучения триплета противоопухолевых агентов лежат следующие представления: наличие мутации в гене BRAF V600 сопровождается постоянной неконтролируемой активацией МАР-киназного сигнального пути. Назначение ингибитора BRAF-киназ приводит к подавлению патологической передачи сигнала. В то же время, по механизму обратной связи запускается стимуляция EGFR, приводящая к восстановлению активности МАР-киназного сигнального пути. Таким образом, двойное ингибирование BRAF и EGFR предоставляет потенциальную возможность максимального угнетения патологической передачи сигнала.
В доклинических испытаниях, а также в клиническом исследовании I фазы у больных распространенным КРР с наличием мутации в гене BRAF V600 комбинация иринотекана, цетуксимаба и вемурафениба продемонстрировала обнадеживающие результаты в отношении противоопухолевой эффективности, что и явилось основанием для инициации настоящего клинического исследования.
В клиническом исследовании SWOG 1406 принимали участие более 250 исследовательских центров, общее количество включенных больных метастатическим КРР с наличием мутации в гене BRAF V600 и диким типом RAS составило 106. Средний возраст пациентов составил 62 года, 59% из них – женщины, 41% - мужчины. Около 50% больных ранее получали не более 2-х линий лекарственной терапии, 39 % из них – с применением иринотекана. Предшествовавшая анти-EGFR-направленная терапия не допускалась. Пятидесяти двум больным, рандомизированным в контрольную группу, назначалась лекарственная терапия комбинацией иринотекана (180 мг/м2 внутривенно каждые 14 дней) и цетуксимаба (500 мг/м2 внутривенно каждые 14 дней). 54 пациента исследуемой группы получали триплет противоопухолевых препаратов с включением вемурафениба (960 мг 2 раза в сутки, внутрь). При инструментальном подтверждении прогрессирования в контрольной группе допускался кроссовер больных в исследуемую группу. Первичной конечной точкой в исследовании являлась ВБП по оценке исследователей.
Результаты исследования:
Медиана ВБП составила 4.4 мес (95% ДИ 3.6 – 5.7 мес) в исследуемой и 2.0 мес (95% ДИ 1.8 – 2.1 мес) в контрольной группах (P = 0.0002). Контроль над заболеванием был достигнут у 67% в исследуемой и у 22% больных в контрольной группах (Р = 0.001). Частота объективных ответов составила 16% и 4% соответственно (Р = 0.09).
Побочные эффекты:
Нежелательные явления ¾ степени достоверно чаще регистрировались в исследуемой группе и были представлены нейтропенией (28% и 7%), анемией (13% и 0%) и тошнотой (15% и 0% соответственно). Частота артралгий, являющихся одним из типичных осложнений терапии вемурафенибом, значительно возросла у больных, получавших изучаемую комбинацию препаратов. В то же время применение вемурафениба не сопровождалось увеличением частоты кожной токсичности и астении. Осложнения являлись причиной прекращения лечения у 18% и 8% больных в экспериментальной и контрольной группах соответственно. Исследователи предполагают, что увеличение частоты побочных эффектов может быть обусловлено большей продолжительностью лечения. Не менее 50% больных из контрольной группы после документального подтверждения прогрессирования получали исследуемую комбинацию препаратов.
Исследователи планируют проведение подгруппового анализа с целью оценки роли иринотекана в данной комбинации, в частности влияния его предшествующего применения на эффективность терапии. Кроме того, планируется определение клинического значения микросателлитной нестабильности (MSI), выявляемой у 25% больных метастатическим КРР с мутацией в гене BRAF.
На основании результатов исследования SWOG 1406 исследователи делают вывод о наличии явного клинически значимого синергизма таргетных препаратов в отношении МАР-киназного сигнального пути. Дальнейшее изучение эффективности подобных комбинаций противоопухолевых агентов может привести к разработке принципиально нового варианта лекарственного лечения больных метастатическим КРР с наличием мутации в гене BRAF. Кроме того, существует потенциальная возможность усиления двойного ингибирования МАР-киназного сигнального пути путем включения в комбинацию ингибитора МЕК-киназы.
Примечание:
Вемурафениб является ингибитором серин-треонин киназы, кодируемой геном BRAF (v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1). В результате мутаций в гене BRAF происходит конститутивная активация онкогенного белка BRAF и, как следствие, пролиферация клеток при отсутствии факторов роста. Согласно проведенным биохимическим исследованиям вемурафениб является мощным ингибитором BRAF-киназ с активирующими мутациями в кодоне 600.
Перед применением вемурафениба пациенты должны пройти валидированный тест на наличие BRAF V600 мутации. Эффективность и безопасность вемурафениба у пациентов, опухоли которых несут редкие BRAF V600 мутации, отличные от V600E и V600K, не была убедительно доказана. Вемурафениб не следует применять у пациентов со злокачественной меланомой, экспрессирующей BRAF дикого типа.
Рекомендуемая доза вемурафениба составляет 960 мг (четыре таблетки по 240 мг) два раза в день (суточная доза составляет 1920 мг), внутрь.
Наиболее частыми нежелательными реакциями (>30%) при применении вемурафениба были артралгия, утомляемость, сыпь, реакция фотосенсибилизации, тошнота, диарея, алопеция, зуд и папиллома кожи.
Источники:
Материал подготовлен Отделом НОИМТОиР: старшим научным сотрудником, к.м.н. А.И. Семеновой
Молекулярно-генетическое исследование биоптата опухолевой ткани для определения специфической мутации, которая играет роль в злокачественной трансформации клеток.
Генные мутации при меланоме, белок сигнального пути.
BRAF Mutation Testing, BRAF Gene Mutation Test, BRAF Gene Mutation Analysis.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат опухолевой ткани в емкости с фиксирующим раствором или парафиновый блок с биоптатом ткани опухоли. Может использоваться как образец первичной опухоли, так и полученный из метастатического очага.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Специальной подготовки не требуется.
Общая информация об исследовании
Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них. Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную "цель" в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как, в отличие от стандартной химиотерапии, практически не действуют на нормальные ткани и характеризуются большей эффективностью. Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия. Кроме того, обнаружение в опухолевых клетках определенных генетических аномалий может использоваться как прогностический фактор.
Сравнительно часто патологическим механизмом злокачественной трансформации клеток является нарушение в так называемых сигнальных путях. Сигнальный путь представляет собой цепь, по которой активирующий сигнал от рецептора, располагающегося на поверхности клетки, через несколько внутриклеточных белков передается в ядро. Одним из таких сигнальных путей является МАРК (Mitogen-activated proteinkinase). Внеклеточные сигналы (факторы роста, гормоны), связываясь с рецептором, активируют путь МАРК, что в свою очередь приводит к активации в клеточном ядре генов, ответственных за пролиферацию. Каскад сигнального пути МАРК включает в себя белки четырех семейств: RAS, RAF, MEK и ERK. Семейство RAF представлено тремя белками - ARAF, BRAF и CRAF, - наибольшей активностью из них обладает BRAF. В норме сигнальный путь активируется только через связывание рецептора со специфической молекулой. Однако при возникновении точечных мутаций в генах, кодирующих сигнальные белки, они могут приобретать новые свойства. Так, при определенных мутациях гена BRAF этот белок становится способным активировать сигнальный путь независимо от рецептора и запускать процесс неконтролируемого клеточного деления.
Мутации гена BRAF характерны для меланом кожи (по разным данным, от 30 до 70%), колоректального рака, немелкоклеточного рака легкого (около 3%), а также для папиллярного рака щитовидной железы. Наиболее часто выявляется мутация гена BRAF V600E, вторая по частоте V600K, значительно реже встречаются V600D и V600R. Буквы в обозначении данных мутаций означают замену нормальной аминокислоты (валина) в шестисотом положении белка на другую. После открытия роли мутаций гена BRAF в патогенезе опухолей, в том числе меланомы, были разработаны новые препараты – низкомолекулярные ингибиторы мутированного фермента BRAF. Эли лекарственные средства блокируют патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и тормозят развитие опухоли. К BRAF-ингибиторам относятся вемурафениб (зелбораф) и дабрафениб.
Материалом для исследования служит ДНК опухолевых клеток. Она может быть выделена из биоптата опухоли, находящегося в парафиновом блоке. Если же на исследование предоставлен образец опухоли в емкости с фиксирующим раствором, из него изготавливаются парафиновые блоки для возможности длительного хранения и использования в последующем для других диагностических тестов.
Для чего используется исследование?
- Для определения показаний к назначению низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF.
Когда назначается исследование?
- Пациентам с неоперабельной или метастатической меланомой (стадии IIIC – IV), а также распространенным немелкоклеточным раком легкого при отсутствии мутации гена EGFR.
Что означают результаты?
Положительный результат - мутация обнаружена. Также указывается вид выявленной мутации.
Отрицательный результат – мутации не обнаружены.
Что может влиять на результат?
Нарушение техники фиксации биопсийного материала, которое может привести к деградации генетического материала и невозможности тестирования.
- Воздействие BRAF-ингибиторов на опухолевые клетки с отсутствием мутаций в гене данного белка может, наоборот, сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Поэтому исключительно важно проводить диагностику мутационного статуса BRAF. BRAF-ингибиторы не должны назначаться в тех случаях, когда мутация не обнаружена или ее статус достоверно неизвестен.
Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве
Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)
Гистологическое исследование биопсийного материала
Гистологическое исследование доброкачественных образований кожи (папилломы, невусы и др.)
Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски
Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ
Кто назначает исследование?
Литература
Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1512-1513.
The Basic science of Oncology. Fifth edition. Ian F. Tannock, Robert G. Bristow, Richard P. Hill, Lea Harrington. McGrow-Hill Education, 2013. Pages 173-179.
Доклад "Современные возможности таргетной терапии НМРЛ", Имянитов Е. Н. Вестник московского онкологического общества, №11 (602), 2013. С. 3-6.
Колоректальный рак является широко распространенной в мире патологией, ежегодная заболеваемость достигает 1 миллиона случаев, а ежегодная смертность превышает 500 000. Колоректальный рак занимает второе место по смертности от злокачественных новообразований среди мужчин и женщин. Причем большое количество случаев заболевания относится к метастазной форме рака (mCRC). В настоящее время в Израиле терапия пациентов с колоректальным раком основывается на использовании таргетных моноклональных антител, которые блокируют рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), в сочетании с традиционными хемотерапевтическими агентами. EGFR представляет собой трансмембранный рецептор тирозин-зависимой киназы, контролирующий запуск каскада фосфорилирований, передающих сигнал от клеточной мембраны к ядру клетки, что играет ключевую роль в клеточном росте, распространении и активности опухоли. Нарушение этого сигнального пути приводит к отмиранию опухоли.
Таким образом, EGFR является объектом направленной антиопухолевой терапии препаратами нового поколения на основе моноклональных антител. К таким препаратам относятся
- Bevacizumab (Avastin®),
- Cetuximab (Erbitux®),
- Panitumumab (Vectibix™).
BRAF представляет собой RAS-регулируемую серин/треонин киназу, которая наряду с KRAS является еще одним участником сигнального пути Ras-Raf-MAPK, контролирующего клеточную пролиферацию, дифференцировку и апоптоз. Как KRAS-, так и BRAF-гены, склонны к мутациям. Мутации в гене BRAF часто обнаруживаются в злокачественных опухолях человека, таких как:
- метастатический колоректальный рак,
- немелкоклеточный рак легких,
- меланомы и
- папиллярный рак щитовидной железы.
Таким образом, тестирование гена BRAF дополняет анализ на KRAS мутации, и имеет ключевое значение для принятия решения о типе противоопухолевой терапии.
Мутации BRAF как биологический маркер предоперационной диагностики рака щитовидной железы
Пальпаторно определяемые тиреоидные узлы встречаются у 5–7% взрослого населения. При этом представляется важным исключить случаи малигнизации увеличенных тиреоидных узлов, что составляет 5–15% всех увеличенных узлов. Тонкоигольная аспирация в настоящий момент является стандартной диагностической процедурой, позволяющей патологам гистологически охарактеризовать тиреоидные узлы, для определения является ли узел доброкачественным или злокачественным. Однако в 10–40% случаев гистологическая диагностика не дает однозначного ответа по причине перекрывающихся цитологических характеристик доброкачественных и злокачественных тиреоидных узлов. Наличие мутации в гене BRAF (в кодоне 600) в клетках аспирата щитовидной железы свидетельствует об агрессивном характере опухоли, что определяет дальнейшую тактику оперативного вмешательства.
В настоящее время мутация гена BRAF — V600, используется в диагностике меланомы, рака толстого кишечника, рака прямой кишки, но в ближайшем будущем показания для этого теста будут расширены.
Исследуемый материал — ткань опухоли, тест применяется для выбора таргетированной терапии.
Определение мутаций гена BRAF имеет исключительно важное значение для прогноза болезни и лечения для многих видов рака.
Если тест на мутацию гена BRAF положительный, это означает, что V600 мутация найдена.
Интерпретация теста при меланоме
Расшифровка анализа онкомаркера BRAF V600 показывает, что примерно 40-60% кожных меланом имеют разные мутации BRAF. В 90% случаев эти генетические поломки определяются тестом V600.
Существует лекарство — ингибитор (vemurafenib), которое способно подавить мутирование — то есть обладает противоопухолевым эффектом для клеток меланомы, в которых обнаружена мутация V600.
Поэтому для лечения меланомы крайне важно выполнить этот тест.
Рак кишечника
Определение Онкомаркера BRAF V600 при колоректальном раке необходимо, чтобы отличить наследственный неполипозный рак — колоректальную карциному (HNPCC) от спорадического колоректального рака.
Разграничение этих двух заболеваний имеет важное значение. Дополнительно выполняют тест на онкомаркер MSI-H. Пациенты с наследственным неполипозным раком и члены их семьи должны пройти расширенное генетическое тестирование. Так как при данной семейной форме рака кишечника возможны повторные опухоли органов, и таким людям может быть предложена операция в профилактических целях.
Выявление микросателитной нестабильности (MSI) — важный фактор в понимании механизма колоректального неполипозного наследственного рака. Полная расшифровка генома — дорогое удовольствие, поэтому генетическое тестирование может быть предложено только выборочно. Пациенты могут быть отобраны с помощью предварительного теста BRAF V600
Наличие мутации BRAF означает, что опухоль нечувствительна к некоторым лекарствам — ингибиторам эпидермального клеточного роста (EGFR). Иногда для уточнения назначают исследование онкомаркера k-ras для подтверждения устойчивости опухоли к анти-EGFR лекарствам.
Определение онкомаркера используют и для прогноза болезни, положительный тест связан с худшим прогнозом.
Рак щитовидной железы
Расшифровка онкомаркера BRAF при опухоли щитовидной железы:
- Наличие мутации ассоциируется с худшим прогнозом и метастазами
Определение онкомаркера BRAF V600 выполняют и при других видах рака :
Для дифференциального диагноза некоторых форм лейкемии, лимфомы, опухолей легкого, глиомы, печени, желудка, пищевода.
Материал для исследования
Онкомаркер определяют в ткани опухоли. Материал для исследования должен быть доставлен в лабораторию в свежем или замороженном состоянии или в формалине, парафине.
Чаще всего применяют технику определения — реакцию полимеризации в реальном времени, реже различные модификации определения ДНК
Есть ли норма у этого теста
Понятие нормы неуместно, когда мутацию определяют в опухоли. Болезнь уже есть и наличие или отсутствие мутации просто говорит о разных типах опухолей.
В норме данный онкоген принимает участие в контроле за размножением клеток, их ростом и дифференцировкой.
Мутация гена приводит к тому, что эти процессы оказываются бесконтрольными.
Ученые обнаруживает до 30 разных мутаций гена, но тест V600 позволяет определить 90% всех возможных патологических изменений гена.
Поломка гена выявляется в 27-70% меланом, в 5-22% колоректального рака, в 36-53% папиллярного рака щитовидной железы, 30% рака яичников и реже в опухолях другой локализации.
Теперь, когда мы подробно разобрали, что показывает онкомаркер BRAF V600, поясним, когда этот тест полезен.
- позволяет отличить папиллярный рак щитовидной железы от других видов злокачественных опухолей щитовидной железы и доброкачественных узловых образований щитовидной железы;
- спорадический рак толстой кишки от наследственного неполипозного колоректального рака (HNPCC);
- волосатоклеточный лейкоз от других В-клеточных лимфом с аналогичными клиническими и морфологическими особенностями;
- позволяет определить прогноз болезни: раковые заболевания с мутацией BRAF оказываются более агрессивны, чем рак без мутации, в случаях папиллярного рака щитовидной железы и колоректального рака;
- помогает в принятии решений о лечении, потому что у больных с распространенным колоректальным раком и положительным тестом на BRAF мутацию, вероятна устойчивость к ингибиторам эпидермального фактора роста (цетуксимабу и панитумумабу);
- целесообразно для целей таргетированной терапии, так как присутствие мутантного BRAF является ценной терапевтической мишенью, особенно в случае метастатической меланомы.
Исследования в отношении полезности обнаружения онкомаркера BRAF продолжаются. Тем не менее, в настоящее время, тестирование на BRAF мутацию широко используется только для таргетированной терапии распространенной злокачественной меланомы. Как будет собрано больше доказательств, определение онкомаркера BRAF мутации может стать стандартом в лечении в диагностике других видов злокачественных заболеваний.
Читайте также: