Гистологический анализ при онкологии

Как получают материал для гистологического исследования?

Процесс получения фрагмента ткани для гистологического исследования называется биопсия. Выделяют следующие виды биопсии:

• Кор-биопсия. Выполняется специальной иглой и автоматическим биопсийным пистолетом.
• Аспирационная биопсия. Применяется для забора жидкостного содержимого образований, например, кист или плевральной полости.
• Тонкоигольная аспирационная биопсия. Подвид аспирационной биопсии, материал забирается с помощью шприца и специальной иглы с заостренным или фестончатым краем. При таком методе возможно получить для исследования не только жидкостное содержимое, но и кусочек ткани.
• Аспирационно-режущая биопсия. При этом методе одной иглой берутся и фрагменты ткани, и клеточный материал для исследования.
• Трепанбиопсия. Забор производится трепаном — инструментом, представляющим собой полую трубку с заострённым концом. Применяется для взятия биопсии из костной ткани.
• Эксцизионная биопсия. Подразумевает удаление всего патологического образования (например, опухолевого узла) целиком. Наглядным примером эксцизионной биопсии является удаление увеличенного лимфатического узла при подозрении на лимфому.
• Скарификационная биопсия. Забор выполняется путём срезания тонкого пласта ткани, широко применяется для исследования новообразований кожи.
• Щипковая биопсия. Выполняется специальными биопсийными щипцами, часто применяется при заболеваниях желудочно-кишечного тракта.
• Браш-биопсия. Материал для исследования забирается с помощью специальной щёточки путём его соскабливания — например, со стенки бронха.
• Петлевая биопсия. Забор гистологического материала производится петлей одновременно с работой коагулятора. Применяется в отоларингологии, гинекологии.
• Отпечаток. Применяется при необходимости исследования отделяемого из эрозии или язвы — предметное стекло прикладывается к изъязвленной поверхности.
• Мазок-отпечаток. Материал для исследования снимается скальпелем, шпателем или специальной щёточкой и переносится на предметное стекло.

Как выполняется биопсия?

Биопсия проводится обычно под местной анестезией, в случае, если образование располагается достаточно глубоко — под контролем УЗИ или рентгена. От пациента не требуется какой-либо специфической подготовки (кроме, пожалуй, психологического настроя). Время процедуры не ограничено — если выполняется скарификационная биопсия или мазок-отпечаток, то требуется буквально несколько минут, а если речь идёт о биопсии глубоко расположенного образования, особенно вблизи крупных сосудов или нервов, то времени требуется значительно дольше.

В процессе выполнения биопсии иглу проводят к образованию и, в зависимости от выбранного метода, либо выполняют аспирацию одновременно с продвижением иглы к центру образования (если проводится аспирационная биопсия), либо вводят иглу в образование и фиксируют внутри неё столбик ткани (если проводится кор-биопсия).

Процесс получения ткани с помощью биопсийной игры на сегодняшний день является либо полуавтоматическим, либо автоматическим. При полуавтоматическом процессе продвижение желобка с иглой в патологический очаг производится вручную, а активизация канюли в игле, которая и захватывает ткань, происходит автоматически с помощью подпружиненного спускового механизма. В автоматическом варианте используется специальный биопсийный пистолет, и врачу требуется только поднести его к интересующей области.

Также возможно провести биопсию во время выполнения диагностического эндоскопического исследования, например, ЭГДС или бронхоскопии. В этом случае забор гистологического материала происходит практически безболезненно для пациента, хоть и причиняет определённый дискомфорт.

Кроме того, на гистологическое исследование будут направлены ткани, удалённые во время операции. Следует отметить, что в отдельных случаях операция может быть назначена как раз для получения гистологического материала (например, назначение раздельного диагностического выскабливания матки и цервикального канала с целью установить причину гинекологического заболевания).

Виды гистологического исследования

В первую очередь проводится собственно гистологическое исследование, то есть изучение специально подготовленной ткани, взятой при биопсии, под микроскопом. Процесс подготовки ткани для исследования включает несколько этапов.

1. Кусочек ткани обезвоживают и пропитывают парафином, тем самым формируя небольшой кубик, в который и заключена ткань.
2. Далее с парафинового кубика выполняют срезы микротомом, причём толщина срезов может достигать 3 микрометров.
3. Срезы переносятся на стекло, подготавливаются к окрашиванию и окрашиваются одним из известных методов с целью облегчения определения и дифференцировки отдельных структур ткани при проведении исследования.

Таким образом, процесс подготовки ткани к гистологическому исследованию достаточно длительный, чем и объясняется получение заключения врача через несколько дней после биопсии. Однако в случае, когда требуется срочное исследование (например, оценка краёв резекции в ходе операции или же исследование сторожевого лимфоузла при раке молочной железы), процесс подготовки ткани может быть сокращён до получаса, однако в этом случае качество полученного гистологического препарата существенно ниже, поэтому после операции проводится тщательное изучение биоматериала в плановом порядке.

Какие исследования могут дополнять изучение срезов под микроскопом? В первую очередь это иммуногистохимическое исследование, позволяющее определить гистологическую принадлежность опухоли, что крайне важно, например, при исследовании метастаза из невыявленного первичного очага. В этом случае оценивается экспрессия различных генов и их белков в ткани. Также при раке молочной железы иммуногистохимическое исследование позволяет определить, есть ли у опухоли рецепторы к эстрогену и прогестерону, и, соответственно, назначить требуемое при выявленном молекулярном подтипе химиотерапевтическое лечение и гормонотерапию. Наконец, определение экспрессии белка Her2/neu позволяет заключить, показана ли больному раком молочной железы или раком желудка таргетная терапия.

Отдельно хотелось бы остановиться на цитологическом исследовании. В отличие от гистологического исследования, при котором предметом изучения являются ткани, при цитологическом анализе изучаются отдельные клетки на предмет патологических отклонений. Цитологическое исследование обладает меньшей точностью, нежели гистологическое, но позволяет дать заключение о природе заболевания в тех случаях, когда невозможно получить кусочек ткани (например, при анализе плеврального выпота — является ли он связанным с опухолевым поражением плевры или нет — или смывов с брюшины в случае подозрения на метастатические отсевы рака яичников).

Показания для проведения гистологического исследования

Гистологическое исследование — наиболее точный метод диагностики, к которому следует прибегать, когда все другие исследования в совокупности не могут однозначно указать на конкретный диагноз.

• отслеживать динамику, например, подтвердить отдаленное метастазирование;
• менять тактику лечения сообразно результатам, например, если больной раком молочной железы химиотерапия проводилась до операции, а результаты послеоперационного гистологического исследования не показали полного ответа опухолевых клеток на лечение, в отдельных случаях возможно назначить таблетированную химиотерапию в послеоперационном периоде.

Далее, гистологическое исследование показано в случае заболеваний, которые по своей сути являются доброкачественными, но обладают потенциалом к озлокачествлению. Таковыми являются, например, полипы кишечника; сами по себе они не несут угрозы для жизни, но потенциально могут переродиться в опухоль, поэтому полипы после удаления обязательно подлежат исследованию с целью определить, не появились ли в них опухолевые структуры.

Широкое применение гистологического исследования наблюдается и при неопухолевых заболеваниях. В гастроэнтерологии и гинекологии исследование тканей и клеток, помимо исключения опухолевого процесса, также предназначено для оценки воспалительных процессов и их динамики, выявления эндокринных нарушений. Большую роль гистологическое исследование имеет и при лечении аутоиммунных заболеваний, позволяя оценить степень активности патологического процесса и тяжесть поражения, а также ответ на проводимую терапию.

Наконец, гистологическое исследование, а, вернее, его подвид — цитологическое исследование — нашло своё место и в скрининге. Исследование мазка-отпечатка с шейки матки позволяет определить предраковое состояние или уже развивающуюся опухоль, и простота и эффективность данного метода позволила включить мазок в скрининг на рак шейки матки.

Следует отметить, что противопоказаний как таковых к проведению гистологического исследования нет, так как забор гистологического материала является малоинвазивной и хорошо переносимой процедурой. Возможные осложнения могут быть связаны с индивидуальной реакцией пациента на анестетики или же с нарушением свёртываемости крови. В любом случае пациенту назначается покой и холод на место проведения биопсии, анальгетики при болях.

Результат гистологического исследования

Расшифровкой результатов гистологии должен заниматься лечащий врач, так как гистологическое исследование назначается именно им и с совершенно определенной целью. Полученное заключение по цитологическому или гистологическому исследованию поможет врачу в установке клинического диагноза и в подборе требуемых на данный момент методов лечения.

1. Определение
2. Что выявляет и показывает?
3. Для чего нужна дифференцировка?
4. Показания к применению
5. Биопсия
6. Гистология в гинекологии
7. Процедура диагностики
8. Остались вопросы?

Определение

Гистология — раздел науки, которая изучает строение тканей в организме, как у человека, так и у животных в ветеринарии. Гистологическое исследование показывает патологические отклонения в строении ткани. Врач проводит биопсию — это процедура, когда из органа или с другой поверхности берётся небольшой кусочек мягкой ткани, подозрительный на вид и по поведению, а далее отправляется на исследование.

Что выявляет и показывает?

Далее врач смотрит под микроскопом строение и положение клеток в ткани. У каждой ткани в организме должен быть свой порядок и расположение клеток. Помимо этого они должны иметь своё строение, размер и структуру. Если есть какое-то отклонение, то это может указывать на болезнь, воспаление или онкологию.

Помимо гистологии и гистологического исследования, есть так называемая цитология. Многие пациенты путают, эти два понятия и не знают — в чем разница между цитологией и гистологией.

Цитология — это область медицинской науки, которая изучает строение одной клетки, её ядро, функционирование, а также остальные органеллы. Забор ткани происходит одинаковый. Обычно врач смотрит и проверяет структуру ткани.

При диагностике он наблюдает, что структура не правильной формы и есть атипичные клетки (эти те клеточки, которые сильно отличаются по строению от здоровых). Например, у них увеличенное ядро или они имеют неправильную форму.

Теперь надо определить степень злокачественности и являются ли данные клетки раком. Дело в том, что атипичные клетки или те, которые отличаются от здоровых, не всегда могут быть раком. В доброкачественных опухолях есть такие же аномалии тканей.

Вот как раз гистология и показывает строение и тип клетки. Доктор под более сильным микроскопом просматривает строение атипичной клетки и выявляет степень её злокачественности.

Для чего нужна дифференцировка?

Если клетка раковая, нужно выяснить степень дифференцировки — то есть насколько она отличается от здоровых клеток. Обычно выделяют несколько типов:

1. Высокодифференцированный — клетки немного отличаются от здоровых. Такая патология развивается не быстро, а рак не такой агрессивный.
2. Средне дифференцированный — сильнее отличается от здоровых тканей. Средняя скорость роста и агрессии.
3. Низкодифференцированный — очень агрессивная форма онкологии.
4. Недифференцированный — патологические клетки рака, нельзя отличить от здоровых.

Как понятно из определения врач должен знать насколько опасна опухоль и насколько быстро она развивается, чтобы примерно рассчитать стратегию в лечении и знать сколько у пациента есть времени.

Также по степени дифференцировки, можно определить какой именно химиопрепарат будет наиболее эффективен. Зачастую самые агрессивные виды опухолей более чувствительны к сильнодействующим химическим реагентам и облучению.

Показания к применению

В частности её назначают практически всегда, чтобы наиболее точно знать характер рака. Особенно это решающе на первых стадиях, когда нельзя определить — доброкачественная это новообразование или злокачественное. Гистологическое исследование помогает:

• Точно поставить диагноз;
• Контролировать лечение и скрининг после операции, облучения и химии;
• Скорость патологического процесса;
• Степень дифференцировки;
• Наличие злокачественной опухоли.

Биопсия

Это процедура, когда врач берёт кусочек подозрительной ткани для гистологии и цитологии. Для этого могут использовать несколько вариантов. Если новообразование находится в досягаемой области, то могут просто иссечь кусочек скальпелем. В противном случае могут сделать надрез или провести операцию.

Например, в случае новообразования в матке с помощью специального прибора проникают в орган и берут образец эндометрия. По степени атипичности можно наблюдать — рак это или гиперплазию эндометрия. Образец ткани помещают в специальную пробирку в стерильную среду.

Далее в лаборатории срез пропитывают парафином. После чего его можно достаточно долго хранить. Перед рассмотрением материала под микроскопом, нужно произвести микротомию — то есть сделать маленький срез для того чтобы было удобно рассматривать его под микроскопом.

После накрывается стеклом, и оно может так храниться при любых условиях. Гистологическое стекло можно забрать и хранить у себя. Так частенько делают пациенты, чтобы была возможность обращаться в другие клиники.

ПРИМЕЧАНИЕ! Гистологические стёкла можно хранить только в тёмном, сухом месте при температуре не более 25 градусов по Цельсию.

Гистология в гинекологии

Даёт чёткую картину при постановлении диагноза. Если женщина жалуется на обильное кровотечение или боли в области яичником, тогда врач при осмотре может взять забор ткани. После исследования можно сразу понять характер заболевания и присутствие предракового или онкологического заболевания в шейке матки эндометрия.

Процедура диагностики

Зачастую при всех случаях онкологии проводят одни и те же исследования. Мы постараемся объяснить насколько важна гистология.

1. Возможный пациент приходит с жалобами к врачу или это может быть плановый осмотр.
2. Доктор проводит пальпацию, осмотр и опрашивает пациента.
3. Если есть подозрения на рак, то его направляют сдавать анализы — общий и биохимический анализ крови и кал.
4. При наличии отклонений в анализах пациента направляют к врачу-онкологу.
5. Делается рентгенография, УЗИ брюшной полости.
6. Если у пациента присутствует чёткая симптоматика, то начинается диагностика определенного органа.
7. В случае присутствия ярко выраженной опухоли, делают забор.
8. И уже тут проводят биопсию и отправляют кусок ткани на гистологию.
9. После могут провести КТ или МРТ. Это необходимо для выяснения степени инвазии — насколько раковая опухоль поражает здоровые ближайшие клетки и ткани.

Только после проведения тщательной диагностики, врач строит окончательный диагноз и придумывает стратегию для борьбы с недугом.

ПРИМЕЧАНИЕ! Расшифровкой может заниматься только квалифицированный врач с многолетним стажем. Для более точного диагноза стоит показать результаты нескольким врачам.

Остались вопросы?

Пишите их чуть ниже в комментариях, и наши специалисты на них сразу же ответят. Также можете поделиться своей историей, когда вы сталкивались с гистологическим или цитологическим обследованием.

Гистологическое исследование назначается для решения сразу нескольких задач. Этот анализ необходим для:

Подтверждения или опровержения предполагаемого диагноза.
Определения ранней стадии тяжелых, в том числе и онкологических заболеваний.
Изучения протекания патологического процесса в динамике.
Правильного выбора техники операции при необходимости удаления новообразований.
Дифдиагностики, позволяющей точно разделить две сходные по признакам патологии.
Выявления метастазов.
Определения структурных нарушений, образующихся в тканях в период лечения.
На сегодня хирургическое вмешательство, сеансы облучения и химиотерапия больным даже с уже явным протеканием злокачественного процесса без предварительно проведенной гистологии не назначаются.

Морфологическое изучение биоматериала позволяет подобрать адекватную схему терапии и при неопухолевых процессах.

Исследование востребовано в торакальной и абдоминальной хирургии, оториноларингологии, пульмонологии, гинекологии, гастроэнтерологии. При необходимости гистологическое лечение назначается пациентам с заболеваниями крови, мочеполовой системы.

Для пациентов с подозрением на злокачественную опухоль назначается прижизненное гистологическое исследование.

Биоматериал при необходимости можно получить практически из любого места человеческого тела, для этого используют:

Эксцизионную биопсию – получение тканей путем иссечения при проведении операции.
Пункционную биопсию. Проводится пункция патологического очага и при помощи иглы извлекается кусочек тканей.
Вырезание биоматериала из удаленных органов.
Щипцовую биопсию, то есть скусывание специальными щипцами необходимой части патологического образования. Этот вид биопсии возможен при проведении эндоскопического обследования – колоноскопии, эзофагогастродуоденоскопии, бронхоскопии.
Кюретаж – выскабливание патологического очага с органов с полостями или с тех полостей, которые образовались в результате злокачественного процесса.
Аспирационную биопсию – отсасывание при помощи шприца секрета из полого органа.
Метод получения биоптата в основном определяется заранее. Во время любой процедуры необходимо придерживаться правил взятия материала. Если их не полностью соблюдать, то возможны серьезные ошибки при проведении анализа.

Нередко лечащий или оперирующий врач планирует забор совместно с патологоанатомом, именно этот доктор имеет специализацию по гистологии. Не возбраняется и присутствие патологоанатома на операции, он укажет точное место забора образца тканей, определит его объем и метод фиксации.

Небольшой патологический очаг иссекают всегда полностью, захватывая кусочек здоровой окружающей ткани в 1-2 см шириной. Если операция назначена по поводу доброкачественной опухоли, то хирургическое вмешательство является радикальным. Хирургам необходимо при выборе техники манипуляции учитывать и косметический результат лечения.

Если технически невозможно убрать новообразование полностью, то объем иссеченного образца тканей должен быть максимально большим. Необходимо кусочек тканей брать там, где определяется зона отчетливой патологии.

В процессе иссечения нельзя забывать о том, что травматизация органов должна быть минимальной. Правильно требуется и иссекать ткани, если подобные воздействия слишком изменят структуру образца, то верно провести гистологию будет невозможно.

При использовании электроножа необходимо чтобы линия отсечения находилась на расстоянии не менее 2 мм от основного очага. К биоматериалу необходимо относиться с максимальной осторожностью – не допускается его сминать пальцами либо инструментами. Образец тканей удерживают только за здоровую полоску биоматериала.

Гистологическому исследованию по стандартам подвергается не только специально забранный биоматериал, но органы и ткани, удаленные при проведении операций.Высокие требования предъявляются к оформлению документации. Врач-клиницист должен промаркировать биоптат, внести в протокол данные о характере операции, кратко описать удаленную часть органа или новообразование. В документах указывается, какие образцы тканей и сколько направляются в патологоанатомическое отделение.

Оперирующий хирург заполняет направление на гистологию, проверяет точность данных пациента на наклейке на лабораторной емкости с биоптатом. Наклейка должна находиться на боку самой емкости, так как не исключается ошибочная замена крышек у одинаковых банок. Обязательно следует следить за четкостью заполнения всех граф направления.

Разборчиво пишут инициалы пациента, его возраст, домашний адрес, обязательно помечают локализацию патологии, связь биоматериала с окружающими его связками, мышцами, органами.

Если есть возможность немедленной отправки забранного материала на исследование, то его не помещают в фиксирующий раствор. Но нужно учитывать, что длительно находиться в первоначальном виде биоптат не может, так как он подсыхает, и достоверный анализ не получается. Чем меньше по размерам образцы тканей, тем быстрее они теряют влагу.

В случае отсутствия возможности проведения гистологи немедленно биоптат прямо на месте его забора следует зафиксировать. Для фиксации используется 10% формалина, этого раствора должно быть в 15 раз больше по сравнению с отправляемым на анализ кусочком тканей.

Если биоптат отличается большими размерами, то рекомендуется для лучшего проникновения в него формалина сделать небольшие размеры, но так чтобы не изменить качество правильно забранного материала. Не допускается сквозное проведение надрезов и их количество должно быть самым минимальным.

Уносить или увозить материал в патологическое отделение должен только медработник с соответствующим допуском к этому виду работ. Отправка и получение материала фиксируются документально.

Запрещено делить биоматериал и отправлять его в разные лаборатории, так как многие опухоли отличаются неоднородностью строения. Поэтому гистология с разных мест будет по результатам неодинакова и это не позволит правильно выбрать верную тактику лечения.Несколько образцов биоматериала из одного очага берется в том случае, если новообразование неоднородно или четкой границы опухоли нет.

Если материал для гистологии взять согласно всем правилам, то в зависимости от вида исследуемой ткани результат может быть готовы через 5-15 дней. Дольше всего проводится анализ костной ткани.

Высокая точность гистологического анализа объясняется тем, что морфологическое исследование выполняется под микроскопом.То есть у диагноста есть возможность вживую рассмотреть биоматериал и определить в нем патологические изменения без использования компьютерной томографии или УЗИ.Перед непосредственном осмотре тканей под микроскопом она окрашивается специальным реактивом, что позволяет четко увидеть все отклонения от нормы. При исследовании гистологических биопрепаратов врач указывает микроскопические изменения, проводит анатомический анализ выявленных изменений.

В заключении врач может дать несколько вариантов результатов:

Для того чтобы избежать ложных анализов требуется совместная работа патологоанатома и врача-клинициста. Врачи должны совместно тщательно обсудить все выявленные изменения при анализе, изучить историю болезни пациента.

В тех случаях, когда гистология назначается с диагностической целью, в заключении дают микроскопическое описание и пишут нозологическое заключение. При написании заключения в России руководствуются специальной медицинской номенклатурой.

На искажение результатов гистологии влияет неправильное фиксирование и хранение биоматериала, грубые ошибки при заборе биоптата. На точность анализа влияет и классификация диагноста. В норме в исследуемом образце клеточные изменения должны отсутствовать.

Исследование шейки матки и эндометрия
В гинекологии часто используется гистологическое исследование эндометриальных тканей. Оно позволяет установить нарушения в функционировании яичников и выявить ряд заболеваний, к ним относят и онкологию.

Тем пациенткам, у которых менструальный цикл не изменен, диагностическое выскабливание назначается за три дня до предполагаемой даты критических дней. При дисфункциональных кровотечениях чистку с забором материала для гистологии проводят, не дожидаясь остановки кровотечения.Полученный биоматериал окрашивают, применяя гематоксилин или эозин. Проведение анализа позволяет выявить все особенности и изменения в эндометрии, определяется строение стромы и железистых клеток.В норме железы в лютеиновую фазу менструального цикла приобретают пиловидную форму и немного расширяются.

Клетки желез должны иметь светлую цитоплазму и бледные ядра, в железах в обязательном порядке должен быть в норме обнаружен секрет.Если при гистологическом исследовании соскоба с шейки матки определяется незначительное изменение, то это свидетельствует о развитии доброкачественной опухоли либо о воспалении. При обнаружении огромного числа измененных клеток не исключается предраковое состояние или злокачественный процесс.

Гистологическое исследование (патоморфологическое исследование) - это исследование специально подготовленных срезов ткани под микроскопом. Материал для гистологического исследования чаще всего получают с помощью биопсии - взятия тканей из патологического образования с диагностической целью.

Гистологическое исследование биопсийного материала разделяется на срочное и плановое.

При срочном гистологическом исследовании биопсийного материала, полученные ткани срочно доставляют в патоморфологическую лабораторию, после чего с помощью специального режущего инструмента – микротома – послойно нарезают исследуемый материал на срезы толщиной до 3 микрометров.

После того, как материал нарезан на тонкие кусочки, гистолог монтирует материал на стекло и окрашивает его с помощью специальных препаратов. Затем врач исследует полученные образцы ткани с помощью микроскопа. Срочные гистологические исследования производятся во время хирургического вмешательства для решения вопроса о характере и объеме продолжения операции. Срочное гистологическое исследование длится от 15 до 30 минут.

При плановом гистологическом исследовании биопсийного материала, ткани, полученные в результате биопсии, помещают в раствор формалина, после чего заливают в парафин, выполняют срезы микротомом, окрашивают материал, и затем исследуют под микроскопом на наличие опухолевых клеток.

Длительность исследования в этом случае составляет порядка 5-10 дней.

Гистологическое исследование биопсийного материала проводят на базе отделения патоморфологии, в специальной лаборатории, оборудованной необходимой аппаратурой.

Гистологическое исследование является наиболее важным в диагностике злокачественных опухолей, поэтому для качественно проведенного исследования необходимы качественно проведенная биопсия, высокая квалификация патоморфолога, хорошее оборудование патоморфологической лаборатории.

Патоформолог дает заключение о состоянии тканей, то есть устанавливает биологический тип опухоли, и на основании этого заключения врач-онколог составляет программу лечения рака в соответствии с рекомендациями ведущих международных онкологических сообществ – NCCN (Национальная онкологическая сеть), ESMO (Европейское общество медицинской онкологии), ASCO (Американское общество клинической онкологии).

Пересмотр гистологического материала можно сделать как и России, так и за рубежом. В зарубежных клиниках считается, что окончательное гистологическое заключение может быть выдано только после исследования гистологического материала двумя гистологами-патоморфологами. При подозрении на злокачественное заболевание необходимо выполнять биопсию и гистологическое исследование только в профильных онкологических учреждениях.

1. ИГХ исследования – что это такое
2. Суть методики
3. Кому показано
4. ИГХ исследования: что это такое и как проводятся
5. Расшифровка

ИГХ исследования – что это такое

ИГХ представляет собой методику, используемую в патологической анатомии для диагностики раковых и доброкачественных опухолей. Его назначают, когда установить точный диагноз стандартным гистологическим способом невозможно или необходима детализация клинически значимых параметров новообразований на молекулярном уровне.

Очень часто гистологии бывает недостаточно. В большинстве случаев причиной этому является крайне нетипичная структура патологического образования, что существенно затрудняет постановку точного диагноза. В частности, при лимфоме и лейкозе ИГХ делают практически всегда.

Нужно отметить, что всего насчитывается около 70 разновидностей лейкозов и лимфом. Верифицировать некоторые их них удается лишь путем нескольких исследований – гистологического, иммуногистохимического и молекулярно-генетического.

Суть методики

При развитии любого опухолевого процесса формируются чужеродные организму белки – антигены, в противовес которым иммунная система человека вырабатывает антитела – иммуноглобулины. Они прикрепляются к антигенам и связываются с эпитопами – основными частями антигенных макромолекул. Антитела выполняют сразу две функции: связывающую и эффекторную. Проще говоря, они напрямую мешают антигенам наносить вред и одновременно активируют комплемент, запуская ответную реакцию иммунитета.

Роль антигенов в данном случае принадлежит атипичным опухолевым клеткам. Перед тем как провести иммуногистохимическое исследование, срезы биометариала маркируются специфическими антителами к ним. В целях дальнейшей визуализации эти антитела окрашиваются ферментами. Далее, используя высокоточную оптику, наблюдают за поведением испытуемых клеток.

Если белковые соединения, помеченные как антитела, связываются с опухолевыми клетками, будет видно свечение – флюоресценцию, свидетельствующую о наличии искомых веществ. Так выявляют, например, рецепторы к гормонам и онкомаркеры. При подозрении на рак молочной железы таким образом обнаруживаются рецепторы к эстрогену и прогестерону.

Кому показано

В отдельных случаях иммуногистохимический анализ позволяет установить источник метастазов, когда локализация первичного очага неизвестна, а также провести дифференциальную диагностику при нескольких новообразованиях разного происхождения.

ИГХ может назначаться при бесплодии, хронических патологиях эндометрия, матки и яичников, привычных выкидышах. Ее целесообразно делать и в том случае, если беременность не наступает после нескольких процедур ЭКО.

Иммуногистохимия поможет обнаружить наличие клеток, препятствующих зачатию, и определить дальнейшую тактику лечения бесплодия.

Методом ИГХ оценивают и лекарственную чувствительность путем выявления:

• рецепторов половых гормонов – эстрогена, прогестерона и андрогенов. Необходимо при поражении женской репродуктивной системы;
• фактора роста опухоли Her2/neu. Биомаркер и терапевтическая мишень агрессивных типов рака груди;
• соматостатиновых рецепторов 2а и 5 типа, важных при карциноидах;
• мембранного белка иммуноглобулинов PD-L1, гена ALK и рецептора тирозинкиназы ROS. Данные показатели исследуются преимущественно при немелкоклеточном раке легких;
• микросателлитной нестабильности;
• индекса пролиферативной активности.

Трудно переоценить важность микросателлитной нестабильности (MSI), которая существенно расширяет прогностические и лечебные возможности у пациентов со злокачественными поражениями ЖКТ. Новообразования с низкой MSI медленнее растут и реже дают метастазы. Поэтому своевременное выявление MSI позволяет избежать назначения агрессивной, но заведомо неэффективной терапии.

ИГХ исследования: что это такое и как проводятся

Для выполнения ИГХ необходим биоматериал, забор которого осуществляется в основном путем взятия биопсии. Несколько реже его получают в ходе эндоскопической или классической открытой операции. Способ изъятия пораженной ткани зависит от типа и локализации рака. При этом следует учесть, что брать материал на анализ следует до начала терапии. В противном случае возможно искажение результатов исследования.

Этапы проведения анализа:

1. Полученный биоматериал фиксируют, обрабатывая в формалине, и отправляют в лабораторию.
2. Затем его обезжиривают и подвергают повторной фиксации, после чего заливают парафином.
3. Далее производится микротомирование – с готовых парафиновых блоков делаются тонкие срезы, которые помещаются на специальные стекла. Толщина среза составляет не больше 1 мкм.

Когда ткани лежат на стеклах, их обрабатывают раствором антител. Количество их видов ограничено несколькими десятками. Исследование реакций с применением до 5 разных антител проводится на малой панели. При более масштабном эксперименте нужна большая панель.

В ходе ИГХ рак любого органа проявляется эффектом свечения – флюоресценции, – благодаря чему выявляются злокачественные клетки, определяются рецепторы гормонов или другие заданные параметры.

Расшифровка

Изучением срезов биоматериала занимаются врачи-патологоанатомы. Они же первыми составляют прогноз, исходя из выявленного типа и объема онкогенных клеток. При расшифровке результатов особое внимание обращают на показатель К-67 – специфический белок, антиген ракового процесса. Он вырабатывается только при активном делении клеток, а в состоянии покоя не продуцируется.

К-67 – это именно тот онкомаркер, что показывает степень озлокачествления процесса. Если его уровень в процентном содержании составляет 85% и выше, то заболевание прогрессирует стремительно и с высокой вероятностью вскоре приведет к смерти.

Благоприятным будет прогноз при К-67=10%. В случае грамотно составленного плана терапии есть все шансы на полное выздоровление, зачастую без риска рецидива. При К=30% констатируют среднюю степень тяжести болезни, что означает достаточно быстрый рост рака. С помощью курсовой химиотерапии его можно замедлить и даже остановить.

Однако К-67 – это не единственный показатель, который указывается в медицинском заключении. Также записываются антитела, к которым выявлены соответствующие антигены, тип и количество последних.

Полученное заключение врач-патологоанатом передает лечащему онкологу, который подбирает лечение. Для оценки его эффективности иммуногистохимию проводят еще раз после завершения терапевтического курса.