Braf мутация при меланоме что это

Частота и виды мутаций в гене BRAF

Частота мутаций в гене BRAF при меланоме кожи, по данным разных исследователей, варьирует от 30-40% до 70%. Наиболее распространенной (69-94% случаев) разновидностью BRAF-мутаций является V600E – замена валина на глутамин в 600-м кодоне. Эта мутация представляется доминирующей, но далеко не единственной разновидностью нарушений BRAF [14, 15]. Второй по частоте является мутация V600К – ее частота может достигать 5-10%. Мутации V600D и V600R встречаются значительно реже.


Cтатус мутации гена BRAF и выбор тактики лечения

За последние годы достигнуты значительные успехи в изучении патогенетических основ развития меланомы и сделан огромный шаг к выявлению новых потенциальных молекулярных мишеней. Открытие молекулярной мишени BRAF и понимание ее роли в патогенезе меланомы легли в основу разработки нового класса препаратов – низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF. Использование этих препаратов позволяет блокировать патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и, таким образом, тормозить развитие опухоли. Следует особо отметить, что воздействие данной группы препаратов на опухолевые клетки с нормальной последовательностью BRAF, напротив, может сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Этот феномен свидетельствует об исключительной важности достоверной диагностики статуса гена BRAF.

BRAF ингибиторы не должны использоваться в тех случаях, когда статус мутации BRAF не определен или мутация не обнаружена!

Следует подчеркнуть, что ингибиторы BRAF и MEK зарегистрированы к применению только для терапии метастатической формы меланомы. В настоящее время отсутствуют данные по использованию ингибиторов BRAF и MEK в адъювантном режиме, поэтому они не могут быть рекомендованы пациентам, перенесшим (условно-)радикальное удаление первичной меланомы и метастических очагов.

В рандомизированных клинических исследованиях ингибиторы BRAF – вемурафениб и дабрафениб – продемонстрировали значительное преимущество по сравнению со стандартной химиотерапией в отношении частоты объективных ответов, продолжительности жизни без прогрессирования и общей продолжительности жизни у пациентов с метастатической меланомой и подтвержденной мутацией гена BRAF, ранее не получавших системного лечения (см. рис. 2). Полученные результаты привели к пересмотру международных клинических рекомендаций, которые включили эти препараты в современные стандарты лечения метастатической меланомы кожи с BRAF мутацией.

Результаты последних исследований показали, что двойное ингибирование сигнального пути MAРK, которое достигается при одновременном использовании ингибиторов BRAF и MEK, обладает более высокой эффективностью по сравнению с ингибитором BRAF в монорежиме. Важно отметить, что помимо более высокой эффективности комбинация препаратов снижает вероятность развития резистентности к проводимой терапии и отдельных нежелательных явлений, в том числе плоскоклеточного рака кожи. В рамках клинического исследования coBRIM было подтверждено, что комбинированная терапия с использованием препаратов вемурафениб и кобиметиниб в 90% случаев позволяет достичь ответа на терапию у больных BRAF+ метастатической меланомой. У каждого второго пациента более года отсутствовали признаки прогрессирования заболевания, а общая выживаемость приближалась к 2 годам (рис. 3).

Сходные результаты были продемонстрированы в исследованиях дабрафениба и траметиниба. В частности, исследование COMBI-V (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом) продемонстрировало значимой увеличение общей продолжительности жизни у пациентов, получавших комбинированную терапию, по сравнению с применением вемурафениба без ингибитора MEK (25.6 мес. vs 18 мес.; рис. 4, табл. 1). В клиническом испытании COMBI-D сравнивалась эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо. Примечательно, что в этом исследовании были зарегистрированы практические идентичные показатели общей продолжительности жизни (25.1 мес. vs 18.7 мес.; рис. 5, табл. 1).

Определение статуса гена BRAF является обязательным компонентом выработки тактики лечения всех пациентов с неоперабельной/метастатической меланомой кожи.


Рисунок 2. Результаты рандомизированного исследования BRIM-3: сравнение эффективности вемурафениба и дабрафениба в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.


Рисунок 3. Результаты рандомизированного исследования coBRIM: сравнение эффективности комбинации кобиметиниба+вемурафениба и вемурафениба+плацебо в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.


Рисунок 4. Результаты клинического исследования COMBI-V: (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом).


Рисунок 5. Результаты клинического испытания COMBI-D: эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо.

Сводные данные по всем исследованиям представлены в таблице 1.

Исследование COMBI-d COMBI-v
Препарат(ы) Д + T Д + пла Д + T В
Кол-во пациентов, n 211 212 352 352
Медиана ВБП, мес. 11,0 8,8 12,6 7,3
Медиана ОВ, мес. 25,1 18,7 25,6 18,0
Медиана ОВ, ЛДГ≤ВГН Нет анализа НД 21,5
Медиана ОВ, ЛДГ>ВГН 10,8 8,9

Сокращения: В – вемурафениб, К – кобиметиниб, Д – дабрафениб, Т- траметиниб, пла – плацебо, НД – не достигнута, ВГН – верхняя граница нормы.

На сегодняшний день все существующие BRAF и MEK ингибиторы зарегистрированы на территории Российской Федерации и, при соответствующем лекарственном обеспечении, с успехом могут быть использованы для терапии мМК. Профиль безопасности этих препаратов позволяет использовать их в амбулаторных условиях.

  1. Г.Ю. Харкевич. Вемурафениб в лечении метастазов меланомы в головной мозг. Онкология. Журнал им. П.А. Герцена, 6, 2014.
  2. Г.А. Франк et al, Первое Всероссийское молекулярно-эпидемиологическое исследование меланомы: результаты анализа мутаций в гене BRAF. Архив Патологии, 3, 2014.
  3. С.А. Проценко et al, Современные возможности персонализированной терапии метастатической меланомы кожи. Современная онкология №3, том 16, 2014.
  4. Larkin J et al. Update of progression-free survival and correlative biomarker analysis from coBRIM: Phase 3 study of cobimetinib plus vemurafenib in advanced-BRAFmutated melanoma; Poster presentation at ASCO 2015.
  5. Robert C, et al. Ann Oncol. 2015; 26 (suppl 6) [abstract 3301].
  6. Flaherty K, et al. J Clin Oncol. 2016; 34 (suppl; abstr 9502).
  7. Hauschild A, et al. Poster presented at ESMO 2014, Abstract 1092PD.
  8. Robert, C. LBA4 Oral presentation at ESMO 2015.
 Войти
в базу данных

Для того, чтобы отправить материал на диагностику, вы должны быть зарегистрированным пользователем. Если у вас уже есть логин и пароль, то повторная регистрация не требуется.

Если вы новый пользователь, пожалуйста, пройдите процедуру регистрации.


    3 минут на чтение


Ген BRAF участвует в делении клеток. В норме этот процесс также регулируют гормоны и факторы роста. Но в случае мутации такого гена происходит сбой, что провоцирует образование раковых клеток. В основном такие изменения характерны для меланомы. Но возможна и мутация в гене BRAF при других видах рака.

  1. Что такое мутация в гене BRAF
  2. Кому нужно сдать анализ на определение мутации
  3. Зачем нужно проводить анализ
  4. Подготовка
  5. Как берут
  6. Что может исказить результат
  7. Расшифровка результата

Что такое мутация в гене BRAF


    • Прочие методы диагностики

  • Ольга Владимировна Хазова
  • 4 декабря 2019 г.

В случае точечной мутации в гене BRAF, обладающего большей активностью среди всех белков, составляющих МАРК, нарушается передача сигналов по данному пути. Причины, вызывающие подобные изменения, пока не установлены. Из-за таких мутаций белок BRAF приобретает способность самостоятельно активировать сигнальный путь, вследствие чего клетки начинают бесконтрольно делиться.

Такая мутация характерна для следующих видов рака:

  • меланома;
  • папиллярный рак щитовидной железы;
  • немелкоклеточный рак легкого;
  • рак предстательной железы;
  • колоректальный рак.

Открытие BRAF-мутации позволило найти новые препараты для лечения раковых опухолей. Эти лекарства блокируют передачу импульсов по сигнальным путям, за счет чего приостанавливается развитие злокачественного новообразования.

Кому нужно сдать анализ на определение мутации

Анализ BRAF-мутации назначается на третьей и четвертой стадиях развития указанных видов рака. Также это исследование рекомендуют проводить в случаях, когда выявляются злокачественные новообразования на начальных этапах при условии, что опухоль растет быстро.

Зачем нужно проводить анализ

Анализ на BRAF-мутацию при меланоме или других формах злокачественных опухолей проводится для того, чтобы установить истинную причину перерождения клеток. Такое исследование помогает подобрать таргетную терапию, которая воздействует непосредственно на злокачественную опухоль, приостанавливая развитие последней. Этот подход снижает вероятность возникновение сопутствующих заболеваний, появление которых обусловлено приемом лекарственных препаратов.

Также анализ на мутацию необходим потому, что неправильно подобранное лечение способно ускорить развитие опухолевого процесса и сократить продолжительность жизни пациента.

Подготовка

Специальной подготовки к анализу на BRAF-мутацию не требуется. Объясняется это тем, что для исследования проводится забор тканей непосредственно из злокачественной опухоли.

Как берут

Для определения мутаций при меланоме потребуется материал, состоящий не менее чем на 20% из перерожденных клеток. Обычно такой биоптат получают в ходе удаления злокачественной опухоли, которую сразу после операции отправляют в лабораторию.

Забранный материал помещается в формалин, а затем — в парафиновые блоки. Перед началом исследования из биоптата делается забор небольшого количества тканей для экстракции ДНК. После этого приступают к анализу материала.

Исследование на BRAF-мутацию проводится с помощью аллель-специфической полимеразно цепной реакции (ПЦР) либо секвентирования ДНК. Для каждой из указанных процедур потребуется небольшой кусок ткани, взятой из зоны поражения.

Рак кожи, более известный как меланома, являющаяся злокачественным новообразованием, протекает крайне быстро. При меланоме довольно часто возникают рецидивы, а метастазы проникают практически во все органы. Чтобы препятствовать скоротечному развитию данного заболевания просто необходимо раннее диагностирование, профессиональная и своевременная терапия в медицинских учреждениях, которые специализируются на лечении онкологии.

Меланома довольно часто мутирует. И поэтому в нашем лечебном учреждении в практику обязательного обследования входит и анализ на различные мутации меланомы. Определить наличие подобных мутаций и, непосредственно, их видов крайне важно. Во-первых, данный анализ позволяет оценить механизм развития злокачественных процессов в клетке. А, во-вторых, благодаря анализу подбираются те препараты, которые будут оказывать наиболее эффективное действие при лечении меланомы с определённым видом мутации. Происходит, так называемая, таргентная терапия.

Наиболее часто встречающихся мутаций меланомы три:

  • BRAF;
  • c-Kit;
  • NRAS;

Мутация BRAF

Этот вид мутации меланомы встречается чаще всего. Его выявляют примерно у 40-70% больных меланомой. Мутация BRAF имеет такое название в связи с тем, что именно ген BRAF, являющийся ответственным за один из сигнальных путей в клетках, когда происходит мутация, вырабатывает особый белок. Именно этот белок выступает своеобразным провокатором, из-за которого начинается рост клеток и появление новообразований. Необходимо сказать, что в нормальном состоянии путь, за который отвечает ген BRAF, является неактивным. Мутация BRAF, таким образом, выявленная в меланоме, имеет название – BRAF-позитивная. Выявить мутацию очень важно, так как она может положительно повлиять на прогноз лечения меланомы. Для BRAF-позитивной мутации разработаны особые препараты. Они выступают в качестве блокираторов мутирующего гена. Шансы на благоприятный исход очень сильно зависят от ранней диагностики и точности определения степени мутации.

Мутация c-Kit

Этот вид мутации встречается не так часто, как мутация BRAF. Его выявляют у 6-15% больных. Kit-мутации, как правило, выявляются в меланомах, которые находятся на слизистых половых органов, прямой кишки, носоглотки и носовых ходов. Выявляется мутация c-Kit и в меланомах, которые расположены на ногтях и ладонях. Кстати, меланома c-Kit может проявляться в сочетании с мутацией BRAF. При выявлении данного вида мутации назначают для лечения препараты-ингибиторы c-Kit. В 30% случаев терапия имеет положительный эффект.

Мутация NRAS

Данный вид мутации выявляется в 15-20% случаев. Данный вид мутации может выступать в сочетании с другими видами мутаций крайне редко. Также как и в случае с геном BRAF, NRAS вырабатывает белок, который является активатором злокачественного роста клетки. Самое главное, что стоит предпринять при выявлении данного вида мутации, это заняться блокировкой вырабатывания протеин-киназы. Препараты, которые следует применять при лечении мутации NRAS, всё ещё проходят клинические исследования. Однако даже на этой стадии положительный результат обнаруживается у 20% больных, которые подвергаются терапии данными препаратами. Выявлено, что процесс развития опухоли при лечении замедляется.

Наша клиника предлагает пациентам:

  • Различные методы раннего диагностирования болезни. Мы также проводим и диагностические операции. У нас есть всё необходимое оборудование и лучшие препараты.
  • Операбельное лечение, с использованием самых новых и щадящих методов.
  • Иммунотерапию.
  • Таргентную терапию, с применением самых современных лекарств.
  • Наблюдение у узкоспециализированных врачей – дерматоонкологов, которые имеют большой опыт именно в лечении рака кожи (меланомы).
  • Лечение больных даже на самых поздних стадиях заболевания.


В норме ген BRAF вместе с факторами роста и гормонами участвует в регуляции деления клеток за счет активации специфического сигнального пути. Если же его структура изменяется, то процесс деления выходит из-под контроля. Мутации в гене BRAF выявляются при различных видах рака, однако на первом месте в списке онкологических заболеваний стоит меланома. Определить статус гена при данной болезни крайне важно, так как от этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения.

Частота и виды мутаций BRAF

Методы диагностики

Выявить мутации BRAF можно при помощи молекулярно-генетических методов диагностики. Для проведения исследования необходим образец тканей меланомы кожи, в которых содержится не менее 20% опухолевых клеток. Как правило, такой материал поступает в лабораторию после удаления, после чего он фиксируется в формалине и заключается в парафиновые блоки. Перед определением мутаций необходимо выполнить пробоподготовку. Материал извлекается из парафина, затем выполняется процесс экстракции ДНК, которая исследуется.

Базовым методом, который позволяет выявить мутации в гене BRAF, является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Это исследование является относительно простым и дешевым, обладает хорошей чувствительностью и специфичностью, однако имеет существенный недостаток. Один анализ позволяет определить только одну мутацию BRAF. Если же стоит задача выявить несколько мутаций, то исследование придется повторять.

Более совершенным считается секвенирование, при помощи которого можно установить точную последовательность ДНК целого гена. Данный метод более затратный и требует дорогостоящего оборудования, но при этом он позволяет одновременно выявить все мутации в гене BRAF за одно исследование. Среди недостатков секвенирования можно отметить риск получить ложноотрицательный результат (выявляется в 2%-10% случаев) из-за присутствия в материале большого количества нормальных клеток с неизмененной ДНК.

Зачем определять BRAF мутацию при меланоме

Определение мутации в гене BRAF имеет важное значение при подборе лечения меланомы. Одним из современных методов является таргетная терапия, которая направлена на устранение конкретного механизма образования опухолевых клеток. В случае с меланомой применяются ингибиторы мутированного фрагмента гена BRAF, которые прерывают цепочку биохимических реакций и не дают опухоли развиваться дальше. При назначении таких препаратов определение статуса гена BRAF должно проводиться в обязательном порядке. При отсутствии мутации дорогостоящее лечение окажется неэффективным, а в некоторых случаях может и ускорить прогрессирование опухолевого процесса.

Препараты из группы ингибиторов BRAF могут применяться только при лечении метастатической меланомы. При этом не изучена эффективность лечения в адъювантном режиме, поэтому такие препараты не назначают пациентам, у которых выполнялось хирургическое удаление опухоли или метастазов, а также химио- и лучевая терапия.

Первыми зарегистрированными препаратами из группы ингибиторов BRAF, которые начали применяться при лечении метастатической и неоперабельной меланомы, стали вемурафениб и дабрафениб. При проведении клинических испытаний, они показали очень хорошие результаты. В настоящее время применяется комбинированное лечение меланомы, при котором, кроме ингибиторов BRAF назначаются ингибиторы МЕК. Такое сочетание позволяет максимально замедлить прогрессирование заболевания и увеличить продолжительность жизни пациентов.

Несмотря на большие успехи в лечении меланомы, все еще остаются нерешенными несколько проблем. Во-первых, отсутствуют эффективные методы терапии, которые можно применять при отсутствии мутаций в гене BRAF. Во-вторых, при назначении ингибиторов BRAF у пациентов спустя некоторое время развивается устойчивость к такому лечению, и меланома начинает снова прогрессировать.

Выявление различий в мутации гена BRAF с помощью молекулярно-генетических тестов позволяет определить эффективность лечения меланомы. В ходе нового исследования выяснилось, что существуют различия между генотипами мутации меланомы BRAF — V600K и V600E, которые ведут к разным ответам на таргетную терапию и иммунотерапию.

Таргетная терапия при BRAF мутации меланомы V600

Пациенты, которые имеют мутацию меланомы BRAF V600K, меньше поддаются лечению таргетной терапией или ингибиторами BRAF / MEK. В тоже время мутация BRAF V600E позволяет достаточно эффективно лечить меланому в таком случае.

В первой части приняло участие 93 пациента с прогрессирующей меланомой. Пациентам с разными мутациями BRAF проводилось таргетное лечение ингибиторами BRAF / MEK наряду с оценкой уровня эффективности лечения.

Генотипы BRAF — V600K и V600E имеют уникальный молекулярный профиль:

BRAF V600K имеет пониженную экспрессию сигнального пути ERK, большую экспрессию генов P13AKT и значительно большую мутационную нагрузку (количественный показатель, характеризующим число мутаций в 1 мегабазе кодирующего генома опухолевых клеток). Таким образом, он меньшую восприимчивость к подавлению BRAF/MEK.

BRAF V600E обладает более обширной активацией сигнального пути ERK, а также вызывает хороший ответ на подавление BRAF/MEK.

Было отмечено, что при лечении комбинированной терапией с подавлением BRAF / MEK, большинство пациентов в группе с мутацией гена V600K имеют по отношению к группе с V600E:

  • низкую частоту ответа на лечение – 31% и 52%
  • низкий уровень полного ответа – 0% и 10%.

Пациенты имели следующие показатели выживаемости в подгруппах:

  • V600K – медиана выживаемости – 5,7мес ;
  • V600E – медиана выживаемости – 7,1мес, при этом около 20% оставались без признаков прогрессирования меланомы через пять лет.

Несмотря на эти численные различия в показателях ответа и выживаемости без прогрессирования, общая выживаемость была одинаковой в обеих группах. Эта часть исследования подтвердила результаты предыдущего исследования, и показывает, что меланома с мутацией V600K имеет более низкий показатель ответа и более короткую выживаемость при лечении таргетной терапией ингибиторами BRAF / MEK.

Иммунотерапия при BRAF мутации меланомы V600

На втором этапе исследования было включено 103 пациента с меланомой, которым проводилась иммунотерапия препаратами пембролизумаб или ниволумаб.

Из этих пациентов исследователи провели неродственную выборку с мутацией меланомы BRAF:

  • V600E — 84 пациента;
  • V600K – 19 пациентов.

Ответ на иммунотерапию на основе генотипа BRAF коррелировал с клиническими ожиданиями. После медианного периода наблюдения в 31,7 месяца исследователи выявили тенденцию более высокого уровня ответа на иммунотерапию у пациентов с мутациями V600K по сравнению V600E — 53% против 29%. Кроме того, выживаемость без прогрессирования была более длительной у пациентов с подтипом мутации BRAF V600K — 19 против 2,7 месяцев. Тем не менее, общая выживаемость существенно не отличалась — 20,4 против 11,7 месяцев.

Выводы второй части исследования показали, что при мутации меланомы BRAF V600K лучшие результаты показывает иммунотерапия.

Источник: EMED, Израиль


  • ♦ Сотрудничество с всемирно известными врачами Израиля и крупными клиниками.
  • ♦ Доступ к прогрессивным медицинским технологиям.
  • ♦ Быстрая качественная организация консультаций, диагностики и лечения, в плановом и срочном порядке.
  • ♦ Сопровождение и перевод.

Почему ошибки в определении мутаций меланомы недопустимы

Белоруссия. Наши дни.

(даты я упускаю. не в них суть)

Здравствуй,подскажите пожалуйста, при метастазах в головной мозг Зельбораф действует или как пишут нет, только по телу.

Спасибо вам большое информация очень для меня полезная. К сожалению у нас разрешён только Зельбораф. Надо решать как поступить что было бы лучше в моей ситуации, если из своего опыта можете что нибудь посоветовать буду вам признателен , ещё раз спасибо

Я могу только сказать, что Тафинлар+Мекинист лучше и действенней чем Зелбораф в моно режиме. Если эта комбинация совсем никак, то хотя бы попытайтесь к Зелборафу добавить Котеллик

Добрый день. Два месяца принимали Тафинлар и Мекинист ответ хороший уходит по 1 см в месяц . Покупали за свои. Теперь дали бесплатно Зельбораф моно. Да ещё гама ножом удаляли 3 метастаза в голове. Через месяц МРТ

Естественно, идеальным вариантом было бы продолжение терапии Т+М, раз такой хороший ответ имеется, т.к. никто вам не скажет что будет при переходе на Зелбораф (это не значит что нельзя, МОЖНО, но это значит что действующие вещества все таки разные и ответ может быть разным)
т.е. , точных ответов и конкретного совета у меня нет, к сожалению

Прием идет и уже есть как минимум 1 человек в эти КИ попавший (из Латвии)

+ Эти КИ помимо Брюсселя начинаются и в России

через пару месяцев…

Добрый день! Помогите пожалуйста советом , у нас мутация как теперь выяснилось

BRAF к601е

наши врачи назначили Зельбораф и Котеллик , уже месяц принимаем, по всему стало хуже. рост подкожных метастаз. КТ скорей всего подтвердит.По этой мутации почти ни чего не могу найти, Зельбораф вроде при ней не помогает, мекинист помогает. может у Вас что нибудь есть по этой мутации и какие лекарства на неё действуют.

Доброе утро!
На эту мутацию может подействовать только МЕК ингибитор (Котеллик/Мекинист), да и то …. там какой-то процент небольшой.
Игорь, ну тут только иммунотерапия остается.
А вообще, получается что Мекинист все таки помогал. Блин, а как так получилось что с мутацией так напортачили?

Добрый день. да в начале очень всё хорошо было, всё уходило на третьем месяце остановилось и даже один узел вырос немного , а вот с Зельбораф. и Котеллик. стало расти. наши врачи даже и не увидели разницу браф ну и мы сами на них понадеялись. Значит только иммунка при этой мутации? Или опять мекинист с тафинларом ? А если это МЕК то может один Мекинист? Да дилемма.

Если есть возможность снова начать Мекинист, то можно его. Тафинлар не нужен
Ну а лучше всего, конечно, иммунка.

Теперь выводы (один): квалификация патолога, в наше время, выходит чуть ли не на первый план. И это, как выясняется, касается не только первичной опухоли, а и определения мутаций, которых с каждым годом открывают все больше и больше. Ну а к чему приводит кривоглазость, я вам продемонстрировал.

*** Касательно действия МЕК ингибиторов. Мне сейчас просто некогда (да и лень) искать.
**** На картинках указан Тафиналар, но при замене его Зелборафом ничего не изменится.

Ну и вот. Свеженькое с приветом из Армении:

Товарищи гистологи/патологи, так работать нельзя.

Молекулярно-генетическое исследование биоптата опухолевой ткани для определения специфической мутации, которая играет роль в злокачественной трансформации клеток.

Генные мутации при меланоме, белок сигнального пути.

BRAF Mutation Testing, BRAF Gene Mutation Test, BRAF Gene Mutation Analysis.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат опухолевой ткани в емкости с фиксирующим раствором или парафиновый блок с биоптатом ткани опухоли. Может использоваться как образец первичной опухоли, так и полученный из метастатического очага.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Современные успехи в лечении онкологических заболеваний во многом связаны с обнаружением молекулярных механизмов возникновения и развития злокачественных новообразований, отличающих их от клеток нормальных тканей, и появлением лекарственных препаратов, способных воздействовать на них. Такие лекарства называются таргетными, то есть действующими на определенную "цель" в опухолевой клетке. Они обладают хорошим профилем безопасности, так как, в отличие от стандартной химиотерапии, практически не действуют на нормальные ткани и характеризуются большей эффективностью. Однако назначение таргетных препаратов возможно лишь при обнаружении в опухолевых клетках специфической мишени для их действия. Кроме того, обнаружение в опухолевых клетках определенных генетических аномалий может использоваться как прогностический фактор.

Сравнительно часто патологическим механизмом злокачественной трансформации клеток является нарушение в так называемых сигнальных путях. Сигнальный путь представляет собой цепь, по которой активирующий сигнал от рецептора, располагающегося на поверхности клетки, через несколько внутриклеточных белков передается в ядро. Одним из таких сигнальных путей является МАРК (Mitogen-activated proteinkinase). Внеклеточные сигналы (факторы роста, гормоны), связываясь с рецептором, активируют путь МАРК, что в свою очередь приводит к активации в клеточном ядре генов, ответственных за пролиферацию. Каскад сигнального пути МАРК включает в себя белки четырех семейств: RAS, RAF, MEK и ERK. Семейство RAF представлено тремя белками - ARAF, BRAF и CRAF, - наибольшей активностью из них обладает BRAF. В норме сигнальный путь активируется только через связывание рецептора со специфической молекулой. Однако при возникновении точечных мутаций в генах, кодирующих сигнальные белки, они могут приобретать новые свойства. Так, при определенных мутациях гена BRAF этот белок становится способным активировать сигнальный путь независимо от рецептора и запускать процесс неконтролируемого клеточного деления.

Мутации гена BRAF характерны для меланом кожи (по разным данным, от 30 до 70%), колоректального рака, немелкоклеточного рака легкого (около 3%), а также для папиллярного рака щитовидной железы. Наиболее часто выявляется мутация гена BRAF V600E, вторая по частоте V600K, значительно реже встречаются V600D и V600R. Буквы в обозначении данных мутаций означают замену нормальной аминокислоты (валина) в шестисотом положении белка на другую. После открытия роли мутаций гена BRAF в патогенезе опухолей, в том числе меланомы, были разработаны новые препараты – низкомолекулярные ингибиторы мутированного фермента BRAF. Эли лекарственные средства блокируют патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и тормозят развитие опухоли. К BRAF-ингибиторам относятся вемурафениб (зелбораф) и дабрафениб.

Материалом для исследования служит ДНК опухолевых клеток. Она может быть выделена из биоптата опухоли, находящегося в парафиновом блоке. Если же на исследование предоставлен образец опухоли в емкости с фиксирующим раствором, из него изготавливаются парафиновые блоки для возможности длительного хранения и использования в последующем для других диагностических тестов.

Для чего используется исследование?

  • Для определения показаний к назначению низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF.

Когда назначается исследование?

  • Пациентам с неоперабельной или метастатической меланомой (стадии IIIC – IV), а также распространенным немелкоклеточным раком легкого при отсутствии мутации гена EGFR.

Что означают результаты?

Положительный результат - мутация обнаружена. Также указывается вид выявленной мутации.

Отрицательный результат – мутации не обнаружены.

Что может влиять на результат?

Нарушение техники фиксации биопсийного материала, которое может привести к деградации генетического материала и невозможности тестирования.

  • Воздействие BRAF-ингибиторов на опухолевые клетки с отсутствием мутаций в гене данного белка может, наоборот, сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Поэтому исключительно важно проводить диагностику мутационного статуса BRAF. BRAF-ингибиторы не должны назначаться в тех случаях, когда мутация не обнаружена или ее статус достоверно неизвестен.

Цитологическое исследование материала, полученного при оперативном вмешательстве

Цитологическое исследование материала, полученного при эндоскопии (бронхоскопия)

Гистологическое исследование биопсийного материала

Гистологическое исследование доброкачественных образований кожи (папилломы, невусы и др.)

Гистологическое исследование биоптата лимфатического узла (1 узел) с использованием рутинных методик окраски

Определение перестройки гена ALK при раке легкого методом ИГХ

Кто назначает исследование?

Литература

Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1512-1513.

The Basic science of Oncology. Fifth edition. Ian F. Tannock, Robert G. Bristow, Richard P. Hill, Lea Harrington. McGrow-Hill Education, 2013. Pages 173-179.

Доклад "Современные возможности таргетной терапии НМРЛ", Имянитов Е. Н. Вестник московского онкологического общества, №11 (602), 2013. С. 3-6.

Читайте также: