Иммунофенотип опухоли класс luminal b
Люминальный тип А рака молочной железы
Люминальный тип А рака молочной железы является наиболее распространенным.
Согласно статистике, люминальный тип А рака молочной железы занимает первое место по частоте встречаемости среди всех подтипов рака молочной железы, и составляет около 60% от всех случаев рака груди. Чаще всего люминальный тип А встречается у женщин в возрасте старше 50 лет, после наступления менопаузы.
Какие особенности существуют у люминального типа А рака молочной железы?
Данный подтип рака молочной железы характеризуется:
- Высокой чувствительностью к гормонам (ER - эстроген, PR - прогестерон),
- Отрицательной гиперэкспрессиейHer2neu,
- Низким показателем Ki-67.
В гормональной терапии люминального типа А рака молочной железы применяются такие гормональные препараты как: Тамоксифен, Анастрозол (Аримидекс), Летрозол (Фемара), Аромазин (Экземистан), Фазлодекс (Фульвестрант), Палбоциклиб (Ибранс).
Отрицательная гиперэкспрессия Her2neu при люминальном раке молочной железы типа А говорит о низком уровне агрессивности опухоли и невозможности применить таргетную терапию такими препаратами как: Трастузумаб, Пертузумаб, Трастузумаб-эмтанзин, Лапатиниб.
Низкий процент Ki-67 при люминальном типе А рака груди означает, что опухоль склонна к медленному росту, низкой вероятности метастазирования, а также плохой чувствительности к химиотерапии.
Лечение люминального типа А рака молочной железы
Исходя из вышеперечисленных характеристик, при лечении люминального рака молочной железы типа А, чаще всего, применяют хирургическое лечение и гормональную терапию.
Лучевая терапия при лечении люминального типа А рака молочной железы применяется только в случаях проведения нерадикальной операции.
Химиотерапия при люминальном типе А рака молочной железы, в большинстве случаев, не применяется из-за своей низкой эффективности – опухоль обладает плохой чувствительностью к химиопрепаратам.
При правильно проведенном лечении, люминальный рак молочной железы типа А обладает хорошим прогнозом и длительной ремиссией.
Если после лечения данного подтипа рака груди прошло более 2х лет и по данным контрольных обследований не было рецидива, то вероятность того, что рецидив случится в будущем, равна всего 15%. Поэтому люминальный тип А считается самым благоприятным из всех подтипов рака молочной железы.
Люминальный тип В рака молочной железы
Люминальный тип В рака молочной железы считается более редким и сложным, чем люминальный рак груди типа А.
Люминальный тип В рака молочной железы занимает второе место по частоте встречаемости среди всех подтипов рака молочной железы и составляет около 20% от всех случаев рака груди. Чаще всего данная разновидность онкологического заболевания встречается у женщин в возрасте от 40 до 50 лет, находящихся в пременопаузе.
Люминальный тип В рака молочной железы характеризуется:
- Достаточно высокой чувствительностью к эстрогенам и прогестеронам,
- Положительной гиперэкспрессией Her2neu,
- Довольно низким показателем Ki-67.
Положительная гиперэкспрессия Her2neu при люминальном типе В рака молочной железы говорит о высоком уровне агрессивности опухоли, но в то же время дает лечащему врачу-онкологу возможность применять таргетную терапию такими препаратами как: Трастузумаб, Пертузумаб, Трастузумаб-эмтанзин и Лапатиниб.
Довольно низкий процент Ki-67 при люминальном В типе рака груди говорит о замедленном росте опухоли и средней вероятности её метастазирования, а также – о посредственной чувствительности к химиотерапии.
Лечение при люминальном типе В рака молочной железы
Исходя из вышеперечисленных характеристик, можно подвести итог, что при лечении люминального типа В типа рака молочной железы, чаще всего, применяют хирургическое лечение, гормональную терапию и таргетную терапию.
Лучевая терапия при лечении люминального типа В рака молочной железы, применяется только в случаях проведения нерадикальной операции или при наличии метастазов в периферических лимфатических узлах.
Химиотерапия при люминальном типе В рака молочной железы назначается только при достаточно агрессивных формах с высоким индексом Ki-67.
При качественно проведенном лечении, люминальный В тип рака груди обладает неплохим прогнозом, но склонен систематическим рецидивам.
Поэтому после завершения лечения данного подтипа рака молочной железы необходимо соблюдать тактику активного наблюдения – проходить регулярные осмотры у лечащего врача 1 раз в 3 месяца и выполнять контрольные обследования (объем которых определяется лечащим врачом-онкологом).
- Развитие люминального типа А и В рака молочной железы
- Группы риска
- Симптомы и признаки
- Люминальный тип А рака молочной железы
- Люминальный тип В рака молочной железы
- Диагностика и дифференциация
- Методы лечения
- Прогноз
Развитие люминального типа А и В рака молочной железы
Официально разделять рак молочной железы на биологические типы, определяющие выбор лечения и, отчасти, прогноз заболевания, стали с 2013 года, когда стало ясно, что карцинома молочной железы совсем неоднородна и подходы к её терапии должны различаться.
Доказано, что повышает эффективность гормональных препаратов при раке молочной железы и существенно влияет на прогноз наличие обоих вариантов рецепторов и в большой концентрации. Формально положительна по эстрогенам карцинома железы с концентрацией рецепторов эстрогенов от 1%, но уровень до 9% признаётся сомнительно позитивным. Прогестерон-рецептор положительной считается концентрация от 20%.
Кроме учёта количества рецепторов в градации по биологическим типам используется антиген пролиферации Ki-67, существующий только в активно делящихся клетках молочной железы, по этому критерию определяют способность злокачественной опухоли к росту. Именно клеточное размножение, проявляющееся избыточной пролиферацией железистой ткани железы — главная причина любого новообразования в груди. В каждой лаборатории — собственная норма среднего Ki-67, от которой отсчитывают высокий или низкий уровень пролиферации, чаще всего разграничение пролегает на уровне 20%.
Группы риска
Люминальный тип карциномы развивается не сам по себе, а вследствие гормональной разбалансировки. Вне зависимости от гормонального фона все женщины старше 39 лет считаются группой риска и каждые 24 месяца нуждаются в маммологическом обследовании.
Высока вероятность развития РМЖ у женщин из семей, где уже были карциномы органов репродуктивной системы и толстой кишки, поэтому им необходимо пройти генетическое обследование на гены BRCA. Среди всех злокачественных заболеваний груди группа наследственных раков немногочисленна — 3-5%.
Важным фактором риска признается очень плотная ткань железы, что легко выявляется при маммографии. При возрастании плотности с 5% до 75% вероятность карциномы усугубляется вчетверо. Кроме того, при высокой плотности сложно найти ранние негативные изменения.
Симптомы и признаки
Клинические проявления люминального рака ничем не отличаются от симптомов, сопровождающих другие биологические типы РМЖ: такие же внешние признаки опухоли, те же лимфатические коллекторы и зоны метастазирования.
При люминальном раке используется стандартная градация по системе TNM, аналогично распределение по стадиям, но есть отличие в прогнозе заболевания. Люминальные подтипы протекают лучше остальных и наиболее благоприятен тип А с индолентным, то есть неагрессивным развитием. При прочих равных условиях именно в этой подгруппе фиксируется максимальная выживаемость, но онкологическая статистика пока не учитывает выживаемость в зависимости от молекулярно-генетического типа.
Люминальный тип А рака молочной железы
Главная особенность люминального подтипа А — в высокой чувствительности рака к гормональным препаратам, потому что в наличии оба вида гормональных рецепторов и нет гена лекарственной устойчивости HER2, позволяющего клеткам не реагировать на лекарства или быстро формировать защиту от них.
Высокий уровень прогестиновых рецепторов — больше 20% обещает хороший результат лечения, если сочетается со значительной концентрацией эстрогенных рецепторов. Низкая пролиферативная активность с критерием Ki67 обещает медленное развитие злокачественного процесса.
Хороший прогноз при люминальной А форме не данность, в не меньшей мере на него влияет распространенность карциномы на начало лечения и возможность хирургического лечения. После радикальной операции такой молекулярный вид рака подлежит исключительно гормональной терапии:
- менструирующая женщина получает тамоксифен;
- при противопоказаниях к тамоксифену молодая женщина должна пройти кастрацию, по выбору хирургическую, лучевую или лекарственную, чтобы начать прием ингибитора ароматазы;
- пережившие менопаузу пациенты лечатся ингибитором ароматазы.
Не избежать 4 циклов профилактической химиотерапии с последующим приемом гормональных препаратов:
- при опухолевом конгломерате в груди больше 5 сантиметров;
- при метастазах в четырёх подмышечных лимфоузлах, не говоря о большем их числе;
- при низкодифференцированной карциноме, и такой морфологический негатив тоже случается при относительно благоприятной генетической форме.
Метастазирование при люминальном варианте А рака преимущественно локализуется в костях и лечится эндокринными препаратами, при множественных метастазах в первой линии назначается химиотерапия.
Люминальный тип В рака молочной железы
Эта форма карциномы отличается от подтипа А наличием двух вариантов — с геном НЕR2 и без него. Клетки отрицательные по HER2 могут иметь высокий уровень Ki67 или мало ПР, что в любом случае неблагоприятно, поэтому при любой стадии прооперированной пациентке с таким генотипом перед профилактическим гормональным лечением будет обязательно предложена химиотерапия, если новообразования больше полсантиметра.
При наличии в клетках гена HER2 уже не важно, сколько в них Ki67 и ПР, прогностически это неблагоприятный в сравнении с двумя другими люминальными вариантами процесс. Ген HER2 автоматическое показание для таргетной терапии трастузумабом параллельно остальному противоопухолевому лечению: обязательное начало с химиотерапии, по ее завершении показана длительная гормонотерапия по тому же алгоритму, что и при люминальном подтипе А.
Диагностика и дифференциация
Биология клеток рака молочной железы определяется при генетическом тестировании или ИГХ анализе. Генетическая классификация опухоли не обещает абсолютно одинакового течения заболевания, но помогает подобрать оптимальное лечение, что невозможно сделать с учётом одной только морфологии.
Гистологическое исследование показывает степень захвата злокачественными клетками ткани молочной железы и близлежащих лимфоузлов, позволяет косвенно отследить вероятность раннего метастазирования. Рентген, КТ и МРТ, УЗИ и ПЭТ помогут найти метастазы, но только молекулярный анализ выберет оптимальную терапию.
Любой люминальный вариант рака молочной железы предполагает чувствительность к эндокринному воздействию, но не исключает и позитивную реакцию на химиотерапию, а при наличии гена НЕR2 противоопухолевая эффективность повышается таргетным трастузумабом. Сочетание гормонотерапии с таргетным препаратом пока не стало рутиной, но и не исключается.
Методы лечения
Во всех случаях при люминальном биотипе на первом этапе рассматривается возможность оперативного лечения — главного гаранта излечения от рака молочной железы. При сохранении железы и радикальной, но не обширной операции — резекции обязательно дополнение в виде облучения.
При необходимости проведения профилактической химиотерапии, лучевая на молочную железу начинается только после завершения всех циклов ХТ, но совместима с гормональными препаратами.
Высокая чувствительность к гормонотерапии даже в метастатической стадии рака молочной железы позволяет на многие годы отодвинуть прогрессирование болезни, но не излечить. Разработано три линии эндокринной терапии, когда смена фармакологической группы позволяет достичь позитивного результата, продляя активную жизнь пациентки.
При недостаточной реакции на эндокринное воздействие всегда применяется химиотерапия, выбор активных цитостатиков сегодня достаточен. При наличии HER2 каждые три недели обязательны капельницы с таргетными средствами, их не отменяют даже при прогрессировании болезни.
Прогноз
Статистика не поспевает за онкологической наукой, поэтому сегодня неизвестен точный процент женщин с различными стадиями люминального рака молочной железы, переживших пятилетие и десятилетие. Тем не менее, у большинства пациенток по первичной реакции на терапию можно предположить отдаленный результат, понятно, что многое зависит от точности подбора лекарств.
В Европейской клинике проводится индивидуальное тестирование рака молочной железы по 21 гену, позволяющее прицельный индивидуальный подбор противоопухолевых лекарств. Оптимизация и индивидуализация лечения обязательно скажется на прогнозе.
Иммунофенотип
Одной из основных черт анапластической крупноклеточной лимфомы (АККЛ) является экспрессия CD30 (КМ)-молекулы. CD30 является 120 kDa трансмембранным цитокиновым рецептором из семейства рецепторов фактора некроза опухоли TNF), для которого был установлен лиганд (CD30L).
Растворимая 85 kDa-форма CD30 вырабатывается мембраносвязанной молекулой путем протеолитического распада и может быть обнаружена в больших концентрациях в сыворотке крови пациентов.
В крупных анапластических опухолевых клетках экспрессия CD30 ограничена мембраной, цитоплазмой и точечной (гранулярной) реакцией (dot-like) в области аппарата Гольджи.
В мелкоклеточном варианте только крупные анапластические клетки (чаще сосредоточенные около сосудов) проявляют положительную экспрессию CD30, в то время как мелкие опухолевые клетки чаще являются слабопозитивными или негативными на CD30.
Воспроизводимость диагноза АККЛ по морфологическим признакам составляет 46% и может быть увеличена до 85% при иммунном окрашивании на CD30, и, тем не менее, именно иммунные реакции на CD30 должны всегда проводиться параллельно с определением наличия прочих лимфоидных и нелимфоидных маркеров, потому что экспрессия CD30 не является специфической чертой только АККЛ и наблюдается в нормальных активированных клетках других В- и Т-клеточных лимфоидных и нелимфоидных опухолей, а также при негемопоэтических злокачественных заболеваниях, некоторых карциномах и новообразованиях из герминогенных клеток.
Однако при анапластической крупноклеточной лимфоме характерным является выраженная, интенсивная реакция на CD30 в подавляющем большинстве клеток. Другие неоплазмы могут также характеризо-ваться положительной СР30-реакцией, но обычно менее интенсивной и гетерогенной.
Положительная экспрессия эпителиально-мембранного антигена (ЕМА) наблюдается более чем в 50% случаев АККЛ, хотя в некоторых случаях экспрессия положительна только в части опухолевых клеток. Опыт многих работ показал, что экспрессия EMA при АККЛ чаще наблюдается у детей и молодых пациентов и сочетается с благоприятным прогнозом.
В настоящее время ИВХ-реакцию на определение экспрессии ALK-белка принято считать наиболее специфичным диагностическим методом.
Современная усовершенствованная генная технология продемонстрировала аномальную экспрессию кластерина (clusterin) при системных АККЛ и ее отсутствие при кожных формах. Наличие кластерина не коррелирует с экспрессией АLК-белка, что характерно для экспрессии BCL-2 и с-Мус. Было установлено, что экспрессия BCL-2 возможна в основном при АLК-негативных вариантах, а ядерная экспрессия с-Мус, напротив, у АLК-позитивных анапластических крупноклеточных лимфом, что позволяет заключить, что наличие АLК-белка может оказывать влияние на индукцию апоптоза при АККЛ.
Системные АККЛ имеют два главных иммунофенотипа: Т- и О-клеточный. Большинство случаев имеют Т-клеточное происхождение, что подтверждается экспрессией одного или нескольких Т-клеточных антигенов. АККЛ О-клеточного фенотипа, возможно, принадлежит к Т-клеточному фенотипу, так как опухолевые клетки обычно экспрессируют цитотоксические молекулы: перфорин, гранзим В (granzyme) и Т1А-1.
Кожная анапластическая крупноклеточная лимфома характеризуется Т-фенотипом, но при этом отличается от системной формы, так как всегда АLK-негативна и обычно не экспрессирует ЕМА и цитотоксические молекулы.
Молекулярно-генетическая характеристика анапластической крупноклеточной лимфомы
По данным мировой литературы, в 60-70% случаев АККЛ наблюдается t(2;5)(q23q35), которая вызывает слияние гена ALK хромосомы 2 с геном NPM (нуклеофозмин) хромосомы 5. Следует отметить, что при периферических лимфопролиферациях в отличие от случаев, наблюдаемых при острых лейкозах, хромосомная транслокация, ведущая к появлению гибридных генов, редка.
Дикий тип NPM-гена отвечает за кодирование филогенетически-консервированного и повсеместно проявляемого 37 kDa кислотного фосфобелглавных аргирофильных нуклеолярных (ядрышковых) белков (AgNOR ядрышек). Основной функцией NPM является перенос только что синтезированных белков в ядрышко. Для выполнения этой функции необходимы домен олигоомеризации N-концевой области и два ядерных сигнала в С-конечной области.
Область ядрышковых организаторов (ОЯОР) представляет собой участок вторичных перетяжек акроцентрических хромосом, где локализованы гены, кодирующие рибосомную РНК (рРНК), и формируется ядрышко непосредственно после деления клетки. С ОЯОР ассоциированы кислые негистоновые аргирофильные белки, регулирующие процесс синтеза рРНК и образование рибосом. Среди аргирофильных белков ОЯОР наиболее охарактеризованы РНК-полимераза I, белки С23 (нуклеолин) и В23 (нуклеофозмин).
Аргирофильные свойства ассоциированных с областью ядрышковых организаторов кислых негистоновых белков используются при выявлении ОЯОР при помощи нитрата серебра. Образующиеся при этом гранулы серебра являются маркерами ОЯОР. Показано, что нитратом серебра выявляются транскрипционно активные ОЯОР, и в этой связи степень аргирофилии ядрышковых структур может рассматриваться как цитохимический эквивалент функциональной активности рибосомных генов. Аргирофильные белки играют важную роль в регуляции клеточного цикла, определяя его продолжительность.
При исследовании различных опухолей было выявлено повышение содержания в них белков области ядрышковых организаторов по мере прогрессирования злокачественного процесса. При этом, как было показано экспериментальными исследованиями, наблюдаемое повышение содержания белков ОЯОР происходит не в результате синтеза новых белков этого класса, а в результате усиленного синтеза белков ОЯОР — С23 и В23. Эти результаты позволили рассматривать активность области ядрышковых организаторов как один из критериев разграничения доброкачественных и злокачественных новообразований, выявления опухолей высокой и низкой степени злокачественности, определения прогноза.
ALK-ген дикого типа кодирует крупный, гликилизированный, 200 kDa трансмембранный рецептор, ближе всего связанный с Ltk (лейкоцитотирозинкиназа), для которого соответствующий лиганд до сих пор не установлен и его обычная функция не определена.
Местонахождение ALK-гена дикого типа в нормальных тканях ограничено поверхностной мембраной и цитоплазмой. Внутрицитоплазматический конец ALK несет тирозинкиназа каталитической области, которая физиологически активируется в результате гомодимеризации и связывания лигандов.
Как следствие t (2;5) часть гена NPM, кодирующая аминоконечную область NPM (аминокислоты 1-116), сливается с частью гена ALK, кодирующей всю цитоплазматическую область белка ALK (последние 563 аминокислоты ALK) (рис. 1). В результате ген ALK попадает под контроль промотера NPM, что в свою очередь ведет к перманентному и повсеместному считыванию кода гибридного NPM-ALK-гена и получению 80 kDа рекомбинантного белка, обозначаемого NPM-ALK, или р80 (рис. 1).
Рис. 1. Молекулярная структура нуклеофозмина (NPM), киназы анапластической лимфомы и гибридных форм ALK.
Рекомбинантный белок NPM-ALK способен образовывать гомодимеры (путем перекрещивания с NPM дикого типа). Образование гомодимеров ведет к конституционной активации каталитической области ALK путем имитации рецепторной димеризации и активации. In vitro трансфекция NPM-ALK в клеточные линии мышей/крыс ведет к формированию трансформированного фенотипа. Мало известно о сигнальных путях, по которым NPM-ALK оказывает онкогенное действие.
Фосфолипаза С-у, по всей видимости, является важной мишенью для NPM-ALK. На самом деле этот гибридный белок может связываться in vitro с областями SH2 фосфолипазы С-у, что ведет к ее тирозинфосфорилированию и активации с последующей трансдукцией митогенных сигналов. NPM-ALK, вероятно, связан с фосфатидилинозитом (PI-3K) и производит конститутивную активацию путей антиапоптозной PI-3-киназы/ALK.
Менее ясной представляется роль взаимодействий NPM-ALK и других сигнальных молекул, а именно STAT5 и внутриклеточной областью CD30. In vitro NPM-ALK также связывается с Shc и субстратом инсулинового рецептора (insulin receptor substate 1, IRS-1), но эти взаимодействия не являются необходимыми для трансформации. Наконец, полученные противоречивые сведения, которые свидетельствуют о прямой подаче сигнала от NPM-ALK к соединительному белку GRB2, но в то же время у NPM-ALK не было найдено области, отвечающей за распознавание GRB2.
Онкогенные свойства NPM-ALK in vivo подтверждаются экспериментальными данными, показывающими, что инфузия мышиных гемопоэтических клеток с трансфекцией NPM-ALK ведет к развитию лимфом. В то же время эти мышиные лимфомы имеют В-клеточное происхождение и, очевидно, отличаются от ALK-положительной лимфомы, развивающейся у людей, Т- и О-типа.
Эти данные наводят на мысль о том, что активация одного и того же тирозинкиназасигнального пути может, с одной стороны, носить онкогенный характер в различных типах клеток, а с другой — свидетельствовать о взаимодействии NPM-ALK с широким диапазоном опухолевых молекул.
Рис. 2. Молекулярные механизмы взаимодействия NPM-ALK.
Для обнаружения NPM-ALK транслокаций в тканевых срезах существует несколько методов: PCR, метод in situ гибридизации, флюоресцентная in situ гибридизация (FISH). Так как при использовании метода PCR возможны артефакты и его применение требует высококачественного RNA, а FISH занимает много времени, иммуногистохимическое исследование, с практической точки зрения, является наиболее удобным и широко используемым методом, так как оно имеет строго определенные показания и легкое исполнение, недорого и дает быстрый результат.
Более того, этот метод позволяет использовать архивный, залитый в парафин материал, что дает возможность судить о природе меченых клеток и архитектонике тканей, а также определять молекулярные варианты АККЛ, которые несут гибридные гены, отличные от NPM-ALK, и не распознаются с помощью PCR.
Поликлональные и с недавних пор крайне специфические моноклональные антитела, направленные против фиксатор-резистентных эпитопов цитоплазматической области ALK, т.е. антитела ALK1 и ALKc, а также антитела против N-концевой области NPM, стали доступными для оптимального иммуногистохимического (ИГХ)-распознавания этих белков в парафиновых срезах. В отличие от копий NPM-ALK и ATIC-ALK, распознающихся с помощью PCR даже в низком содержании в обычных и реактивных лимфоидных тканях, белок ALK не экспрессируется в нормальных тканях, за исключением некоторых клеток нейрогенного происхождения.
Поэтому присутствие ALK-белка при проведении ИГХ-анализа в тканях, отличных от тканей мозга, является свидетельством аномального проявления ALK, обычно в форме связанного с t(2;5) химерного белка NPM-ALK. ИГХ-свидетельство молекулярной связи распознанного ALK c NPM находится в субклеточном распределении белка ALK, который в случае t(2;5) можно увидеть не только в цитоплазме, но и в ядре.
Около 15-20% ALK-позитивной AKKA дают неожиданный для t(2;5) ИГХ-рисунок в виде ограниченной цитоплазмой экспрессии ALK и ограниченной ядром экспрессии NPM (N-конец) (рис. 3). На основании этих результатов были высказаны предположения о существовании молекулярных вариантов AKKA, при которых в качестве партнера при слиянии с ALK выступает ген, отличный от NPM, и это приводит к возникновению иных гибридных белков ALK.
Рис. 3. Экспрессия различных гибридных белков ALK.
Возможность того, что отличные от NPM гены могут вступать в контакт с геном ALK и приводить к появлению отличных от NPM-ALK рекомбинантных ALK-белков, была высказана в связи с наличием цитогенетических данных, показывающих, что при AKKA ген ALK 2p23 присутствует в генетических аномалиях, отличных от t(2;5), например t(1;2) (q21; p23), t(2;3)(p23q21) и инверсии (p23;q35).
В настоящее время нет убедительного ответа на вопрос, представляется ли ALK-негативный вариант AККЛ отдельной нозологической единицей или является подвариантом неспецифицированной периферической T-клеточной лимфомы.
Ответ на этот вопрос может быть дан в результате детального изучения молекулярных механизмов лимфомагенеза. Для клинической практики патолог должен диагностировать анапластическую крупноклеточную лимфому согласно строгим критериям, описанным выше, определяя в каждом случае основное — является ли опухоль ALK-позитивным или ALK-негативным вариантом, поскольку высказываются мнения о прогностическом значении этого феномена.
ALK-позитивная АККЛ представляет собой широкий морфологический спектр — от мелкоклеточного до крупноклеточного варианта АККЛ. Ядерная ALK-экспрессия — признак транслокации (2;5) — мелких и крупных клеток опухоли является доказательством, что они принадлежат к одному и тому же неопластическому клону. В некоторых случаях трансформация мелкоклеточного варианта в анапластической крупноклеточной лимфоме классического типа связана с приобретением дополнительной хромосомной аномалии, вовлекающей половую хромосому и хромосомы 6, 7, 9 и 15.
И.В. Поддубная, А.А. Семенова, Н.А. Пробатова
Международный экспертный консенсус в Санкт-Галлене 2011 года предложил новую систему классификации рака молочной железы. Цель этого исследования заключалась в выяснении взаимосвязи между подтипами рака молочной железы, определяемыми новой системой классификации и геномными характеристиками.
Инвазивные опухоли молочной железы (n = 363) были иммуногистохимически классифицированы следующим образом: 111 (30,6%) в виде просвета A, 95 (26,2%) в виде просвета B (отрицательный HER2), 69 (19,0%) в виде просвета B (HER2-положительный), 41 (11,3%) в качестве HER2 и 47 (12,9%) в качестве базальных подтипов.
Высокая экспрессия антигена Ki-67 была обнаружена в 236 опухолях; ни один из случаев люминального подтипа A не показал высокой экспрессии антигена Ki-67, но более 85% опухолей других подтипов показали высокую экспрессию. Кроме того, ДНК-плоидность и хромосомная нестабильность (CIN) оценивались с использованием цитометрии изображений и FISH соответственно. В этой серии 336 (92,6%) опухолей состояли из 129 диплоидных / CIN- и 207 анеуплоидных / CIN + опухолей. Характеристики Diploid / CIN- и aneuploid / CIN + были обнаружены у 64,9% и 27,9% просвета A, 41,1% и 49,5% просвета B (HER2-), 11,6% и 81,2% просвета B (HER2 +), 4,9% и 90,2 % HER2 и 17,0% и 76,6% базальноподобных подтипов, соответственно. В отличие от просвета B (HER2 +), HER2 и базальноподобных подтипов подтипы Luminal A и Luminal B (HER2-) были гетерогенными с точки зрения плоидности ДНК и CIN.
Разумно предположить, что подтипы просвета A и просвета B (HER2-) следует разделить на две подгруппы, диплоидные / CIN- и aneuploid / CIN +, исходя из их основного геномного статуса.
Рак молочной железы является одним из наиболее распространенных злокачественных опухолей в мире, и большое количество пациентов умирают от болезни каждый год. Морфологически и биологически рак молочной железы является гетерогенным семейством болезней, включающим ряд подтипов [1]. Хотя обычная система гистологической классификации необходима для точного гистологического диагноза рака молочной железы, она не всегда обеспечивает достаточную информацию для оценки биологических характеристик отдельных опухолей и не подходит для выбора лечения. Действительно, хорошо известно, что опухоли с одинаковыми гистологическими подтипами могут иметь очень разные биологические траектории. Эта ситуация указывает на необходимость более надежной системы классификации, которая обеспечивает принятие клинических решений, таких как определение оптимальной терапевтической стратегии для отдельных больных раком [2,3]. Определение статуса рецепторов эстрогена и прогестерона, экспрессии HER2 и экспрессии антигена Ki-67 является практическим и ценным для оценки прогноза пациента и для определения стратегии лечения [4]. Недавно Международный экспертный консенсус в Санкт-Галлене предложил новую систему внутренней биологической классификации, основанную на экспрессии рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PgR), HER2 и Ki-67 [5]. Система классификации классифицирует инвазивные карциномы молочной железы в следующие пять различных молекулярных подтипов; просвет A, просвет B (HER2-), просвет B (HER2 +), HER2 и базальноподобные подтипы, и эти подтипы связаны с терапевтическим отбором [5]. Классификация может быть выполнена в каждой патологической лаборатории, где МГК с простой панелью маркеров возможно, и этот подход обозначается как классификация на основе IHC [6,7]. Клиническая ценность этой системы классификации все еще продолжается во всем мире.
Биологические характеристики опухоли в первую очередь зависят от геномных изменений. В этом контексте было измерено содержание ядерной ДНК для оценки биологических характеристик твердых опухолей, включая рак молочной железы, и в целом считается, что рак анеуплоидной ДНК представляет собой более слабый прогноз, чем диплоидные опухоли 11. Однако новая система классификации не была оценена в отношении состояния плоидности ДНК и / или CIN. Связь между подтипами на основе ICH и статусом плоидности ДНК и CIN должна быть выяснена для лучшего понимания различий в биологических характеристиках внутри и между подтипами в качестве предварительного условия для персонализированного лечения рака молочной железы и системы классификации на основе ICH следует оценивать с точки зрения состояния плоидности ДНК и CIN.
В этом исследовании плоидность ДНК и CIN были сопоставлены с подтипами, классифицированными системой классификации на основе IHC у 363 последовательных инвазивных пациентов с раком молочной железы.
В этом исследовании оценивалось 363 первичных инвазивных рака молочной железы. Ни у одного из пациентов не было семейной истории наследственного рака молочной железы. Средний возраст пациентов составил 56,9 года, от 30 до 87 лет. Пациенты не получали ни химиотерапии, ни облучения до операции. Комиссия по институциональному обзору по вопросам использования человеком в Высшей школе медицины Ямагути одобрила протокол исследования, и информированное согласие на это исследование было получено от всех пациентов. Репрезентативные части хирургически удаленных опухолевых тканей использовались для препаратов с сенсорным мазком перед фиксацией. Образцы опухолевой ткани фиксировали в 10% формалине в течение ночи и подвергали гистологическим исследованиям, включая ядерный сорт. Был проведен иммуногистохимический анализ, чтобы классифицировать рак молочной железы на молекулярные подтипы (подтипы на основе IHC) [5]. Препараты с сенсорным мазком подвергались флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) и лазерной сканирующей цитометрии (LSC) для оценки состояния геномной нестабильности и плоидности ДНК соответственно [14].
Экспрессию антигена Ki-67 оценивали на процент ядер опухолевых клеток с положительным иммуноокрашиванием над фоновым уровнем, наблюдая по меньшей мере 1000 ядер опухолевых клеток (индекс Ki-67). В этом исследовании показатель Ki-67 был оценен как высокий, когда 14% или более опухолевых клеток были иммунизированы в соответствии с рекомендациями Международного экспертного консенсуса St Gallen [5]. Все опухоли оценивались как высокие или низкие по индексу Ki-67. Иммуностеризованные слайды оценивались независимо двумя авторами (K.I. и T.F.).
Хромосомная нестабильность (CIN) была исследована FISH с использованием четырех перицентромерных зондов (хромосомы 7, 11, 17 и 18 для D7Z1, D11Z1, D17Z1 и D18Z1 соответственно, Abbott Laboratories, Abbott Park, Illinois, IL) на сенсорном мазке как описано ранее 20, а наличие или отсутствие CIN определялось в зависимости от степени изменения числа пятен FISH между ядрами 21. Слайды контрастировали 4’6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI). CIN считался положительным, когда доля клеток с модальным числом хромосом составляла менее 75% для четырех хромосом 20. Усиление HER2 тестировалось на препаратах мазка для двусмысленных случаев IHC с использованием набора ДНК DNA Probe Kit PathVysion HER2 (Abbott Laboratories) в соответствии с инструкциями производителя, как описано ранее. Опухоль считалась положительной для амплификации гена HER2, когда отношение HER2 / CEP 17 составляло 2,2 или выше.
Читайте также: