Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота

Определение болезни. Лейкоз крупного рогатого скота (лат. Bovine leucosis, англ. Leukaemia in cattle; синонимы — гемобластоз, белокровие, лейкемия, рак крови) — хроническая вирусная инфекционная болезнь, протекающая чаще бессимптомно, с развитием необратимого инфек­ционного процесса, проявляющегося персистентным (persisteus — со­хранившимся) лимфоцитозом, злокачественным разрастанием кровет­ворных и лимфоидных клеток с нарушением их способности к морфо­логической дифференцировке и физиологическому созреванию, с последующей диффузной инфильтрацией органов этими клетками или образованием опухолей.

Историческая справка. Лейкемия у лошади описана А. Лейзерингом в 1858 г., лейкоз крупного рогатого скота — в 1878 г. О. Зидамгродским.

Распространение болезни. Лейкоз крупного рогатого скота регистри­руется во всех странах мира. В Беларуси выявляется около 0,04 % ин­фицированных вирусом лейкоза коров и 0,02 % — молодняка крупного рогатого скота.

Экономический ущерб. Складывается из потерь, связанных с выбра­ковкой инфицированных вирусом лейкоза животных, недополучением мясной и молочной продукции, а также из затрат на утилизацию туш, проведение диагностических исследований и комплекса мероприятий по профилактике и ликвидации болезни.

Этиология. Возбудителем лейкоза крупного рогатого скота является экзогенный вирус, относящийся к семейству Retroviridae, роду Deltaretrovirus. ВЛКРС репродуцируется в перевиваемых культурах кле­ток овцы, крупного рогатого скота, свиньи, летучей мыши, крысы, со­баки, обезьяны и человека. Он может длительное время находиться в клетке хозяина, частично или полностью связанным с ее геномом. По своему строению и функциональным особенностям ВЛКРС подо­бен вирусу Т-клеточного лейкоза человека, однако, в отличие от него, поражает В-лимфоциты.

ВЛКРС инактивируется при температуре +56 °С в течение 30 мин, а при кипячении — моментально. Пастеризация молока при 76 °С инактивирует вирус в течение 20-30 с. Вирус погибает под действием обыч­ных дезсредств в невысоких концентрациях.

Эпизоотологические данные. Восприимчив к ВЛКРС крупный рогатый скот. Чаще лейкоз диагностируется у крупного рогатого скота в возрас­те 4-8 лет. Наиболее восприимчивы к лейкозу красная литовская, крас­ная датская, черно-пестрая, буро-латвийская, красно-белорусская по­роды. Заболеванию лейкозом способствуют близкородственное разве­дение, плохие условия кормления и содержания.

Гомологичность генов ВЛКРС и Т-клеточного лейкоза человека, эк­спериментальное воспроизведение соответствующей болезни у мака­ки-резуса и шимпанзе, способность ВЛКРС культивироваться на куль­турах клеток человека указывают на определенную опасность вируса для человека.

Источником возбудителя инфекции являются больные и инфици­рованные вирусом лейкоза животные. Начиная с инкубационного периода вирус выделяется из организма с молоком, молозивом и дру­гими секретами и экскретами, содержащими лимфоциты. Передача вируса может происходить при использовании одного и того же инс­трумента для проведения вакцинации, взятия крови, искусственного осеменения и др.; при использовании одного доильного аппарата, а также при неправильном взятии крови, когда кровь попадает на кормушки, пол и другие предметы. Передавать вирус могут чесоточ­ные клещи и жалящие насекомые. Важным фактором передачи явля­ется сперма быков-производителей, содержащая контаминированные ВЛКРС лимфоциты. Возможно внутриутробное заражение телят. Сезонность болезни не выражена, но характерна стационарность. Лейкоз регистрируется в виде энзоотии. Заболеваемость — 68 %. Ле­тальность — 15 %.

Патогенез. Различают следующие стадии инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота: инкубационная, бессимптомно­го инфекционного процесса, гематологическая, опухолевого проявле­ния болезни.

Инкубационная стадия продолжается с момента заражения до появ­ления антител к вирусу лейкоза и может длиться от 30 до 90 сут. Такие животные в этот период выделяют вирус.

Бессимптомная стадия проявляется в форме иммунного ответа на заражение ВЛКРС, т. е. в организме животного одновременно цирку­лируют ВЛКРС и соответствующие антитела. Такое состояние может продолжаться всю жизнь. Если же имеет место влияние различных фак­торов, происходит активизация вируса, проявляющаяся расстройством регуляции функции органов кроветворения. При этом поражаются лейкобласты, что может привести к развитию гематологической стадии, характеризующейся персистентным лимфоцитозом. В крови происхо­дит интенсивное увеличение количества лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов.

Более глубокое расстройство регуляции функции органов кроветво­рения может привести к интенсивной пролиферации различных типов лейкоцитов. Неконтролируемо размножаясь, они распространяются по организму, попадают в различные органы и ткани, образуют опухоли, т. е. имеет место развитие опухолевой стадии болезни.

Течение и симптомы болезни. В зависимости от стадии болезни и сте­пени поражения различных органов при лейкозе обнаруживают уве­личение поверхностных лимфатических узлов; ослабление сердечно­сосудистой деятельности; расстройство пищеварения; умеренное или сильное увеличение селезенки и печени; иногда хромоту, одно- или двустороннюю экзольфтальмию (пучеглазие); при ректальном иссле­довании — увеличение лимфатических узлов тазовой полости, глубо­ких паховых, а при вовлечении в инфекционный процесс матки — утолщение ее стенки; у телят — опухолевидное разрастание в зобной железе.

Иногда диагностируют кожную форму болезни. На шее, спине, крес­тце и бедрах появляются узелковые припухлости диаметром 2,5 см. В течение нескольких недель происходит облысение припухлости, ее поверхность покрывается корочкой, состоящей из эпителия и экссуда­та. Затем корочка отпадает, облысевшие участки вновь покрываются шерстью.

Патологоанатомические изменения. У животных, находящихся в опу­холевой стадии болезни, отмечают:

1) гиперплазию лимфатических узлов. Они достигают огромных раз­меров, весят до нескольких килограммов. На разрезе они сочные и саловидные, паренхима белого или серого цвета;

2) гиперплазию селезенки. Иногда в ней наблюдают разроет опухо­левой ткани в виде узлов. У отдельных животных она достигает длины 1 м и ширины 20—35 см;

3) разрастание опухолевой (лейкозной) ткани в стенке сычуга, рубца, в почках, печени, скелетной мускулатуре, диафрагме и других орга­нах;

4) истощение и общую анемию.

Диагностика. Основным методом прижизненной диагностики явля­ется серологический с использованием реакции иммунодиффузии (РИД) и иммуноферментного анализа (ИФА) для выявления специфи­ческих антител. Допускается использование полимеразно-цепной ре­акции (ПЦР).

ИФА используется для обнаружения антител в сыворотке крови, а также в объединенных пробах молока из благополучных по лейкозу хозяйств.

Инфицированными вирусом лейкоза признают животных, у которых в крови обнаружены специфические антитела к ВЛКРС одним из се­рологических методов (РИД или ИФА) или провирус лейкоза (ПЦР).

Дифференциальная диагностика. Исключают туберкулез, паратуберкулез, актиномикоз, а также болезни незаразной этиологии (гепатит, нефрит, ретикулоперикардит).

Лечение. Не разработано.

Специфическая профилактика. Эффективных средств для специфи­ческой профилактики при лейкозе нет.

Мероприятия по профилактике и ликвидации болезни. С целью про­филактики лейкоза проводят общие ветеринарно-санитарные мероп­риятия. В благополучных хозяйствах серологические исследования (ИФА) коров проводят с интервалом один раз в 2 года; нетелей — перед вводом в основное стадо; быков — после завоза в стадо, в последую­щем — 2 раза в год.

В неблагополучных хозяйствах вводят ограничения. Коров исследуют серологическим методом (РИД) через каждые 4 мес. до получения двух подряд отрицательных результатов. Реагирующих в РИД животных в течение 7 дней сдают на убой независимо от сроков стельности. Телят последнего отела от реагирующих в РИД коров сдают на убой незави­симо от возраста. Молоко от инфицированных коров используют жи­вотным группы откорма после кипячения.

Молодняк в неблагополучном хозяйстве (телят) исследуют в 6,12,18 мес. и перед вводом в основное стадо. Реагирующих животных в тече­ние 7 дней сдают на убой. Быки-производители с положительной ре­акцией подлежат немедленному убою, а запасы спермы, полученные от них за последние 6 мес, уничтожаются.

Хозяйство, в котором сдан весь инфицированный скот старше 6-ме­сячного возраста и получено два отрицательных результата с интерва­лом в 4 мес, а в последующем при однократном исследовании коров и телок в течение 2 лет не выявлено инфицированных животных, счи­тается благополучным.

Для лейкоза у коров характерно инфицирование РНК онкологическим вирусом.

Злокачественные образования поражают кроветворную систему, распространяясь на остальные внутренние органы. Заболевание относится к группе неизлечимых.

Что такое лейкоз у коров?

Около третьей части от всего объема КРС в России заражено лейкозом. Это одно из самых серьезных заболеваний, которое затормаживает развитие сельскохозяйственной отрасли.

Снижаются надои, отнимается у коровы возможность приносить здоровое потомство.

О болезни известно еще с конца 19 века, хотя без нынешнего названия.

Ветеринары встречали патологию с нечеткими внешними признаками, которая уничтожала целые стада и не встречала при этом отпора.

В разные периоды она называлась белокровие, чуть позже лейкемией, раком крови, лейкозом и так далее.

Лейкоз у коров характеризуется в проявлении злокачественных образований в некоторых ее органах, в первую очередь кроветворных.

В организме происходит активный процесс поражения лимфоузлов, сердца, селезенки, почек, сычуга вплоть до появления в них опухолей.

До сих пор в Российской Федерации до конца не изучены причины возникновения заразного заболевания. До недавнего времени ученые полагали, что оно не влияет на человека.

По сей день в медицинской практике не встречались случаи заражения лейкозом людей. Поэтому считается, что болезнь страшна только для животных.

Но вирусы легко трансформируются, видоизменяются и могут противостоять новым лекарствам.

Поэтому твердой уверенности в том, что вскоре не появится новый штамм вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). Есть вероятность, что он будет угрожать человеку.

На сегодняшний день в РФ нет пород КРС, устойчивых к лейкозу на 100%. Его нельзя путать с обычной лейкемией, которой заражаются не только коровы. Тип вируса С, у которого изменена РНК, отличается от нее.

Причины заболевания

Вирусоноситель лейкоза является измененной макромолекулой рибонуклеиновой кислоты самого животного.

После проникновения в организм крупного рогатого скота (КРС) он изменяет строение клеток кровеносной системы, чем нарушает ее функциональность.

На этом фоне вырабатывается излишнее количество лимфоцитов, разрастаются ткани и образуются опухоли.

Скрытый инкубационный период достаточно большой – до 7-ми лет.

Этот период может протекать совершенно бессимптомно. При этом корова является вирусоносителем. Поэтому может заражать других особей.

Пути передачи вируса:

• прямой контакт с больным животным;
• через рабочую утварь и инструменты;
• посредством спермы от инфицированного быка;
• через кровь и слюну;
• вирус разносят кровососущие насекомые – комары, клопы и пр.;
• через молоко, молозиво, околоплодные воды, плаценту.

Факторы, влияющие на инфицирование:

• низкий уровень иммунитета, когда хозяева дают некачественный корм, содержат КРС в ненадлежащих условиях;
• скученность содержания;
• стрессы (когда животных бьют);
• наличие любых патологий и отсутствие адекватного лечения;
• генетическое воздействие.

Вирус передается различными способами, на него не влияют климатические условия, время года и внешние факторы. Однако микроорганизм уязвим перед разогревом до 60-ти градусов и обработкой хлором, едким натром (3%).

Признаки

Симптоматика начинает проявляться со 2-ой стадии, по мере прогрессирования патологии признаки усиливаются и дополняются.

Определить лейкоз можно по таким симптомам:

• У коровы появляется постоянный понос, который может резко сменяться запором. При этом в каловых массах могут обнаруживаться кровяные сгустки.
• Увеличиваются лимфатические узлы, вплоть до размера мяча. Также увеличиваются и глазные яблоки – они выпячиваются (развивается пучеглазие).
• Животное становится подверженным любым заболеваниям. Малейшее переохлаждение приводит к его простуде.
• Корова становится бесплодной (яловой). Если стельная самка оплодотворилась, то у нее происходят выкидыши.
• Инфицированные телята постоянно болеют – им тяжело дышать, обнаруживаются проблемы с пищеварением.
• Крупный рогатый скот стремительно теряет вес, быстро утомляется. Происходит истощение.
• Корова становится ослабленной, её дыхание учащается.
• Если рассматривать вымя, то становится заметным перекос в размерах долей. Подгрудка, живот и вымя отекают.
• Качество молока становится хуже, а количество значительно снижается.
• Животное начинает хромать на задние конечности.
• На теле образуются видимые новообразования.

Стадии болезни

Формы болезни:

• Энзоотический вид обнаруживается преимущественно у взрослого КРС, протекает длительное время.
• Спорадический тип поражает молодняк до 3-х летнего возраста. Встречается редко.

Стадии коровьего лейкоза:

• Стадия № 1 – инкубационная (скрытая) характеризуется моментом проникновения инфекции в организм животного. Продолжительность различная – чем крепче у коровы иммунная система, тем дольше длится скрытая степень. Симптоматика отсутствует.
• Стадия № 2 – гематологическая. Кровяная жидкость КРС изменяет структуру, увеличивается концентрация лейкоцитов, на фоне чего развивается белокровие. Симптомы проявляются только со стороны органов желудочно-кишечного тракта. Обнаружить болезнь можно на основании собранных анализов.
• Стадия № 3 – опухолевая. В органах кроветворения разрастаются новообразования. Эта степень появляется по истечению 5-ти лет с момента инфицирования.

Возбудители лейкоза, в первую очередь, обнаруживаются в молоке, поэтому фермеры обязаны регулярно отвозить образцы жидкости в микробиологическую лабораторию для исследования.

Нужно помнить, что инфекция передается мгновенно.

Диагностика

Для постановки диагноза необходимо осуществить забор крови у животного, так как вирус изначально поражает кровеносную систему.

Следовательно, и локализуется там же. Поражению подвергаются лейкобластические клетки.

Исследование основано на таких методиках:

РИД – реакция иммунодиффузии. Кровь собирают через 2 недели после сбора анализов на туберкулезную палочку.

Если корова стельная, то сбор биологической жидкости проводят за 1 месяц до отела или через 30 дней после родоразрешения. Обследовать таким способом нужно всех животных, достигших полугодия.

Гематологический анализ оценивает концентрацию лимфоцитов в кровяной жидкости на протяжении 36-ти часов.

Если в период обследования не удается получить точный результат, анализ повторяют через месяц. Как правило, число данного вещества становится ниже, но при дальнейшем исследовании оно снова увеличивается.

Если результат положительный и наблюдается дважды по обоим методам, животное подвергается уничтожению.

Если плюс отмечается только по гематологическому анализу, то можно считать корову здоровой. Дополнительно может проводиться гистологический, серологический и вирусологический анализ.

Последствия для животного

Среди ветеринаров и фермеров бытует мнение, что лейкоз однозначно приводит к смерти животного.

Да, это так, потому что до сегодняшнего дня не было разработано ни одной эффективной вакцины, хотя исследования проводились неоднократно на протяжении многих десятилетий.

Поэтому при заражении одной особи владелец фермы должен заботиться об остальном поголовье.

Как лечить?

Лейкоз вылечить невозможно. Причина заключается в том, что возбудитель поражает лимфоцитные клетки. Чтобы уничтожить вирус, пришлось бы нейтрализовать лимфоциты, а это чревато иммунодефицитом.

Если говорить проще, то развивается состояние, как при ВИЧ и СПИДе. Если на ферме обнаружено 2 и более зараженные коровы, хозяйство относят к неблагополучному по лейкозу.

На основании этого предписывают ограничения и разрабатывают план по оздоровлению поголовья.

Ограничения:

• Отделение зараженного крупного рогатого скота от здоровых особей. Больных животных нельзя содержать вместе с остальным поголовьем, их нужно утилизировать.
• Даже если животное находится на начальной стадии развития лейкоза, категорически запрещено собирать удой и употреблять в пищу молоко. То же самое относится к мясу после забоя скотины.
• Нельзя перевозить КРС в другую местность и перемещать даже в пределах данного населенного пункта. Для этого придется получить разрешение у ветеринарной службы.

Оздоровление поголовья может проводиться разными методами. Это зависит от степени инфицирования стада. Все способы направлены на исследование всего поголовья, убой зараженных особей и частичную замену животных.

Фермеры должны строго соблюдать требования по профилактике и борьбе с данным заболеванием, придерживаться ветеринарных и санитарных правил во время проведения зоотехнических и ветеринарных мероприятий.

Первоначально необходимо осуществить забор крови у каждого животного. Если лейкоз подтверждается, зараженный скот немедленно перемещают в другое место, после чего отправляют на забой.

Остальных коров подвергают постоянному исследованию. Если на протяжении полугода заболевание не выявится, ферма приобретает статус благополучной по лейкозу.

Так как фермер после выбраковки больных животных лишается большинства коров, ему необходимо пополнять стадо.

Для этого проводятся закупки из других фермерских хозяйств. При этом важно соблюдать карантинный режим.

Меры профилактики

Профилактические мероприятия входят в список обязательных действий по содержанию крупного рогатого скота.

Это позволяет предупредить инфицирование и дальнейшее распространение лейкоза:

• Приобретать скот нужно только в тех хозяйствах, где отсутствует в родословной заболеваемость лейкозом. Быки и коровы должны быть полностью здоровы.
• Обязательно соблюдать карантин. Для этого новый завоз поголовья размещают в отдельном помещении на 2 месяца. В этот период коровы осматриваются ветеринаром, проводится их обследование, причем минимум 2 раза. Если результат отрицательный, скот вводят в общее стадо. Если положительный, направляют на откорм.
• РИД-позитивные особи содержатся в отдельном помещении, они предназначены для откорма.
• Если теленок родился от больной коровы, его несколько раз проверяют на лейкоз, так как не всегда молодняк заражается от матери.
• Коров с ослабленным иммунитетом желательно содержать тоже отдельно, так как существует риск инфицирования. Фермер должен их подкармливать специальными добавками для укрепления иммунной системы.
• Доение аппаратами, ветеринарную обработку и прочие манипуляции всегда начинают с полностью здоровых коров.
• Телят нумеруют при помощи жидкого азота, обеззараживают инструменты термическим и химическим способом.
• У быков-осеменителей нужно собирать кровь четырежды в год.
• Стельные коровы обследуются за 30-60 сутокдо предполагаемого отела.
• Санитарные условия содержания стада должны отвечать стандартным требованиям. Все инструменты, аппараты и инвентарь нужно качественно дезинфицировать.
• Исключается свободное спаривание быков и коров.
• Если в хозяйстве отсутствует осеменитель, закупается сперма, которая перед осеменением направляется на лабораторное исследование.

Опасность для человека

Как стало понятно, лейкоз у коровы опасен для всего крупного рогатого скота. А как влияет патология на человеческий организм? Ведь мы потребляем мясо и молоко.

Как оказалось, после многочисленных испытаний, человеческий организм не восприимчив к штаммам коровьего лейкоза. В мировой практике не были выявлены случаи инфицирования.

Однако медики рекомендуют с осторожностью относиться к продуктам животноводства.

Дело в том, что данные вирусы легко приспосабливаются ко всем условиям, они гибкие и мутирующие.

А это не дает никакой гарантии того, что в любой момент не может появиться новый, неизвестный человеку штамм ВЛКРС, представляющий опасность для жизни и здоровья человека.

Пить необработанное термически молоко и есть мясо зараженного животного противопоказано.

Причина кроется в том, что онкологические вирусы, находясь в организме коровы, накапливают в себе токсические и прочие вредные вещества.

Поэтому человек может получить заболевание токсического характера.

Известно, что возбудитель гибнет при термической обработке, поэтому инфицированные продукты питания нужно кипятить.

Но с другой стороны, токсины уничтожить высокой температурой невозможно. Следовательно, такое мясо и молоко принимать в пищу категорически нежелательно.

Лейкоз крупного рогатого скота — хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, основным признаком которой является злокачественное разрастание клеток кроветворных органов с нарушением их созревания. В результате происходит диффузная инфильтрация органов этими клетками или появляются опухоли.

Болезнь регистрируется почти во всех странах мира и наносит значительный экономический ущерб. Особую актуальность она приобрела из-за близкого родства ее возбудителя с вирусом Т-клеточного лейкоза человека.

К вирусу восприимчивы крупный рогатый скот, овцы, зебу, буйволы и, по некоторым данным, лоси.

Характеристика возбудителя. Вирус относится к семейству Retroviridae, подсемейству Oncovirinae, роду Oncovirus. Вирионы сферической формы, размером 40—90 нм и состоят из нуклеотида (сердцевины) с кубическим типом симметрии и липопротеидной оболочки, образующей на поверхности выступы. Нуклеотид содержит диплоидный геном, представленный двумя односпиральными линейными молекулами РНК.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. Вирус неустойчив к факторам внешней среды. Инактивируется при высоких температурах (56 °С и выше), УФ-излучении, под действием ультразвука. Повторные размораживания и оттаивания разрушают вирус. Дезинфицирующие растворы (формальдегид, едкие щелочи, хлорная известь и т. д.) в обычных концентрациях действуют на него губительно. Вирус чувствителен к жирорастворителям (эфиру, хлороформу, ацетону и т. д.).

Антигенная структура и активность. Вирионы вируса содержат наружные гликопротеидные и внутренние полипептидные антигены. Гликопротеидные антигены обладают гемагглютинирующей активностью и индуцируют образование вируснейтрализующих антител, которые защищают животных от инфицирования. Полипептидные антигены индуцируют образование преципитирующих

и комплементсвязывающих антител. Кроме того, преципитирующие антитела синтезируются и к гликопротеидному антигену и обнаруживаются у инфицированных животных в более ранние сроки в РДП.

Антигенная вариабельность и родство. В антигенном отношении штаммы вируса лейкоза крупного рогатого скота родственны, но отличаются от ретровирусов и вирусов других родов по антигенным свойствам, морфогенезу, синцитиобразованию, образованию в монослойных культурах клеток, свойством ревертазы. На основании этих различий вирус лейкоза рекомендуют отнести к особой группе, именуемой как тип Е.

Культивирование вируса. В лабораторных условиях вирус размножается в краткосрочных субкультурах лейкоцитов крови и перевиваемых культурах клеток животных различных видов (крупного рогатого скота, овец, летучих мышей, обезьян, собак и т. д.) и человека. Наиболее чувствительны — монослойные культуры клеток селезенки на ранних пассажах.

Репродукция вируса в культуре клеток не вызывает нарушения монослоя, а сопровождается образованием многоядерных клеток (синцитиев) уже в ранних пассажах. Это свойство вируса (синцитиобразование) было использовано в диагностическом методе по выявлению инфекционного вируса и вируснейтрализующих антител.

Гемагглютинирующая активность. Вирус агглютинирует эритроциты мышей при pH 6,0 и 4 °С.

Экспериментальная инфекция. Ее можно воспроизвести на новорожденных телятах и овцах, которым инокулируют разными способами (внутриперитонеально, подкожно, внутримышечно, аэрозольно) нативные лейкоциты или краткосрочные культуры клеток от больных лейкозом коров, или вируссодержащую культуральную жидкость. После длительной инкубации (от нескольких месяцев до нескольких лет) развивается характерная клиническая картина лейко — и лимфоцитоза, которая заканчиваются опухолевой стадией болезни и гибелью.

При экспериментальном заражении коз, свиней, кроликов наблюдается длительное выявление вирусспецифических антител без клинических проявлений болезни.

Клинические признаки. Различают две формы клинического течения болезни: энзоотическую и спорадическую.

Энзоотический лейкоз поражает взрослых (5—8 лет) животных и протекает с длительным латентным периодом (до нескольких лет), который характеризуется стойким лимфолейкозом без клинических признаков болезни. Терминальная стадия сопровождается снижением массы тела, молочной продуктивности, увеличением лимфоузлов и заканчивается смертью. Экономический ущерб очень высокий.

Спорадический лейкоз встречается редко и в экономическом отношении малоактуален. Поражается молодняк до трех лет. Болезнь протекает в трех формах: ювенальной, тимусной и кожной.

Патологоанатомические изменения. Они специфичны и характеризуются диффузной инфильтрацией различных тканей клетками кроветворных органов и образованием опухолевых масс во внутренних органах (костном мозге, тимусе, селезенке, лимфоузлах, сердце, сычуге, почках, матке, скелетных мышцах). Лимфоузлы и селезенка увеличены, бугристые, с очагами некроза и кровоизлияниями.

Локализация вируса. Вирус локализуется в лимфоидных клетках разных органов, хотя обнаружить его удается только в молозиве и молоке. В инфицированных клетках естественно и экспериментально зараженных животных вирус сохраняется пожизненно (персистирует). В инфицированных лимфоцитах в форме провируса (непродуктивное состояние) вирус защищен от действия вируснейтрализующих антител и может передаваться потомству во время деления клеток. Провирус может изменять экспрессию генов клетки, что приводит к ее трансформации и развитию опухолевой стадии лейкоза.

Источник инфекции — больные животные. Основной путь передачи инфекции в естественных условиях через контаминированные вирусом инъекционные иглы, хирургические инструменты и т. д. при проведении санитарно-ветеринарных мероприятий. Кроме того, вирус может передаваться трансплацентарно (хромосомная или экстрахромосомная трансмиссия) от матери к плоду, алиментарно через молоко и молозиво, а также половым путем через инфицированную сперму. Распространяться инфекция может кровососущими насекомыми.

Диагностика. Диагноз на лейкоз ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований, которые играют решающее значение.

Взятие материала. От больных и подозрительных на лейкоз животных берут кровь. Для гематологических исследований ее берут из яремной вены с антикоагулянтом. Для серологических исследований используют сыворотку крови от животных в возрасте 6 мес и старше. Транспортируют в термосе со льдом.

От трупов берут кусочки пораженных органов: селезенки, лимфоузлов, грудной кости, печени, почек, легких, сердца, сычуга, матки, скелетных мышц. Транспортируют в свежем виде или в растворе консерванта (10%-ном формалине) в термосе со льдом.

Лабораторная диагностика. Проводят гематологические, гистологические и специфические исследования.

Гематологический метод основан на подсчете лейкоцитов периферической крови и выведении лейкоцитарной формулы. Для этого используют электронный счетчик или камеру Горяева. Из проб крови, где установлен лимфолейкоз, готовят мазки и подсчитывают клетки белой крови в зависимости от их морфологии.

У больных лейкозом повышено содержание лейкоцитов за счет клеток лимфоцитарного ряда, а также слабодифференцированных ретикулярных и антигенных (опухолевых) клеток.

У подозрительных на лейкоз животных гематологические исследования повторяют через равные интервалы (2—3 мес).

Для гистологических исследований из кусочков пораженных органов готовят специальные срезы и окрашивают гематоксилин-эозином. У больных лейкозом наблюдают диффузную инфильтрацию клетками лимфоидного ряда разной степени зрелости, склеротические изменения и некрозы.

Помимо этого для подтверждения диагноза могут проводить индикацию и идентификацию вируса.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Используют серологические реакции, из которых наиболее чувствительны РДП и ИФА. Они позволяют обнаружить специфические антитела у инфицированных животных, начиная с 6-месячного возраста и старше. Это объясняется тем, что телята, выпаиваемые молозивом и молоком инфицированных коров, получают материнские антитела, которые сохраняются до 6 мес.

РДП (РИД). Для постановки реакции используют диагностический набор, содержащий необходимые компоненты (специфический антиген и сыворотку к нему, отрицательную сыворотку). Реакцию ставят микро — или макро методом по общепринятой методике, используя 0,8%-ный агар на трис-буфере. Учет проводят через 48 ч. Животные, сыворотки крови которых положительно прореагировали (полоса преципитации между испытуемой сывороткой и антигеном) в РДП, считаются зараженными лейкозом.

ИФА. Применяют для обнаружения специфических антител в сыворотках крови, молоке и молозиве. Используются диагностические наборы для непрямого и конкурентного вариантов ИФА. Данный метод в 100 раз чувствительнее РДП и позволяет проводить широкомасштабные исследования по эпизоотическому лейкозу в стадах крупного рогатого скота.

Другие серологические методы уступают по чувствительности (% выявляемости) РДП и ИФА, поэтому могут рекомендоваться в качестве дополнительных. К ним относятся реакции латексагглютинации (РЛА), непрямой гемагглютинации (РНГА), непрямой иммунодиффузии (РИФ), а также встречного иммуноэлектрофореза (ВИЭФ).

Индикация и идентификация вируса. В диагностике лейкоза крупного рогатого скота они имеют скорее дополнительное значение и используются менее широко. С этой целью применяют ПЦР для обнаружения вирусного генома (провирусной ДНК), выделение вируса в культуре клеток и его индикацию в месте синцитиобразования, электронно-микроскопический метод, реакции бласттрансформации лейкоцитов (РБТЛ), а также обнаружение вирусных антигенов методом радиоиммунологического анализа (РИА).

ПЦР. Реакция позволяет обнаружить провирусную ДНК в патологическом материале через две недели после заражения. В диагностический набор входят праймеры, соответствующие участкам определенных генов некоторых структурных белков. Чувствительность данного набора достаточно высокая и позволяет выявлять до десяти копий ДНК в 1 мкг исследуемой пробы.

Тест синцитиобразования (ТСО). Основан на выделении инфекционного вируса в субкультурах и перевиваемых культурах клеток лимфоцитов, где он размножается с образованием многоядерных клеток (синцитиев), которые выявляются при окрашивании монослоя.

Электронно-микроскопический метод. Позволяет обнаруживать вирусные частицы в препаратах, полученных из краткосрочных культур клеток лейкоцитов крови, зараженных вирусом лейкоза, и из перевиваемых культурах клеток, сокультивируемых с инфицированными лимфоцитами. Вирионы обнаруживают в основном в межклеточном пространстве и на внешней мембране лимфоидных клеток. Они имеют ультраструктуру, характерную для онковирусов типа С.

Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ). Основана на способности лимфоцитов трансформироваться в переходные клеточные формы в питательной среде (в присутствии фитогемагглютинина) при определенном режиме культивирования (36 °С, 72 ч). Такие же процессы происходят in vivo у клинически здоровых животных. В препаратах, полученных в результате культивирования и окрашенных по Романовскому—Гимзе, определяют количество трансформированных лимфоцитов на 1000 учтенных клеток и выражают показателем бласттрансформации. В норме у клинически здоровых коров он составляет в среднем 60 % (40—90 %). Диагноз на лейкоз считается подтвержденным, если этот показатель не выше 35 %.

РИА. Метод конкурентного радиоиммунного анализа позволяет обнаруживать вирусные антигены в краткосрочных культурах лимфоцитов крови инфицированных животных. Основан на конкуренции вирусного антигена, выделенного из зараженных клеток, с контрольным (специфическим) антигеном, меченным изотопом, за связывание со специфическими антителами. Метод — наиболее чувствителен и специфичен.

Дифференциальный диагноз. Лейкоз крупного рогатого скота дифференцируют от актиномикоза, туберкулеза, паратуберкулеза и бруцеллеза.

Иммунитет и специфическая профилактика. Вакцины против лейкоза крупного рогатого скота нет, но исследования в этой области продолжаются. В основном, они идут по двум направлениям: созданию вакцины на основании культурального вируса и разработки рекомбинантной вирусвакцины. Достижение первого направления исследований — получение культурального вируса с использованием перевиваемых культур клеток (LK-15, FLK и др.), выбор эффективного инактиванта (формальдегида, этиленимина и его производных), который обеспечивает сохранение антигенной активности и полностью устраняет инфекционность вируса, и, наконец, проведение испытаний опытных серий полученного препарата на естественно-воприимчивых животных (телятах).

Что касается генно-инженерных разработок, то на сегодняшний день в качестве вирусного вектора используют осповакцину, содержащую рекомбинантные гены, кодирующие наружные антигены вируса лейкоза. После адаптации таких штаммов к культурам клеток (NP-2) получена живая культуральная рекомбинантная вакцина, опытные серии которой испытаны на телятах и овцах.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.