Что такое анеуплоидия опухоли

Анеуплоидия - это генетическое нарушение, при котором в клетке организма содержится аномальное количество хромосом. Чтобы больше узнать о том, как проявляется анеуплоидия и каковы ее причины, кратко разберем структуру живой клетки, клеточного ядра и самих хромосом.

Немного теории

Как известно, в каждой соматической клетке человеческого организма находятся в норме 46 хромосом, то есть диплоидный набор. Только в половых клетках этот набор одинарный. Хромосомы располагаются в клеточном ядре и представляют собой длинную, скомпактизованную спираль ДНК. ДНК, в свою очередь, состоит из мономеров - полипептидов. Определенная последовательность полипептидов задает ген - структурную единицу наследственности. ДНК содержит всю генетическую программу развития данного организма.

В неполовых клетках каждая хромосома имеет гомологичную, сестринскую хромосому, очень похожую, но не идентичную первой. В процессе мейоза эти хромосомы обмениваются участками. Такое явление называют "кроссинговер". В хромосоме выделяют длинное и короткое плечи.

Хромосомный набор

Совокупность хромосом организма называется кариотипом. В норме у человека, как уже говорилось, кариотип представлен 46 хромосомами, по 23 от каждого родителя, но встречается аномалия, при которой кариотип представлен иначе. Это нарушение называется "анеуплоидия".

Анеуплоидия - это разновидность кариотипа, при котором число хромосом не равно нормальному. Анеуплоидия хромосом, при которой отсутствует одна хромосома, называется моносомией. Если отсутствует пара - нуллисомией. Если вместо нормальной пары гомологичных хромосом в кариотипе появляются три гомологичные, то это трисомия. Любое изменение числа хромосом вызывает серьезные нарушения развития. Некоторые из них могут быть летальными.

Анеуплоидия неполовых хромосом (аутосом)

Существует множество генетических болезней, которые вызывает именно анеуплоидия. Примеры таких заболеваний - синдром Дауна, синдром Патау, синдром Эдвардса. Все эти заболевания вызваны наличием добавочной хромосомы в разных гомологических парах. Синдром Дауна - самое распространенное из этих заболеваний. Проявляется оно умственной отсталостью, нарушениями в общении, трудностями в обучении.

Однако трисомия по 21-й хромосоме, которая и вызывает заболевание, никак не влияет на продолжительность жизни. Занятия по определенным методикам могут помочь больным достичь определенных успехов в обучении и социализации.

Другое заболевание, синдром Патау, также вызывает анеуплоидия. Это тяжелейшее нарушение - результат трисомии по 13-й хромосоме. Больные крайне редко доживают до 10 лет, более 80 % умирают в первый год жизни, остальные страдают тяжелой формой олигофрении. У детей с синдромом Патау выражена микроцефалия, часто наблюдаются проблемы с сердцем, помутнение роговицы, расщеплено нёбо, ушные раковины несколько деформированы.

Основной причиной синдрома Эдвардса также является анеуплоидия - трисомия по 18-й хромосоме. Более 90 % детей с этим заболеванием погибают от остановки сердца в первый год жизни, остальные страдают тяжелой формой олигофрении и практически необучаемы.

Трисомия по 16-й хромосоме встречается чаще, чем любая другая анеуплоидия. Это генетическое нарушение летально, плод погибает в утробе матери в течение первых трех месяцев беременности.

Анеуплоидия у человека может проявляться редким генетическим заболеванием - синдромом Варкани, трисомией по 8-й хромосоме. Основные симптомы - умственная отсталость, пороки сердца, аномалии скелета.

Анеуплоидии половых хромосом

Разновидность анеуплоидии, которая не всегда приводит к тяжелым последствиям, - трисомия по Х-хромосоме. Такое нарушение бывает только у женщин. Трисомия по Х-хромосоме встречается относительно часто - у 0,1 % женщин. Заболевание может никак не проявляется в течении всей жизни, что и происходит примерно в 30 % случаев. Для остальных 70 % процентов характерны следующие симптомы: дислексия, аграфия, речевые и двигательные нарушения. Применяемое в таких случаях симптоматическое лечение весьма эффективно и помогает полностью или частично устранить эти симптомы.

Другие аномалии, связанные с количеством половых хромосом, гораздо более серьезны. К ним относятся синдром Шерешевскоро - Тернера, частный случай анеуплоидии, при котором в кариотипе женщины - только одна Х-хромосома вместо нормальных двух. Симптомы - задержка психического развития, низкий рост, нарушение развития половых органов, возможна легкая форма умственной отсталости.

Существует еще одно серьезное заболевание, причиной которого является анеуплоидия. Это синдром Клайнфельтера - наличие одной или нескольких дополнительных Х- или У-хромосом у мужчин. Симптомы не проявляются до начала полового созревания. Почти у половины больных симптомов нет в течение всей жизни, у других наблюдается гинекомастия, ожирение, бесплодие. В редких случаях отмечается олигофрения.

Причины анеуплоидии

Анеуплоидия возникает из-за того, что во время мейоза гомологичные хромосомы не разделились и вместо одной в гамету попала пара хромосом или не попала ни одна. Если в одной гамете количество хромосом нормальное, а в другой - аномальное, то кариотип зиготы будет аномальным.

Неразделение гомологических хромосом может произойти из-за неблагоприятных условий окружающей среды, воздействия токсинов различной природы. Но чаще всего причина в наследственности: в семьях, где уже были случаи анеуплоидии, риск рождения ребенка с аномальным кариотипом выше, чем у здоровых родителей.

Частота

Можно сказать, что базовый риск хромосомных болезней-анеуплоидий в среднем невелик, так как все генетические заболевания относятся к категории редких. Общая вероятность рождения ребенка с аномалией кариотипа оставляет 5 % в случае, если оба родителя здоровы. Если один из родителей имеет какую-либо патологию кариотипа, вероятность рождения больного ребенка возрастает.

Частота анеуплоидий зависит от хромосомы. Самая распространенная патология кариотипа - синдром Клайнфельтера, анеуплоидия половой хромосомы, частота 1 на 500 новорожденных мальчиков, наиболее редкая - синдром Варкани, анеуплоидия 8-й хромосомы, частота 1:50 000.

Лечение

Лечение анеуплоидий всегда симптоматическое. При синдроме Шерешевского - Тернера отмечается низкий рост и недостаток женских половых гормонов, потому для лечения применяются анаболические стероиды.

При синдроме Дауна лечение сводится к занятиям с больным по специальным программам, направленным на развитие когнитивных способностей.

Больные с синдромом Варкани редко доживают до 20 лет. Со временем появляются новые анатомические изменения, прогрессирует умственная отсталость. При необходимости прибегают к оперативному вмешательству для коррекции состояния позвоночника и лечения контрактур.

Если у девочек с трисомией по Х-хромосоме наблюдается задержка речевого развития, может понадобиться консультация логопеда. В случае проблем с письмом и чтением стоит обратиться к специалисту по дислексии.

Синдром Клайнфельтера не всегда влияет на качество жизни пациентов. В редких случаях отмечается умственная отсталость. В зависимости от ее степени (легкая, средняя, тяжелая) разрабатывается индивидуальная программа обучения. Если проявляется гинекомастия, снижение половой функции, бесплодие, то прибегают к гормональной терапии.

Диагностика

Выявить генетические заболевания плода можно с использованием ряда методов (ультразвуковое обследование, метод биохимических маркеров).

С помощью ультразвукового исследования можно выявить у плода синдром Дауна на ранней стадии развития.

Неинвазивная пренатальная диагностика анеуплоидий является безопасным и точным методом определения возможных аномалий кариотипа. Суть метода проста - специалист исследует фрагменты ДНК ребенка, находящиеся в крови матери. Инвазивная диагностика анеуплоидий является более точным методом, но так как он несет риск самопроизвольного прерывания беременности, к нему прибегают только в крайних случаях.

Факторы, увеличивающие вероятность анеуплоидий

Последние исследования доказали, что наблюдается определенная корреляция между возрастом матери и вероятностью рождения ребенка с синдромом Дауна, синдромом Патау или синдромом Эдвардса. Чем старше женщина, тем выше вероятность рождения у нее ребенка с аномальным кариотипом.

Какие именно факторы играют решающую роль в развитии анеуплоидии половых хромосом, неизвестно. Предполагается, что ключевая роль в таких случаях принадлежит наследственности.

Анеуплоидия – изменение набора хромосом, при котором их число в клетках не соответствует норме. Анеуплоидия – собирательное понятие: оно объединяет заболевания, вызванные увеличением числа хромосом, и заболевания, вызванные уменьшением их количества.

Нормальный человеческий геном состоит из 46 хромосом (23 пары): 22 пары представлены аутосомами (хромосомами, одинаковыми для мужских и для женских организмов), 1 пара – хромосомы, определяющие пол. Так, если пара половых хромосом представлена комбинацией ХХ, пол будет женским, а если XY – мужским.

Анеуплоидия аутосом с недостаточным числом хромосом, как правило, вызывает эмбриональные пороки развития, не совместимые с жизнью, и является наиболее частой причиной самопроизвольных абортов (выкидышей) на ранних сроках беременности, в период формирования внутренней структуры будущего организма.

Из зиготы с увеличенным числом аутосом способны развиваться жизнеспособные особи; при рождении у этих детей диагностируются множественные резко выраженные аномалии развития.

Анеуплоидия половых хромосом обычно влечет не такие критические последствия.

Причины и факторы риска

Заболевания, вызванные количественным изменением хромосомного набора, возникают в результате сбоев при расхождении хромосом в митозе или мейозе. В данном случае одна или несколько пар хромосом не расщепляются, и при делении ядра клетки оба члена пары направляются к одному и тому же полюсу, что приводит к образованию дефектной половой клетки (сперматозоида или яйцеклетки) с недостаточным или избыточным количеством хромосом.

При слиянии подобной клетки с нормальной гаметой, несущей стандартный хромосомный набор, образуется зигота с нечетным числом хромосом: вместо 2 в одной из пар их определяется 3 или 1. В редких случаях одна из хромосомных пар может отсутствовать или полностью дублироваться.

Согласно статистическим данным, частота встречаемости хромосомных аномалий у живорожденных детей составляет менее 1%, у мертворожденных, родившихся в срок, – около 5%, при самопроизвольном прерывании беременности на раннем сроке – 50–70%. Риск появления ребенка с анеуплоидией составляет около 5%, даже если оба родителя здоровы.

Определить анеуплоидию при внутриутробном развитии плода позволяет пренатальный скрининг. Он проводится дважды: первый скрининг – в 10-14, второй – в 16-20 недель беременности.

У некоторых женщин вероятность развития анеуплоидных эмбрионов выше, что связывают с дефектом гена PLK4. У здоровых мужчин от 1 до 4% сперматозоидов имеют анеуплоидный набор хромосом.

возраст матери старше 35 лет (после 45 лет каждая 5-я беременность завершается рождением ребенка с хромосомной болезнью);
патологические беременности и многократные спонтанные аборты (особенно на ранних сроках) в анамнезе;
отягощенный семейный анамнез (диагностированные генетические патологии);
употребление запрещенных веществ;
злоупотребление табаком, алкоголем;
воздействие токсических агентов (акридиновых красителей, алкилирующих агентов, органических растворителей, пестицидов, продуктов переработки нефти, бензола, биополимеров и т. п.);
воздействие ионизирующего излучения;
неблагоприятные условия окружающей среды;
фармакотерапия некоторыми препаратами (цитостатиками, препаратами ртути, иммунодепрессантами, некоторыми алкалоидами);
перенесенные вирусные инфекции (корь, краснуха, грипп).

Формы заболевания

В зависимости от характеристики вовлеченных хромосом анеуплоидия может быть:

аутосомной;
половой.

Исходя из числа вовлеченных хромосом, выделяют следующие формы анеуплоидии:

нуллисомия (отсутствие 1 пары хромосом – 22-й);
моносомия (отсутствие 1 из парных хромосом – недостающая хромосома);
трисомия (пара, состоящая из 3 хромосом вместо 2, – добавочная хромосома);
тетрасомия (пара, состоящая из 4 хромосом вместо 2, – 2 добавочные хромосомы);
пентасомия (пара, состоящая из 5 хромосом вместо 2, – 3 добавочные хромосомы).

В случае сохранного количественного набора иногда говорят о частичной моносомии, если в одной из хромосом присутствуют значительные повреждения с потерей большей части.

Нуллисомия несовместима с жизнью.

Аутосомная моносомия несовместима с жизнью. Крайне редко рождаются жизнеспособные дети с множественными аномалиями развития, они погибают в первые дни жизни. Моносомия половой Y-хромосомы также несовместима с живорождением. Самая распространенная моносомия половой Х-хромосомы – синдром Шерешевского – Тернера.

Анеуплоидия аутосом с недостаточным числом хромосом является наиболее частой причиной самопроизвольных абортов (выкидышей) на ранних сроках беременности.

Трисомия – самая распространенная форма анеуплоидии. Наиболее часто поражается 16-я пара аутосом (приблизительно 1% всех беременностей), эмбрион в этом случае нежизнеспособен, погибает в течение первого триместра внутриутробного развития. Жизнеспособным является ребенок, рожденный с патологией 21-й пары хромосом; данное состояние называется синдромом Дауна.

Другие (менее распространенные) аутосомные трисомии характеризуются множественными пороками развития, в том числе тяжелой олигофренией; речь идет о трисомии 18-й пары, или синдроме Эдвардса (60% детей умирает в возрасте до 3 месяцев, до 1 года доживает лишь 5–10%), и трисомии 13-й пары, или синдроме Патау (95% детей умирает в течение первого года жизни).

Тетра- и пентасомия встречаются крайне редко, в среднем с частотой 1:18 000-1:100 000. Беременности при данных аномалиях развития эмбриона самопроизвольно прерываются на ранних этапах, живорождение практически невозможно.

Симптомы

Синдром Шерешевского – Тернера (моносомия Х-хромосомы у женщин), частота встречаемости – 1:5000, проявляется следующим:

Для синдрома (болезни) Дауна, или трисомии 21-й пары хромосом (в среднем – 1 случай на 700-1000 родов), характерны:

Синдром Кляйнфельтера (трисомия половой Х-хромосомы у мужчин) встречается сравнительно нередко, в среднем с частотой 1:500-1:700, диагностируется при наступлении полового созревания. Когнитивные нарушения у таких пациентов отсутствуют или представлены в легкой степени (по разным данным, 25–50% случаев). Основные симптомы:

высокий рост (около 180 см);
диспропорционально длинные конечности;
высокая талия;
хрупкое, евнухоидное телосложение с широкими бедрами и узкими плечами;
редкий волосяной покров на теле и лице;
жировые отложения на теле по женскому типу;
аномально малые размеры половых органов;
возможное двустороннее безболезненное увеличение грудных желез;
бесплодие.

Диагностика

Основной способ диагностики хромосомных аберраций – кариотипирование, то есть изучение набора хромосом.

Риск появления ребенка с анеуплоидией составляет около 5%, даже если оба родителя здоровы.

В случае дородовой диагностики возможных хромосомных нарушений плода используют несколько методик:

УЗ-диагностика;
биохимическое исследование крови матери на наличие специфических маркеров (хорионического гонадотропина (ХГЧ), плацентарного протеина (РАРР-А), альфа-фетопротеина, свободного эстриола);
неинвазивный пренатальный ДНК-тест крови матери;
анализ кариотипа клеток плода (цитогенетический анализ);
хромосомный микроматричный анализ (ХМА).

Кариотипирование клеток плода и ХМА являются инвазивными методиками; иными словами, они предполагают инструментальное проникновение в полость беременной матки с целью забора биологического материала и применяются только при неблагополучном генетическом анамнезе или косвенных признаках хромосомных нарушений, полученных при использовании неинвазивных методик.

Пренатальная диагностика проводится дважды за время беременности: первый скрининг – в 10-14, второй – в 16-20 недель беременности.

Лечение

Фармакотерапевтическая коррекция хромосомных нарушений на настоящем этапе развития медицины невозможна.

Пациентам с хромосомными нарушениями рекомендуются:

симптоматическая терапия для лечения сопутствующих состояний и осложнений основного заболевания;
заместительная гормонотерапия;
хирургическая коррекция косметических недостатков и дефектов, отрицательно влияющих на качество жизни.

Возможные осложнения и последствия

Осложнения анеуплоидий – интенсивно прогрессирующие пороки развития:

артериальная гипертензия;
пороки сердца;
болезнь Альцгеймера;
эписиндром;
злокачественные заболевания крови;
иммунодефицитные состояния;
острая почечная недостаточность;
катаракта;
заболевания щитовидной железы;
сахарный диабет;
остеопороз; и др.

Прогноз

Прогноз для пациентов с синдромом Шерешевского – Тернера весьма благоприятен при отсутствии инвалидизирующих пороков развития систем и органов. Проведение заместительной гормональной терапии позволяет существенно повысить качество жизни.

У здоровых мужчин от 1 до 4% сперматозоидов имеют анеуплоидный набор хромосом.

Прогноз для пациентов с трисомией 21 (синдромом Дауна) достаточно благополучный: средняя продолжительность жизни при полноценном медицинском сопровождении – 45-50 лет. При всестороннем развитии и квалифицированном уходе дети хорошо социализируются, осваивают школьную программу в ограниченном объеме. Описаны случаи получения людьми с данной патологией университетского образования.

Прогноз для пациентов с синдромом Кляйнфельтера благоприятный.

Профилактика

В целях профилактики применяются:

медико-генетическое консультирование пар, относящихся к группам риска (старше 35 лет, с отягощенным анамнезом), на этапе планирования беременности;
ранняя пренатальная неинвазивная диагностика, которая позволяет не допустить рождение ребенка с серьезными пороками развития;
уменьшение влияния негативных факторов риска.

Видео с YouTube по теме статьи:

Информация является обобщенной и предоставляется в ознакомительных целях. При первых признаках болезни обратитесь к врачу. Самолечение опасно для здоровья!

Автореферат диссертации по медицине на тему Анеуплоидия и особенности пролиферации клеток рака различного происхождения (эктодермального, энтеродермального, мюллерова) по данным проточной цитометрии ДНК

На правах рукописи

БЫЧКОВА Наталия Владимировна

АНЕУПЛОИДИЯ И ОСОБЕННОСТИ ПРОЛИФЕРАЦИИ КЛЕТОК РАКА РАЗЛИЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ (ЭКТОДЕРМАЛЬНОГО, ЭНТЕРОДЕРМАЛЬНОГО, МЮЛЛЕРОВА) ПО ДАННЫМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДНК.

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте онкологии им. проф . Н. Н. Петрова Министерства здравоохранения РФ и Всероссийском Центре Экологической Медицины. Санкт-Петербург.

-шъл-пищ/. tntn, димир медицинских наук, профессор К.М.Пожарисский кандидат технических наук Ю.М.Розанов

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

кандидат биологических наук, доцент А.Д.Харазова

Ведущее учреждение: Санкт-Петербургская Государственная Академия им. И.И.Мечникова

Зашита диссертации состоится "_"_1997г. в_час. на заседании

специализированного совета К 074.38.01 НИИ онкологии им. проф.Н.Н.Петрова Минздрава РФ по адресу: 189646, Санкт-Петербург, Песочный-2, Ленинградская ул., 68.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института.

Автореферат разослан /Ц&/ |997г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

В нашей стране, к сожалению, этот надежный и высоко воспроизводимый метод не получил достаточно широкого распространения. Одной из причин такого положения, наряду с трудностями внедрения нового дорогостоящего оборудования, является то, что несмотря на активные исследования в данной области (в основном, в зарубежных лабораториях) остаются нерешенными ряд принципиальных вопросов аналитической цитологии и фундаментальной онкологии. Так, неясно, является ли анеуплоидия характерной особенностью только клеток злокачественных новообразований или она может выявляться и в доброкачественных опухолях, какова частота анеуплоидных опухолей в злокачественных новообразованиях различного тканевого происхождения, какова зависимость между морфологическими проявлениями анаплазии опухоли и анеуплоидией, возможно ли использование показателей плоидности и пролиферативной активности клеток опухоли в качестве самостоятельных критериев прогноза (частота рецидинов. метастазов, исхода онкологического заболевания), какая степень анеуллоидии находит отражение в биологическом поведении новообразования.

Не подлежит сомнению необходимость и перспективность исследований, направленных на решение перечисленных вопросов.

Кроме гого, представляются крайне интересными сравнительные данные об особенностях пролиферативной активности и содержания ДНК п новообразованиях различной тканевой природы (в том числе различных зпителиев), так как типы тканей обладают своими характерными чертами (в значительной степени тго касается кинетики клеточного обновления, а также оабильности генетического аппарата

в различных условиях нормы и патологию, что может найти отражение в возникших из них опухолях.

Цель к задачи исследования. Пр^рот" .ил^сдиышие осооенно-

. -------------м иролиферативнои активности клеток наиболее часто встре-

чающихся эпителиальных опухолей различного происхождения (эктодермального, энтеродермального, мюллерова) в аспекте использования этих параметров и морфологической структуры новообразований для оценки биологического поведения этих опухолей.

В соответствии с целью исследования поставлены следующие задачи:

1. С помощью метода проточной цитометрии определить содержание ядерной ДНК и пролиферативную активность клеток в плоскоклеточном раке языка и дна полости рта, аденокарциноме ободочной и прямой кишок, инаазивном протоковом раке молочной железы и эндометриальной аденокарциноме тела матки, т.е. в типах опухолей, наиболее характерных для соответствующих органов.

2. Изучить те же параметры в исходных для перечисленных опухолей чпите-лиях у лиц без опухолевых заболеваний.

3. Сопоставить данные о содержании ядерной ДНК и пролиферативной активности изучаемых опухолей с особенностями их микроскопической структуры (степень дифференцировки, глубина инвазии, н-ипчие метастазов и др.).

4. Провести сопоставление полученных цитометрических параметров с агрессивностью течения болезни, определяемой по клинико-морфологическим критериям прогноза (степень гистологической злокачественности инвазивного протокового рака молочной железы, стадия распространения опухоли толстой кишки по Дюксу, клинический прогноз аденокарциномы тела матки) и выживаемости больных плоскоклеточным раком языка и дна полости рта для оценки возможности использования показателей плоидности и пролиферативной активности клеток в качестве прогностических критериев заболевания.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Анеуплоидия не встречается в микроскопически нормальном мпителии роговой полости, толстой кишки, молочной железы, матки лип без опухолевой патологии.

2. Анеуплоидия является характерной особенностью злокачественных новообразований, ее наличие и степень пыражениости связаны с агрсссишюстыо плоскоклеточиш'о рака дна полости рта, аденокарциномы прямой кишки, ипназив-

ного протокового рака молочной железы и лдемокарциномы гела матки. Клоны ане-уплоидных клеток встречаются в микроскопически неизмененной слизистой оболочке толстой кишки и матки при наличии в них аиеуплоидных новообразований, что может быть обусловлено распространением опухолевых клеток по слизистой оболочке органа.

3. Опухоли ¿'.несколькими клонами аиеуплоидных клеток характеризуются неблагоприятными клинико-морфологическнми показателями при плоскоклеточном раке языка, инвазивном протоковом раке молочной железы и аденокарциноме тела матки.

4. Увеличение индекса ДНК связано с неблагоприятными клинико-морфологическими показателями при аденокарциноме тела матки и плоскоклеточном раке языка. Тетраплоидия не связана с неблагоприятными факторами при плоскоклеточном раке дна полости рта, аденокарциноме прямой кишки и инвазивном протоковом раке молочной железы.

5. Пролиферативная активность микроскопически нормального эпителия ротовой полости, толстой кишки, молочной железы и матки здоровых лиц приблизительно в полтора раза ниже, чем в соответствующих опухолях. Индекс пролиферации может служить дополнительным критерием прогноза при аденокарциноме тела матки.

Научная новизна. Впервуе с использованием метода проточной цитометрии проведено сравнительное исследование содержания ядерной ДНК и интенсивности пролиферации клеток с определением их распределения по фазам митотического цикла в опухолях различной эпителиальной природы в сопоставлении с нормальными их прототипами. Степень анеуллоидии и изменения кинетических параметров пролиферации сопоставлены с макро- и микроскопической структурой изучаемых опухолей (размеры опухоли, степень их дифферонцироВкн/степень гистологической злокачественности, глубина инвазии, наличие метастазов), с предполагаемым прогнозом, определяемым по клинико-морфологическим данным при аденокарциноме тела матки, а при раке языка и дна полости рта цито метрические показатели сопоставлены с 2,5-лстпей выживаемостью пациентов. Выявлены различия п частоте встречаемости анеуплоидии и величины пролиферативной активности в злокачественных новообразованиях различной локализации. Установлена зависимость плоидиости и пролиферативной активное гн опухолей от возраста пациентов. Выявлена возможность использования пдоидцост и пролиферативной активности при некоторых типах новообразований (аденокарнинома гела матки и прямой кишки.

инвазивный протоковый рак молочной железы, плоскоклеточный рак дна полости рта) как дополнительных факторов прогноза новообразования.

Практическая значимость. Показано значение анеуплоипии 1-як

агрессивности течения ______„|и,ш1мии железы, аденокарци-

номы прямой кишки и тела матки, плоскоклеточного рака дна полости рта. Установлено, что высокая пролиферативная активность является неблагоприятным прогностическим фактором при аденокарциноме тела матки. Данные показатели можно использовать для дифференциального подхода к пациентам с целью динамичного наблюдения за больными, а в ряде случаев для назначения более интенсивного лечения. Показано, что в микроскопически нормальном эпителии тела матки и толстой кишки в случае анеуплоидных новообразований возможно нахождение клонов ане-уплоидных клеток, что может быть причиной рецидива опухоли.

Апробация работы. Результаты исследования обсуждались на научных лабораторных конференциях НИИ онкологии им.проф. Н.Н.Петрова и ВЦЭМ, а также были доложены на заседании Санкт-Петербургского общества патологоанатомов (1994), на 23 научной сессии НИИАГ им. Д.О.Отта (1994), на Российском симпозиуме с международным участием по онкогинекологии "Скрининг и новые подходы к лечению начального гинекологического рака" (Новгород, 1994), на 28 ежегодном съезде Европейского обществе генетиков человека (Лондон, 1996), на Международной конференции "Спид, рак и сопутствующие проблемы" (Санкт-Петербург, 1996).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на /^страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методик исследования, результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. В диссертации приведены /^таблиц,рисунков и микрофотографий. Список использованной литературы содержит названий.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКИ

Изучение содержания ДНК и пролиферативной активности клеток методом проточном цнтометрии проведено и 405 образцах (табл.1).

Объект исследования Количество образцов Средний воз-

Плоскоклеточный рак ротовой полости 49 54.5 ±1,8

Нормальный эпителий ротовой полости 7 51,2±2,4

Аденокарцинома толстой кишки 47 60,2±1,6

ободочной кишки 27 62,9±1,4

прямой кишки 20 58,5±1,9

Эпителий ободочной кишки вне опухоли 27 62,9±1,4

Эпителий прямой кишки вне опухоли 20 58,5±1,9

Нормальный эпителий сигмовидной кишки 10 56,2+2,2

Нормальный эпителий прямой кишки 7 53,7+2,1

Инвазивный протоковый рак молочной железы 36 57,7+1,9

Нормальный эпителий молочной железы 8 54,8 ±2,9

Аденокарцинома эндометрия 89 59,2+1,0

Эндометрий вне опухоли 32 58,1 +1,3

Атипическая гиперплазия эндометрия 7 53,9 ±4,9

Гиперплазия эндометрия 15 51,9 ±2,4

Полипы эндометрия 6 57,7 ±4,7

Нормальный атрофичный эндометрий 6 58,6±3.5

Нормальный эндометрий 28 42,4 ±0,9

Примечание: кроме гого. исследовались редкие формы рака: по одному случаю слизистого и мелкоклеточного рака прямой кишки, а также 3 дольковых. 2 инутри-протоковых и по одному случаю медуллярного и слизистого рака молочной железы.

В контрольной фуппе женщин (оперированных по поводу заболеваний яичников и фибромиом матки), у которых при микроскопическом исследовании

не обнаружено опухолевых изменений эндометрия, в 9 случаях была пролифера-тивная, в 19 - секреторная фазы менструального цикла, у 6 женщин в менопаузе определялся атрофичный эндометрий.

fTf,„a,„ pulvd оценивали согласно критериям 4-ой Между-

народной классификации ВОЗ. Степень злокачественности рака молочной железы оценивали по H.J.G. Bloom и W.W. Richardson (1957) (табл.2).

Таблица 2. Степень дифференцировки новообразований различной локализации.

Степень дифференцировки высокая умеренная низкая

Плоскоклеточный рак ротовой полости Плоскоклеточный рак языка Аденокарцинома ободочной кишки Аденокарцинома прямой кишки Аденокарцинома эндометрия

Степень гистологической злокачественности низкая умеренная высокая

Инвазивный протоковый рак молочной железы

Разделение больных плоскоклеточным раком языка и дна полости рта на стадии заболевания проводилось в соответствии с Международной классификацией злокачественных опухолей по системе Т>М(1989).

Материал для исследования был получен главным образом от больных, проходящих обследование и лечение в НИИ онкологии им. проф. Н.Н.Петрова МЗ РФ, а также от пациентов Областного онкологического диспансера, Городских больниц N2 и 8 и Всероссийского Центра Экологической Медицины. За предоставление материала для исследования сотрудникам данных учреждений выражаем искреннюю благодарность.

Использовали свежий или замороженный операционный, биопсийиый и ау-топсийный материал. При возможности исследовали не только опухоль, по и образцы слизистой оболочки кишки и матки вне зоны опухолевого поражения. Взятый кусочек ткани делили на две части: одну использовали для нитометрического опреде-

ления содержания ДНК, из второй готовили i ис ^логические препараты для параллельного микроскопического исследования.

Механически дезагрегированный материал окрашивали бромистым >тилмем и оливомицином (Розанов Ю.М.. I9SS. Barlogie 1J. i-t.ai. 1976).

Исследование осуществляли па проточном питометре МД-116 (ГОИ им. С.И.Вавилова. Санкт-Петербург) со 128-канальным анализатором и ртутно-кварцевон лампой ДРШ-250-2 в качестве источника света.

В работе анализу подвергали только гс ДНК-гистограммы, на которых диплоидный пик имел коэффициент вариации не более 5,5 (Geisinger K..R. et al, 1986).

В результате обработки полученных гистограмм определяли плоидность клеток опухоли и долю питслня ротовой полости и молочной железы, кишечного нштелия и эндометрия клинически здоровых лиц, а также при гипсрпластичссхих изменениях в эндометрии <железистые и железисто-фиброзные полипы, простая и атипическая гиперплазия) анеуплоидия не выявлена. Частота анеуплоидии при июкачанпеннмх новообразованиях зависит от локализации опухолей (рис.1).

■ Инвазивный протокозый рак молочной железы

□ Плоскоклеточный рак дна

полости рта Я Плоскоклеточный ракязска □Аденокарцинома тела матки

Рис.1 Частота анеуплоидии среди раковых опухолей различного гистогенеза.

Большинство исследованных нами опухолей характеризовалось высокой частотой анеуплоидии. Так, при инвазивном протоковом раке наблюдалось 61,1% ане-уплоидных опухолей. В аденокарциномах прямой кишки частота анеуплоидии составила 60%, ободочной кишки - 51,9%, в плоскоклеточном раке дна полости рта - 45,5%. В то же время несбалансированное содержание ДНК в плоскоклеточном раке языка и, особенно, при аденокарциноме эндометрия наблюдалось гораздо реже: 29,6% и 23,6% соответственно.

Интересно, что в кишечнике частота анеуплоидии значительно выше в опухолях, локализующихся в левой части ободочной и в прямой кишках (60 и 59,1% соответственно), чем в правой половине ободочной и слепой кишках, где она наблюдалась лишь в 28,6% аденокарцином. Подобный факт обнаружили также О.Ьапга е1 а1 (1994) и А.С.Ьагаш (1994). Примечательно, что наблюдается четкая корреляция между частотой поражения отделов толстой кишки опухолями и частотой анеуплоидии при раках соответствующей локализации. Возможно, в обоих случаях действуют одинаковые патогенетические факторы.

газов, приводящих к неравномерном) распределению хромосом между делящимися клетками (асснмегрический и грехполюсный митозы, отставание хромосом н их фрагментов в ана- и телофазе. мосты!. При >том выраженную роль играют системы репарации и элиминации поврежденных клеток.

Согласно нашим данным, наивысшая пролиферативная активность наблюдается в опухолях и нормальном эпителии ободочной кишки и органов ротовой полости, наименьшая - в эпителии и новообразованиях тела матки (табл.3).

Таблица 3. Пролиферативная активность в нормальных эпителиях и в злокачественных новообразованиях.

Локализация рака Индекс пролиферации в норме, % Индекс пролиферации фонового эпителия, % Индекс пролиферации в раке, %

Дно полости рта 16,60±0,80'- - 24,40±6,531

Ободочная кишка 16,90± 1,803 4 17,60+3, ОО5 25,70+3,205-5-6

Прямая кишка IUO+1,004-7 15,10+2,71 16,60+2,00«"

3, 4, 5, 6, 8, 9 - р 1см) встречается в два раза чаще, чем с менее глубокой (35,7% против 16,2%, 0=0,43; р 1см) и низкой ( 2,5 лет 1,56±0,13 23,50±4,57

Язык 2.5 лет 29,4 1,6|+0,042 23.9011,73

I - р тог срок (табл.5). Частота анеуплоидии увеличивается с повышением степени гистологической злокачественности ин-вазивиого протокового рака молочной железы (табл.6), ухудшением

1 аилица Ь. Частота анеуплоидии. индекс ДНК и индекс пролиферации в инвазивном протоковом раке молочной железы при различной степени гистологической злокачественности.

Степень гистологической злокачественности Частота анеуплоидии, % Индекс ДНК Индекс пролиферации, %

Низкая 501 1,28 18,50+2,96

Умеренная 62,5 1,72±О,06 15,80±2,21

Высокая 70' 1,94±0,16 18,30±3,21

металась с неблагоприятным клиническим прогнозом. Возможно, сама по себе интенсивность пролиферации неопластичсских клеток не определяет биологического поведения опухоли, гак как скорость ппт мвисит не только от

„п„„„1,„«.„. ;:-. „..„„.и, „о н о| клеточной потери.

Сопоставление плоидности н пролифсративной активности с возрастом пациентов.

Читайте также: