Андрогены для лечения рака молочной железы

Показания к применению фотостима.

Существует несколько показаний для применения "Фотостима" :
1. Недостаточность гуморальной иммунной системы, выражающаяся в предрасположенности к бактериальным и вирусным инфекциям. Прием "Фотостима" лицами, имеющими любую патогенную микрофлору в организме, позволяет значительно подавить ее, уменьшив содержание в 1,5-2 раза. Это сопровождается снижением аномально высокого уровня лейкоцитов в крови до нормальных значений.
2. Недостаточность клеточного иммунитета. "Фотостим" стимулирует иммунный ответ против опухолевых, (аномальных) клеток, клеток пораженными вирусами и выведение продуктов некроза и распада тканей.
3. Злокачественные новообразования - влияние на пролиферацию и дифференцировку опухолевых клеток. " Фотостим" вызывает стимуляцию неспецифического иммунитета и ослабление токсического действия лучевой и химиотерапии.

Механизм действия фотостима.

"Фотостим" усиливает гуморальный иммунитет в 60-70% случаев за счет роста популяции лимфоцитов, а в 30-40% случаев - популяции нейтрофилов в крови.

Стимуляция клеточного иммунитета при употреблении "Фотостима" достигается за счет роста абсолютного количества фагоцитов а у 35% лиц также и за счет роста активности фагоцитов и NK-клеток. NK-клетки активируются под влиянием дисплазивных (аномальных) клеток, бактерий, их токсинов или продуктов метаболизма.
В результате в клетках-мишенях развивается апоптоз (программированная клеточная гибель), и клетки разрушаются. У 50% онкологических больных отмечается ослабление цитотоксического действия этих клеток против клеток-предшественников раковых клеток.

В целом, " Фотостим" специфически стимулирует пролиферацию клонов В-клеток костного мозга и продукцию вилочковой железы.
Действие "Фотостима" на злокачественные опухоли основано на воздействии на патофизиологические механизмы роста опухолей:
· воздействие на нарушенный процесс регуляции роста клеток;
· влияние на взаимосвязь между опухолевым процессом и организмом в целом.

"Фотостим" стимулирует формирование антител к опухолевым клеткам, активирует регенерацию пораженных тканей и, таким образом, увеличивает продолжительность жизни (или предотвращает ее сокращение) и значительно улучшает качество жизни онкологических больных. Кроме того, во многих случаях тормозится рост первичного очага опухоли и предотвращается появление метастазов.

"Фотостим" способен не только тормозить рост опухолей и вызывать их разрушение, усиливать и активировать имеющиеся механизмы защиты организма, но и уничтожать предшественников раковых клеток - дисплазивные (аномальные) клетки.

Образно выражаясь, фотостим является "разведывательно-диверсионной группой", задачей которой является обнаружение врага - клеток, отличающихся от нормальных, передача информации в центр (в мозг) и осуществление скоординированных мероприятий по их уничтожению.

Клинические исследования фотостима.

Клинические исследования показали, что "Фотостим" :
· в 60-70% случаев стимулирует рост популяции лимфоцитов, а в 30-40% случаев - популяции нейтрофилов в крови;
· "Фотостим" стимулирует рост абсолютного количества фагоцитов, а у 35% лиц также и рост активности фагоцитов;
· "Фотостим" значительно тормозит рост злокачественных опухолей;
· "Фотостим" уменьшает размер опухоли;
· ослабляет формирование метастазов, вплоть до полного предотвращения;
· "Фотостим" ослабляет побочные эффекты лучевой и химиотерапии;
· "Фотостим" противодействует уменьшению продолжительности жизни;

"ФОТОСТИМ"
позволяет
предотвратить возникновение
м е т а с т а з о в !

Его уникальность заключается в том, что
он попадает только в онкологические клетки.
После фотоактивации дневным светом,
онкологические клетки погибают.

1) Онкологическая клетка поглощает фотосенсибилизатор, например, "ФОТОСТИМ".

2) Орган освещается светом. Онкологическая клетка погибает.

Заключение института Геронтологии.
2005 год.

Анализ полученных результатов свидетельствует о том,
что применение БАД "Фотостим" оказывает существенное
влияние на пациентов: появление бодрости,
нормализация сна, улучшение показателей
красной крови.
"Фотостим" оказывает позитивное влияние на
реологические свойства крови.

ВЫВОДЫ (фрагмент из заключения института геронтологии):

"Фотостим" оказывает положительное влияние
на репаративные функции пациентов,
оказывает иммуномодулирующий эффект.
"Фотостим" СПОСОБСТВУЕТ противодействию факторам
с т а р е н и я человеческого организма.

IV РОССИЙСКАЯ ОНКОЛОГИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ

ПРИНЦИПЫ ЭНДОКРИННОЙ ТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ

Представления о гормональной чувствительности опухолей были значительно расширены в связи с открытием стероидных рецепторов в опухолевых клетках разного происхождения. Гормоны не могут "завести" деление опухолевых клеток иначе как от взаимодействия с соответствующим рецептором. Открытие рецепторов привело к новому, весьма продуктивному в онкологии направлению - созданию антигормонов (антиэстрогенов, антиандрогенов, антипрогестинов).

Гормоны могут стимулировать рост опухолей или вызывать их регрессию. Гормональная зависимость опухолевых клеток разных органов не одинакова. Почти 100% опухолей предстательной железы чувствительны к антиандрогенной терапии, но лишь одна треть больных раком молочной железы чувствительна к антиэстрогенному лечению.

Эндогенные эстрогены - основная мишень эндокринной терапии рака молочной железы. Разнообразны лишь пути контроля их действия: либо это антиэстрогены, которые прерывают связь циркулирующих эстрогенов с рецепторами, либо это ароматазные ингибиторы, которые мешают синтезу эстрогенов из андростендиона, либо это манипуляции на гипофизе или группа LH-RH аналогов, опосредованно угнетающих функцию яичников, либо это хирургическое или лучевое выключение яичников или надпочечников, также имеющих целью снизить биосинтез эстрогенов в этих железах, либо это применение андрогенов, являющихся прямыми антагонистами эстрогенов, или прогестинов, подавляющих уровень эстрогенов.

Эстрогены, диффундируя через плазменную мембрану, соединяются с ядерным эстрадиоловым рецептором, внося в белок, из которого он состоит, стероидную структуру; затем происходит димеризация 2-х комплексов и соединение с элементом эстрогенного ответа в ДНК. Эти события являются причиной мобилизации других белков, называемых коактиваторами, которые формируют транскрипционный комплекс в ДНК. Таким образом, эстроген-индуцированные белки регулируют пролиферацию опухолевых клеток молочной железы. Под влиянием эстрогенного контроля сами клетки синтезируют и секретируют свои собственные факторы роста, которые оказывают стимулирующее аутокринное или паракринное действие. В регуляторном "оркестре" пролиферации опухолевых клеток, дирижером которого являются эндогенные эстрогены, участвуют трансформирующие факторы роста a и b , инсулиноподобные факторы роста 1 и 2, фактор роста тромбоцитарного происхождения катепсин D, фибробластный фактор роста, циклины и т.д.

Наличие или отсутствие стероидных рецепторов стало не только фактором, определяющим показания к эндокринной терапии у больных раком молочной железы; этот феномен является прогностическим в отношении жизни у больных с операбельным РМЖ наряду с констатацией регионарных метастазов в лимфоузлах.

Всех больных делят на 4 группы в порядке возрастания риска неблагоприятных исходов болезни:

1. стероидные рецепторы положительны, подмышечных метастазов нет;
2. стероидные рецепторы отрицательны, подмышечных метастазов нет;
3. стероидные рецепторы положительны, в регионарных лимфоузлах метастазы;
4. стероидные рецепторы отрицательны, в регионарных лимфоузлах метастазы.

Назначать гормоны без определения рецепторов гораздо дороже для онкоучреждений и даже вредно больным с низкой и не известной врачам гормоночувствительностью опухоли.

Андрогены в развитии рака предстательной железы играют роль, похожую на ту, что приписывается эстрогенам при раке молочной железы.

Дигидротестостерон соединяется с андрогенными рецепторами, находящимися в ядрах простатических клеток. В норме генная регуляция, связанная с андрогенами, характеризуется тремя процессами.

После образования комплекса андрогена, андрогенного рецептора и зоны андрогенного ответа ДНК инициируется благодаря транскрипционному влиянию позитивных генов новый раунд синтеза ДНК и пролиферации недифференцированных и инволютивных клеток простаты (инициация).

Когда простата приобретает нормальный размер в присутствии высокого уровня андрогенов, вступает в "игру" транскрипция тормозных генов, приводящая к сохранению определенного лимита клеток и синтеза ДНК. Этот вид регуляции называется негативным.

Когда секреция андрогенов прекращается или уменьшается, начинают функционировать так называемые андроген-репрессированные гены, вследствие чего наблюдается физиологическая гибель клеток - апоптоз. Клинически это проявляется атрофией ткани.

Опухолевая трансформация эпителиальных клеток простаты связана с извращением андрогенного контроля со стороны позитивных, негативных и андроген-репрессорных генов. Когда отмечается делеция негативного типа генной регуляции (нет механизма ограничения числа клеток и их физиологической смерти), в опухоли есть клоны клеток андроген-чувствительные и андроген-независимые. При дальнейшем прогрессировании отмечается нарушение генов позитивной регуляции (инициация клеточного деления). В этой ситуации опухоль становится андроген-независимой.

Принятые в клинической практике лечения рака простаты гормональные воздействия направлены на подавление эндогенных андрогенов: антиандрогены, связывающие андрогенные рецепторы и мешающие их взаимодействию с зоной андрогенного ответа ДНК, орхэктомия или RH-LH аналоги, прерывающие синтез андрогенов в яичках, эстрогены, прямые антагонисты андрогенов, и т.д. Поэтому при прогрессировании опухолей на фоне кастрационного уровня тестостерона бессмысленно менять эндокринные препараты - опухоль простаты превратилась в андрогеннезависимую.

Эталонным антиэстрогеном остается тамоксифен. Остановимся кратко на его адъювантной и лечебной роли.

Адъювантное применение тамоксифена в течение 5 лет у больных РМЖ с положительными рецепторами в менопаузе уменьшает число смертей на 17-21% по сравнению с контролем. "Соревнуются" за первое место для адъювантной терапии у больных в менопаузе другие антиэстрогены - ралоксифен, идоксифен, фазлодекс, а также ингибиторы ароматазы - аримидекс, летрозол и экземестан.

Адъювантная терапия тамоксифеном у менструирующих больных с положительными рецепторами менее активна, чем у пациенток в менопаузе: смертность по сравнению с контролем уменьшается на 6%. Для адъювантной терапии менструирующих больных прибегают одновременно с назначением тамоксифена к кастрации или использованию его совместно с аналогами RH-LH.

У диссеминированных больных РМЖ в менопаузе эффектом или длительной стабилизацией отвечают от 33 до 50% больных. Тамоксифен - незаменимый препарат у пациенток РМЖ в возрасте старше 80 лет. Отягощенные многими неопухолевыми болезнями, такие женщины часто не могут перенести ни операцию, ни облучение, ни химиотерапию. Тамоксифен может продлить их жизнь, привести к ремиссии, даже полной, и при наличии только первичной опухоли и при диссеминации.

Тамоксифен применяют также для лечения РМЖ у мужчин, а также больных раком тела матки, раком яичников, меланомой, раком поджелудочной железы, карциноидными опухолями, мезотелиомой, раком почки, раком предстательной железы, глиальными опухолями, астрацитомами. Описан эффект тамоксифена при десмоидах и гемангиоэндотелиомах.

Перспективными новыми антиэстрогенами являются: а) ралоксифен, примененный в программах профилактики остеопорозов у здоровых женщин в менопаузе; препарат сократил заболеваемость РМЖ на 50%; б) идоксифен, проявляющий активность при РМЖ при резистентности к тамоксифену; в) фазлодекс - стероидный антиэстроген, захватывающий большее число рецепторов, чем тамоксифен.

Относительно новым направлением в эндокринной терапии рака является ингибиция ароматазы - фермента, отвечающего за синтез эстрона из андростендиона. Основное место синтеза эстрогенов у менструирующих женщин - яичники. При менопаузе функция яичников прекращена, и главным источником эстрона становятся жировая клетчатка, печень, мышцы и раковые опухоли молочной железы. У менструирующих женщин и в менопаузе синтез эстрона катализируется ароматазой. Но у менструирующих он контролируется по законам обратной связи LH и FSH. Эти гормоны гипофиза "работают" синхронно и отвечают за постоянный баланс "сырья " (андростендиона) и "наработчика" (ароматазы).

Низкий уровень эстрогенов стимулирует экспрессию гипофизом гонадотропинов, которые подстегивают синтез андростендиона в тека клетках и ароматазы в гранулярных клетках. Таким образом, ингибиторы ароматазы не активны у менструирующих больных РМЖ. У пациентов в менопаузе ось гипоталамус-гипофиз-яичники разорвана, и подавление ароматазы прерывает предпоследнюю стадию эстрогенного синтеза и значительно снижает циркуляцию эндогенных эстрогенов (более чем на 80%) и их пагубное влияние на рост РМЖ.. К ингибиторам ароматазы последнего поколения, селективным и мало токсичным, относят нестероидные летрозол и аримидекс и стероидный экземестан или аромазин.

Летрозол подавляет ароматазную активность во много раз сильнее, чем другие ингибиторы. Например, эта активность подавляется летрозолом в 170 раз выше, чем от наиболее доступного по ценам и не очень селективного аминоглютетимида. Вместе с тем, показатели степени ароматазного подавления не могут считаться надежными прогностическими критериями клинической противоопухолевой активности, которая от аминоглютетимида всего на 7% ниже, чем от летрозола. Тем не менее, ремиссии от летрозола дольше, чем от аминоглютетимида, смертность на 16% меньше, а сроки жизни на 8 месяцев больше. Летрозол вытеснил прогестины на 3 линию лечения диссеминированного РМЖ у женщин в менопаузе и по показателям непосредственного эффекта, и по меньшей токсичности.

Летрозол нашел применение и как неоадъювантное средство 1-й линии эндокринной терапии у больных с относительно небольшим опухолевым процессом. При первичной опухоли >3 см и отсутствии отдаленных метастазов удалось добиться уменьшения объема опухоли на 87%.

Для аримидекса также доказаны преимущества по сравнению с мегейсом при лечении РМЖ в менопаузе. На 10% больше от первого препарата была 2-х летняя выживаемость, на 5 месяцев длительнее была медиана выживаемости при меньшей токсичности. Аримидекс оказался активным при резистентности к тамоксифену и аминоглютетимиду. Известны также исследования роли неоадъювантного применения аримидекса. Первичная опухоль уменьшается в среднем на 80-88%.

Проводятся широкие сравнительные исследования 1-й линии адъювантной роли аримидекса и тамоксифена. Пока установлена большая токсичность тамоксифена.

Следует остановиться еще на одном вопросе, касающемся сравнения летрозола и аримидекса. Завершенных прямых сравнительных клинических исследований нет. Сравнение летрозола с мегейсом выявило разницу в непосредственной эффективности в пользу летрозола и его лучшую переносимость и не установило различий в выживаемости больных. Сравнение аримидекса с мегейсом выявило разницу в средней продолжительности жизни и выживаемости в пользу аримидекса, а также его лучшую переносимость, чем мегейса, и не установило различий в непосредственной эффективности 2-х препаратов.

В онкологии есть трудные вопросы, связанные с близкими эффектами в отношении опухоли таксола и таксотера, тамоксифена и торемифена, доксорубицина и эпирубицина и т.д. Будущее, возможно, более рельефно покажет преимущества того или иного ингибитора ароматазы.

Антиандрогены касодекс, флутамид, андрокур, анандрон связывают андрогенные рецепторы в ядрах клеток мишеней, прерывая взаимодействие андрогенов с рецепторами и комплекса андроген-рецептор с ДНК. Комплекс антиандроген-андрогенный рецептор не способен, в отличие от комплекса андроген-андрогенный рецептор, стимулировать транскрипцию андроген регулируемых генов.

Антиандрогены + орхэктомия или + применение аналогов LH-RH гормонов обуславливает полную андрогенную блокаду - метод выбора для лечения больных с диссеминированным раком простаты. Результаты применения гормонов на более ранних этапах болезни пока противоречивы.

Оригинальной является концепция прерывистой эндокринной терапии. Тактика сохранения чувствительных к андрогенам клонов опухолевых клеток позволяет сделать болезнь хронической, более продолжительной и менее злокачественной, более длительное время чувствительной к гормонам.

Особое место в эндокринотерапии опухолей принадлежит аналогу соматостатина - сандостатину. Этот пептидный гормон подавляет секрецию многих гормонов и ферментов и в результате способен оказывать противоопухолевый эффект при опухолях островкового аппарата поджелудочной железы, раке этого органа, карциноидах, медуллярном раке щитовидной железы.

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Гарин А.М. Принципы и возможности современной эндокринной терапии опухолей.

2. Stewart A.J., Westley B.R., May F.E.B. Modulation of the proliferative response of breast cancer cells to growth factors by estrogen. Br.j.Canc. 1992; 66:640-648.

3. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Молекулярные маркеры прогноза и лекарственной чувствительности рака молочной железы. В кн. "Новое в терапии рака молочной железы". Ред. Переводчикова Н.И., 1998, стр. 19-23.

4. Osborne C.K., Arteaga C.L. Autocrine and paracrine growth regulation of breast cancer: clinical implication. Br. Canc. Res. Treat. 1990,158:3-11.

5. Osborne K. Recent changes in the adjuvant treatment of breast cancer. In "Breast Cancer Perspectives on Data and Developments" San Antonio 1999, 31-34.

6. Gershanovich M., Chandri H.A., Campos D., et.al. Letrоzol a new oral aromatase inhibitor: randomized trial comparing 2,5 mg daily, 0,5 mg daily and aminoglutethimide in postmenopausal women with advanced breast cancer. Ann. Oncol. 1998(9):639-645.

7. Dixon J.M., Love G.D.B., Tucher S., et.al. Letrоzole as primary medical therapy for locally advanced and large operable breast cancer. Proc. ASCO 1998, ab. 104.

8. Jonat W., Howell A., Blomqist C. et.al. A randomized trial comparing two doses of the new selective aromatase inhibitor anastrazole with megestrol acetate in postmenopausal patients with advanced breast cancer. Eur. J.Canc. 1996, 32:A:404-412.

9. Dixon M.J., Renshow L., Bellamy C., et.al. Arimidex as neoadjuvant therapy causes large reduction in tumor volume in postmenopausal women with large operable breast cancer. Proc. ASCO 1999, ab. 345.

10. Nabholtz J.M. Results of a North American first-line trial comparing "Arimidex" with tamoxifen in postmenopausal women with advanced breast cancer. Satel. Symp. Astra Zeneca ECCO 10, 1999.

11. Матвеев Б.П., Бухаркин Б.В., Матвеев В.Б. Рак предстательной железы. М., 1999.

12. Горбунова В.А., Орел Р.Ф., Егоров Г.Н. Редкие опухоли АПУД системы (карциноиды) и нейроэндокринные опухоли поджелудочной железы (клиника, диагностика, лечение). М., 1999.

Андрогенный рецептор (AR) широко экспрессируется в раке молочной железы и был предложен в качестве терапевтической мишени в отрицательных раковых опухолях рака эстрогена (ER), которые сохраняют AR. Однако существуют разногласия относительно роли АР, особенно в опухолях ER +. Энзалутамид, ингибитор АР, который нарушает ядерную локализацию АР, использовался для выяснения роли АР в доклинических моделях положительного и отрицательного рака молочной железы.

Мы изучили ядерные отношения AR к ER-белкам в первичных опухолях молочной железы в ответ на эндокринную терапию. Эффекты ингибирования АР энзалутамидом были исследованы in vitro и в доклинических моделях ER положительного и отрицательного рака молочной железы, которые выражают AR.

В группе из 192 женщин с ER + раком молочной железы высокое соотношение AR: ER (≥2,0) показало более чем четыре раза повышенный риск неудачи при тамоксифене (HR = 4,43). Соотношение AR: ER имело независимое влияние на риск неудачи выше, чем однократное окрашивание ER%. Отношение AR: ER также является независимым предиктором безрецидивной выживаемости (HR = 4,04, 95% ДИ: 1,68, 9,69, p = 0,002) и выживаемости (HR = 2,75, 95% ДИ: 1,11, 6,86, p = 0.03). Как энзалутамид, так и бикалютамид ингибировали 5-альфа-дигидротестостерон (DHT) — опосредованную пролиферацию линий рака молочной железы in vitro; однако энзалутамид однозначно ингибировал эстрадиол (E2) -связанной пролиферацией ER + / AR + клеток рака молочной железы. В ксенотрансплантатах MCF7 (ER + / AR +) энзалутамид ингибировал рост опухоли с E2-эффектом так же эффективно, как и тамоксифен, уменьшая пролиферацию. Энзалутамид также ингибировал рост опухолей, вызванных DHT, как в положительном (ERF), так и в отрицательном (MDA-MB-453) ксенотрансплантатах, но делал это путем увеличения апоптоза.

Отношение AR к ER может влиять на реакцию рака молочной железы на традиционную эндокринную терапию. Энзалутамид вызывает различные эффекты на пролиферацию клеток рака молочной железы, опосредованных E2, чем бикалютамид. Это доклиническое исследование подтверждает начало клинических исследований, оценивающих энзалутамид для лечения опухолей AR +, независимо от статуса ER, поскольку он блокирует рост опухоли, опосредованный андрогенами и эстрогенами.

При раке молочной железы рецептор андрогенов (АР) более широко экспрессируется, чем рецептор альфа-рецептора эстрогена (ER) или рецептор прогестерона (PR), и AR недавно появился как полезный маркер для дальнейшего уточнения классификации подтипа рака молочной железы
[1,2]. Из всех 2117 инвазивных случаев рака молочной железы у женщин, включенных в исследование здоровья медсестер, 77% были положительными для АР с помощью иммуногистохимии
[3]. Среди подтипов 88% ER +, 59% HER2 + и 32% тройного отрицательного рака молочной железы (ER- / PR- / HER2-) были положительными для экспрессии AR иммуногистохимией
[3]. Подобно ER и PR, экспрессия AR связана с хорошо дифференцированным состоянием
[4] и с более ленивым раком молочной железы
[5].

В ER + раке молочной железы адъювантная терапия конкурентным антагонистом тамоксифена или ингибиторами ароматазы (AI), которые блокируют превращение андрогенов в эстрогены, обычно эффективна для ингибирования прогрессирования заболевания. Однако от 30 до 50% всех опухолей ER + демонстрируют устойчивость к традиционным эндокринным терапиям и, в конечном счете, все метастатические раковые опухоли ER + приобретают сопротивление
[6,7]. В опухолях ER +, которые реагируют на неоадъювантную эндокринную терапию, мы ранее наблюдали, что снижение мРНК AR и белка уменьшается, тогда как в опухолях, которые не реагируют, AR мРНК не уменьшается
[8,9]. Повышенная гиперреакция АР повышает устойчивость к тамоксифену в моделях рака молочной железы in vitro и in vivo [10]. Таким образом, de novo или приобретенная устойчивость к антиэстрогенной терапии могут быть результатом адаптации опухолевых клеток от зависимости эстрогена к андрогенной зависимости. У мышей лечение с AI заметно повышенными концентрациями интратуральных тестостеронов в диметилбензе (а) антрацен-индуцированных опухолях молочной железы крыс
[11]. У женщин в постменопаузе с ER + раком молочной железы, особенно с лечением ИИ, уровень эстрадиола (E2) в циркулирующей среде чрезвычайно низок, а уровни циркулирующего андрогена увеличиваются
[12], поскольку ИИ блокируют превращение андрогенов в эстроген. Действительно, уровень циркулирующих уровней тестостерона, андростендиона и дегидроэпиандростерона сульфата (DHEA-S) у женщин на терапии ИИ
[13] по сравнению с уровнями предварительной обработки. Кроме того, высокие уровни адренальтного андрогена DHEA-S перед лечением предсказывают неудачу на ИИ, а циркулирующий DHEA-S увеличивается во время лечения у пациентов с опухолями, которые не реагировали на лечение ИИ
[14].

Подмножество ER-рака молочной железы (молекулярный апокриновый или люминальный андрогенный рецептор) сохраняет AR
16 и имеют образец экспрессии генов, который очень напоминает рак молочной железы ER +
[2,19]. Антиандроген бикалютамид ингибирует рост молекулярных апокриновых клеточных линий in vitro и in vivo, подтверждая гипотезу о том, что антиандрогены могут быть полезными целенаправленными методами лечения таких опухолей
[2,17,18,20]. Действительно, клиническое испытание фазы II бикалутамида в качестве лечения рака ER- / AR + молочной железы (NCT00468715) показало некоторую эффективность
[21]. Бикалютамид является конкурентным антагонистом, который позволяет АР связывать ДНК
[22]; однако, при установлении резистентного к кастрату рака простаты, бикалютамид может проявлять сдвиг антагониста к агонисту, как это было продемонстрировано клинически путем снижения специфического к предстательной железе антигена после отмены бикалутамида (Casodex)
[23].

Энзалутамид (ранее MDV3100) представляет собой ингибитор передачи сигналов AR, который связывает AR с пятикратным более высоким сродством, чем бикалютамид, нарушает ядерную транслокацию AR и не обладает агонистической активностью при эффективных дозах
20. Энзалутамид значительно улучшил общую выживаемость у пациентов с резистентным к кастрату раком предстательной железы и является одобренным агентом для лечения пациентов с метастатическим кантационно-устойчивым раком предстательной железы
[24]. В этом исследовании мы исследовали влияние энзалутамида на AR + модели рака молочной железы (ER + и ER-) и представили первые доклинические доказательства того, что ингибирование AR с помощью энзалутамида может быть эффективной терапевтической стратегией не только для ER- / AR + груди рака, но также и для ER + / AR + опухолей. Мы также представляем клинические данные, которые свидетельствуют о том, что большое количество AR относительно ER может указывать на опухоли, которые будут иметь менее оптимальный ответ на традиционную эндокринную терапию.

Личности всех клеточных линий были аутентифицированы путем отпечатка ДНК (Identifier Kit, Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) в течение 6 месяцев после использования. Линия BCK4 представляет собой линию рака молочной железы ER + / AR +, полученную недавно от плеврального выпота и имеет почти нормальный кариотип
[25]. Для клеточной линии BCK4 образец пациента был приобретен в соответствии с утвержденным Университетом штата Колорадо, утвержденным Советом одобренным протоколом регистрации тканей, и было получено согласие пациента на получение крови и ткани для исследовательских целей. Все другие клеточные линии были получены из Американской коллекции типовых культур; Манассас, штат Вирджиния, США. Клетки BCK4 и MCF7 выращивали в минимальных необходимых средах, 5% фетальной бычьей сыворотки, незаменимых аминокислотах, инсулине и пенициллине / стрептомицине и ZR75 клетках в тех же средах с добавлением HEPES и l-глутамина. Ячейки MCF7 экспрессируют AR типа дикого типа, хотя и с сокращенным повторением CAG
[26], что часто свидетельствует о более активном рецепторе
[27]. Клетки T47D выращивали в модифицированной Дульбекко среде Eagle, дополненной 10% эмбриональной бычьей сывороткой, l-глутамином пенициллином / стрептомицином. Клетки LNCaP выращивали в RPMI, 5% фетальной бычьей сыворотки и пенициллина / стрептомицина. Все клетки выращивали в инкубаторе с температурой 37 ° С с 5% диоксидом углерода. MDA-MB-453 и MDA-kb2 (производная MDA-MB-453, стабильно экспрессирующая AR-зависимую MMTV-люциферазную конструкцию репортерного гена, Американскую коллекцию типовых культур) культивировали в лейбовитовой среде L-15 (Invitrogen, Carlsbad, CA , США), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (Invitrogen) и пенициллина / стрептомицина. Клетки MCF7-TGL были получены путем стабильной инфекции ретровирусным SFG-NES-TGL-вектором, кодирующей тройное слияние тимидинкиназы, зеленого флуоресцентного белка и люциферазы и отсортированную по зеленому флуоресцентному белку.

Эксперименты MCF7 с энзалутамидом, поставляемые в грызунов, были проведены в Медицинском кампусе Университета Колорадо Ансутц и одобрены Институтом Учреждения и ухода за животными из Университета Колорадо (протокол IACUC 83611 (03) 1E). Эксперимент ксенотрансплантата MDA-MB-453, в котором энзалутамид был доставлен пероральным желудочным зондом, был выполнен AntiCancer Inc., Сан-Диего, Калифорния, США, и был одобрен Комитетом по уходу за животными и использованием AntiKancer Inc. Все эксперименты на животных проводились в в соответствии с Руководством по гигиене и использованию лабораторных животных Национального института здоровья.

Для экспериментов ксенотрансплантата MCF7 106 клеток MCF7-TGL, которые стабильно экспрессируют тройное слияние тимидинкиназы, зеленого флуоресцентного белка и люциферазы (ретровирусный вектор SFG-NES-TGL) для целей визуализации in vivo, смешивали с Matrigel (BD Biosciences, Franklin Lakes, Нью-Джерси, США) и вводили в четвертую паховую молочную жироуловительную клетку самки, овариэктомизированной атимической ну / ню или безполезной диабетической (NOD) / SCID мышей (Taconic, Germantown, NY USA). Во время инъекции опухоли, гранулы E2 (60-дневное высвобождение, 1,5 мг / таблетка, Инновационные исследования Америки, Сарасота, Флорида США) или неароматизируемый 5-альфа-дигидротестостерон (DHT) андрогена (8 мг / таблетка, упакованные и запечатанные в силиконовой трубе) имплантировали подкожно в затылок. Опухолевую нагрузку оценивали с использованием системы визуализации in vivo или измерений суппорта (объем опухоли рассчитывали как: длина × ширина × глубина / 2). После того, как опухоли были установлены, мышей сопоставляли по группам в зависимости от общей массы опухоли, измеренной с помощью системы визуализации in vivo или суппорта. Группы, получавшие тамоксифен, имели 90-дневный выброс, 5 мг / таблетку (Инновационные исследования в Америке), имплантированные подкожно. Мышам вводили энзалутамид в их чау (приблизительно 50 мг / кг суточной дозы) или через пероральный зонд (10 или 25 мг / кг / день). Энзалутамид смешивали с молотым мышам (каталожный номер AIN-76, Research Diets Inc., Нью-Брансуик, Нью-Джерси, США) при 0,43 мг / г чау. Подача облучали и хранили при 4 ° С перед использованием. Мыши в контрольной группе получали одну и ту же наземную мышь, но без энзалутамида. Все мышам был предоставлен свободный доступ к готовой чау-чау или контрольной чау в течение всего периода исследования и в среднем при приеме пищи 3,5 г / день. Корм был изменен в клетках для животных два раза в неделю. Вода и корм были приготовлены ad libitum. За два часа до жертвования мышам вводили внутрибрюшинно 50 мг / кг бромдезоксиуридина (BrdU, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA). Мышей подвергали эвтаназии асфиксией двуокиси углерода с последующей дислокацией шейки матки, а также собирали кровь, опухоли, толстую кишку, матку и молочные железы.

Для исследования опухоли MDA-453 в четвертую паховую клетку молочной железы из NOD-SCID-IL2Rgc — / — мышей вводили 6 × 106 клеток, в которые гранул DHT (1,5 мг 60-дневного выпуска, Innovative Research of America) имплантировали подкожно. Размер опухоли измеряли с использованием суппортов, и когда опухоли достигали 100 мм3, мыши начали получать 10 мг / кг энзалутамида или носителя пероральным желудочным зондом. Когда опухоли достигли 400 мм3, другая группа была запущена на 25 мг / кг энзалутамида. В конце эксперимента опухоли взвешивали и обрабатывали для встраивания.

Критерии включения и дизайн проб описаны в другом месте
[8,9]. Вкратце, женщины с ER + раком молочной железы были зачислены в рандомизированное клиническое исследование II фазы для получения экземестана отдельно (25 мг в день) или экземестана в сочетании с тамоксифеном (20 мг в день) в течение 4 месяцев до операции. Женщины, включенные в исследование, были постменопаузальными с недавно диагностированными раками стадии II / III, T2-T3. Перед проведением лечения были сделаны биопсии сердечной иглы, и для анализа были взяты фрагменты опухоли из заключительной операции по удалению. Протокол был одобрен Советом по множественной институциональной оценке штата Колорадо, и информированное согласие было предоставлено всеми пациентами. Критерии для респондентов варьировались от незначительного ответа до полного ответа, в то время как у неответчиков было стабильное или прогрессирующее заболевание.

Это исследование включало 192 пациента с диагнозом ER + рак молочной железы в Массачусетской общей больнице (партнеры) в период с 1977 по 1993 год, которым было предложено лечение тамоксифеном в рамках их адъювантной терапии, и в 1998 году их сопровождали в больнице. Пациентам предлагали тамоксифен на положительность эстрогена (≥10 пмоль / мг белка), определенную с использованием либо анализа связывания лиганда, либо анализа радиоактивного фермента, связанного с иммуносорбентом, стандартного протокола, который используется в течение этого периода времени. В рамках настоящего исследования архивные формалин-фиксированные парафиноподобные опухоли, собранные в соответствии с протоколом совета по институциональному обзору Молекулярные и клеточные предсказатели рака молочной железы были окрашены AR и ER иммуногистохимией. Все слайды были оценены, а процент и интенсивность AR и ER были записаны. Каждый слайд также оценивался с использованием метода подсчета Allred.

Таблицы непредвиденных обстоятельств использовались для изучения ассоциаций между отношением AR / ER и клинико-патологическими переменными. В этом анализе каждая клинико-патологическая переменная была разделена на две или три категории (отрицательный по отношению к лимфатическому узлу лимфатический узел, отрицательный лимфатический узел против одного-трех положительных против четырех или более положительных, возраст пациентов 2 см, класс 1 по сравнению со степенью 2 по сравнению со степенью 3, отрицательный результат по сравнению с положительным, ErbB2 ≤30% против> 30%, MIB-1 2,0, по сравнению с только 6,3% неудач (P 2 см, P = 0,03), положительность лимфатических узлов (HR = 3,41, P = 0,01) и окрашивание ER процентов (HR = 0,98, P = 0,0002) Таблица
2).

Однофакторный анализ ассоциаций переменных с нарушением тамоксифена через 5 лет, безрецидивная выживаемость и специфическая для конкретного заболевания выживаемость на весь период исследования

AR, рецептор андрогена; CI, доверительный интервал; DFS, безрецидивная выживаемость; DSS, выживаемость, обусловленная заболеваниями; EGFR, рецептор эпидермального фактора роста; ER, рецептор эстрогена; LN, лимфатический узел; PR, рецептор прогестерона. Полужирные данные значительны.

Читайте также:

• Вич и лимфома можно ли вылечить
• Лечения и протезирования зубов киста
• Лечение опухолей позвоночника в германии
• Опухоль аденомы лечение мочевого
• Заговоры митрофана константиновича фролова лечение рака молитвы