Набор для выявления антител к вирусу лейкоза

Название (рус.) НАБОР ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (ВЛКРС) МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА (ИФА) Состав и форма выпуска Включает следующие компоненты: две полистироловые 96-луночные микропанели с адсорбированным в лунках специфическим антигеном gp 51 ВЛКРС; положительные контроли: флакон № 1: специфическая сыворотка крови, содержащая антитела к gp 51ВЛКРС - прозрачная жидкость соломенно-желтого цвета,0,1 мл - 1 флакон; флакон № 3: молоко, содержащее антитела к gp 51 ВЛКРС - жидкость белого цвета, 1 - 2,5 мл - 1 флакон; отрицательные контролия: флакон № 2: нормальная сыворотка крови - прозрачная жидкость соломенно-желтого цвета, 1 - 2,5 мл - 1 флакон; флакон № 4: молоко, не содержащее антитела к gp 51 ВЛКРС - жидкость белого цвета, 2,5 мл - 1 флакон; флакон № 5: промывочный буфер (ФСБТ, фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,05 % твина) - концентрированный 20 раствор - бесцветная прозрачная жидкость, 25 мл - 3 флакона; или таблетка, рассчитанная на 500 мл буфера - 4 шт; флакон № 6: буфер для разведения образцов (БР) - бесцветная прозрачная жидкость, 20 мл - 1 флакон; флакон № 7: конъюгат (моноклональные антитела к IgG крупного рогатого скота, меченые пероксидазой), лиофильно высушенный - 2 флакона, каждый из которых содержит таблетку белого цвета; флакон № 8: субстрат - раствор тетраметилбензилина (ТМБ), содержащий перекись водорода, бесцветная прозрачная жидкость, 20 мл - 1 флакон; флакон № 9: стоп-раствор, раствор для остановки реакции - бесцветная прозрачная жидкость, содержащая H2SO4, 10 мл - 1 флакон. Фармакологические свойства Антиген gp 51 ВЛКРС, иммобилизованный на поверхности лунок полистироловой микропанели с помощью специфических моноклональных антител, связывается с антителами, присутствующими в исследуемом материале, формируя при этом комплекс антиген-антитело. Полученный иммунный комплекс выявляется после взаимодействия с антивидовым конъюгатом (моноклональные антителам к IgG крупного рогатого скота, меченые пероксидазой), фермент которого после добавления субстрата, вызывает разложение субстрат-индикаторного раствора и образование окрашенного продукта. При этом интенсивность окраски в лунке микропанели пропорциональна ВЛКРС-специфических антител в исследуемой пробе. Показания Для выявления антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) в сыворотке крови и в молоке крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа (ИФА). Дозы и способ применения Для исследования в лабораторию доставляют из хозяйств индивидуальные сыворотки крови крупного рогатого скота или пробы молока объемом 0,3 - 0,3 мл. Сыворотки можно хранить при температуре 4 °C не более 3 суток или при температуре минус 20 °C в течение 50 - 50 суток. Перед проведением ИФА молоко центрифугируют в течение 15 минут при 2000 - 3000 об/мин для удаления липидов. Для постановки ИФА необходимы одно- и многоканальные автоматические микропипетки разных объемов со сменными наконечниками, мерная лабораторная посуда, дистиллированная вода, спектрофотометр (ридер) с фильтром на 450 нм. Перед началом работы микропанели и все компоненты набора выдерживают 20 - 30 минут при комнатной температуре. Неиспользованные реагенты убирают в холодильник (2 - 8 °C) сразу же после проведения исследования. Приготовление рабочих растворов реагентов. ФСБТ. Концентрированный раствор буфера (флакон № 5) разводят в 20 раз дистиллированной водой и тщательно перешивают. Для этого содержимое одного флакона концентрата (25 мл) переносят в мерную колбу и добавляют в нее 475 мл воды. Если в концентрате присутствуют кристаллы, то его перед разведением нагревают и тщательно взбалтывают. Конъюгат. Во флакон № 7 осторожно добавляют 10,5 мл ФСБТ, выдерживают 1 минуту и тщательно перемешивают, сильно не взбалтывая. Готовят непосредственно перед использованием. Все остальные компоненты набора готовы к употреблению. Постановка реакции. Во все используемые лунки микропанели вносят по 100 мкл БР (флакон № 6), затем эти лунки вносят контрольные и испытуемые пробы, используя для каждого образца новый наконечник. а) Для исследования сывороток крови крупного рогатого скота берут по 4 мкл положительной, отрицательной и испытуемых сывороток и вносят их в соответствующие лунки микропанели; б) для исследования молока крупного рогатого скота по 100 мкл положительной, отрицательной и испытуемых проб молока и вносят их в соответствующие лунки микропанели. После внесения проб содержимое лунок тщательно перемешивают, микропанель помещают в пластиковый пакет или накрывают крышкой и инкубируют 1 ч при 37 °C или 4 ч при комнатной температуре. После инкубации лунки освобождают от содержимого резким встряхиванием и трижды промывают ФСБТ, каждый раз полностью заполняя лунки буфером и вытряхивая содержимое. Затем микропанель подсушивают постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге. Во все используемые лунки микропанели вносят по 100 мкл раствора конъюгата, микропанель помещают в пластиковый пакет или накрывают крышкой и выдерживают 1 ч при 37 °C. После инкубации проводят процедуру промывания лунок. Во все используемые лунки микропанели вносят по 100 мкл раствора субстрата (флакон № 8) и выдерживают 10 минут при комнатной температуре. Реакцию останавливают добавлением в каждую используемую лунку по 50 мкл стоп-раствора (флакон № 9). Визуальный учет. Реакция в лунках должна быть следующей: лунки с внесенным положительным контролем должны иметь сине-голубое окрашивание до остановки реакции (желтое после остановки реакции); лунки с внесенным отрицательным контролем должны оставаться бесцветными (до и после остановки реакции); лунки с исследуемыми образцами, в которых присутствуют специфические антитела, должны иметь сине-голубое окрашивание до остановки реакции (желтое после остановки реакции) различной интенсивности в зависимости от уровня антител. Реакцию считают положительной, когда заметна четкая разница в интенсивности окрашивания лунок с исследуемыми образцами и лунок с отрицательным контролем. Инструментальный учет. Для проведения инструментального учета сразу же после остановки реакции проводят измерение оптической плотности (О.П.) продукта в каждой лунке на спектрофотометре (ридере) с вертикальным лучом света при длине волны 450 нм. Далее проводят оценку результатов ИФА. На первом этапе проводят оценку О.П. отрицательного и положительного контроля, входящих в состав набора. Результаты реакции считаются достоверными и могут быть учтены, если контрольные показатели соответствуют следующим критериям: О.П. отрицательного контроля 1. Если полученные значения не соответствуют вышеуказанным критериям, результаты ИФА считаются недостоверными и реакцию повторяют. Если О.П. отрицательного и положительного контролей соответствуют вышеуказанным критериям, то далее проводят оценку результатов реакции в лунках с испытуемыми пробами. Относительное содержание антител к ВЛКРС в исследуемых образцах, выраженное в международных ИФА единицах (EU), определяют по отношению значения О.П. испытуемой пробы к значению О.П. положительного контроля по формуле:
EU = (О.П. испытуемой пробы) / (О.П. положительного контроля) x 100
Интерпретацию результатов ИФА проводят с использованием прилагаемой таблицы:

Исследуемый материалЗначение EUИнтерпретация результатов
Сыворотка крови менее 15отрицательная реакция
≥15положительная реакция
Молоко менее 10отрицательная реакция
≥10положительная реакция

Пример расчета содержания антител к ВЛКРС в испытуемых образцах: Контрольные показатели О.П. 450 нм: отрицательного контроля - 0,080; положительного контроля - 2,306. Все показатели соответствуют требуемым критериям. О.П. 450 нм испытуемых сывороток: № 1 - 2,200 и № 2 - 0,090.
EU(1) = 2,200 / 2,306 x 100 = 95,4
EU(2) = 0,090 / 2,306 x 100 = 3,9
Таким образом, в исследуемой пробе сыворотки крови № 1 установлен высокий уровень антител к ВЛКРС (положительная реакция), в сыворотке крови № 2 специфических антител нет, что является отрицательным результатом ИФА. При получении сомнительного результата (например, значение EU в сыворотке крови равно 14 или 16) рекомендуется повторить реакцию и провести исследование пробы в двух параллельных лунках. Следует помнить, что ИФА является высокочувствительным методом, поэтому ошибки, связанные с внесением образцов, проведением инкубационного, температурного и промывочного режимов могут быть причиной получения недостоверных результатов. Особые указания Флаконы без этикеток, с нарушением целостности, изменением консистенции или цвета подлежат выбраковке. Работу с химическими компонентами набора следует проводить с соблюдением правил техники безопасности. При попадании их на кожу или слизистую оболочки рекомендуется промывать пораженное место большим количеством водопроводной воды. Использованные микропанели обеззараживают раствором хлорамина или другими сильным окислителями. Запрещается прием пищи и воды, курение в помещении, где проводятся работы с компонентами набора. Условия хранения В сухом, темном месте при температуре от 2 до 8 °C. Срок годности - 12 месяцев. Не допускается замораживание компонентов. Производитель НАРВАК НПО ЗАО, Россия

Адрес: 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 16.
Тел./факс: (495) 916-10-67, 916-17-05, 916-11-59,
190-75-61, 190-28-72, 190-30-54, 787-69-32, 787-69-33

Продавец Место Вашей рекламы

По вопросам размещения информации

о ветеринарных препаратах и кормовых добавках

Срок исполнения

Исследуемый материал

Метод определения

Вирус иммунодефицита кошек (FIV)

Вирус иммунодефицита кошек (Feline Immunodeficiency Virus, FIV) — это оболочечный вирус, принадлежащий роду Lentivirus семейства Retroviridae. Вирус поражает домашних и диких кошек повсеместно. Как и вирус иммунодефицита человека, FIV вызывает хроническую персистирующую инфекцию, которая у некоторых кошек становится причиной иммунодефицита.

FIV, как и другие ретровирусы, неустойчив к действию факторов внешней среды (выживает вне организма хозяина в течение нескольких минут) и быстро инактивируется дезинфектантами. FIV в. высокой концентрации содержится в слюне, основным путем передачи инфекции являются укусы больных животных. Имеются сведения о трансплацентарной передаче, передаче при родах, а также с молоком. В экспериментальных условиях эти пути передачи не являются значимыми в случае спонтанной инфекции, а у котят, инфицированных таким образом, может не происходить развития болезни. Данных о передаче инфекции половым путем нет, но FIV обнаруживается в сперме. Возможна передача вируса при переливании крови от инфицированного животного.

Средний возраст животных, в котором чаще всего диагностируется инфекция, составляет от шести до восьми лет (от 80 до 90% кошек). Коты бывают серопозитивными в 4,7 раза чаще, чем кошки. Содержание животных в помещении является фактором, снижающим вероятность передачи, но не исключает ее полностью.

Основной мишенью для FIV являются CD4+ . Однако вирус также поражает CD8+ , , макрофаги, дендритные клетки, клетки микроглии и астроциты. Влияние вируса на иммунную систему комплексное, до конца не изучено и включает как иммуносупрессию, так и активацию иммунитета.

Существуют три фазы болезни: острая (первичная), субклиническая и терминальная, хотя у спонтанно инфицированных кошек могут наблюдаться не все фазы. После инокуляции происходит репликация вируса в лимфоидной ткани. Через две недели после инфицирования отмечается виремия с высокой концентрацией вируса. Пиковые значения фиксируются через 8–12 недель после инфицирования. При этом наблюдается снижение концентрации CD4+ и CD8+ в периферической крови. Для некоторых кошек в острой фазе болезни характерны летаргия, лихорадка, анорексия, диарея, стоматит и/или лимфаденопатия.

В субклинической фазе болезни происходит восстановление уровня CD4+ , а концентрация вируса в плазме крови снижается до очень низкого уровня. Субклиническая инфекция у кошек может сохраняться в течение нескольких лет и даже на протяжении всей жизни. Эта фаза болезни не аналогична латентной инфекции, поскольку размножение вируса происходит в незначительном объеме. Наблюдается снижение показателя соотношения CD4+ : CD8+ ; у некоторых кошек отмечается гиперглобулинемия, вызванная гиперактивацией . Скорость прогрессирования субклинической фазы определяется такими факторами, как штамм вируса, наличие коинфекций другими патогенами, функциональным состоянием иммунной системы хозяина. У некоторых животных данные изменения в итоге приводят к развитию терминальной фазы заболевания, которая характеризуется клиническими симптомами оппортунистических инфекций, неоплазией, миелосупрессией и неврологическими симптомами. Эта фаза болезни чаще всего диагностируется у спонтанно инфицированных кошек. Однако у многих инфицированных животных никогда не происходит развития клинических симптомов даже при низком уровне CD4+ . Терминальная фаза инфекции FIV обычно сопровождается умеренным или тяжелым периодонтитом, лимфоплазмоцитарным стоматитом, гингивитом или одонтокластическими резорбтивными поражениями, которые могут быть вызваны опортунистическими бактериальными или вирусными инфекциями.

У многих кошек инфекция FIV диагностируется при проведении скрининга. Скрининг осуществляется с использованием методов, позволяющих обнаружить антитела к FIV, ввиду их доступности, чувствительности и быстроте проведения анализа.

При получении положительных результатов роль FIV в. развитии тех или иных симптомов может быть неочевидной. Однако вирус может быть причиной лимфомы, тяжелого стоматита, инфекций, вызванных другими патогенами (например, микоплазмами).

Для диагностики FIV доступны серологические методы исследования, направленные на обнаружение антител к вирусу иммунодефицита (иммунохроматографический анализ ‒ ИХА, ImmunoSorbent Assay ‒ ELISA). Также используется и метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для выявления заболеваний кошкам рекомендуется проводить дополнительные обследования (общий и биохимический анализ крови, анализ мочи и фекалий, тестирование на FeLV, ПЦР для исключения гемотропных микоплазм).

Для диагностики инфекции FIV был разработан ряд ПЦР (в реальном времени с обратной транскрипцией), с помощью которых обнаруживаются вирусная РНК, провирусная ДНК или РНК и провирусная ДНК в образцах периферической крови. Наиболее широкое применение нашла ПЦР, выявляющая провирусную ДНК в режиме реального времени. В сравнении с серологическими методами исследования чувствительность ПЦР может быть ниже (

НАБОР ДЛЯ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

СОСТАВ

Каждый набор содержит: - антиген вируса лейкоза; - разбавитель антигена вируса лейкоза; - специфическую преципитирующую сыворотку; - солевую смесь агара; - разбавитель солевой смеси агара.

НАЗНАЧЕНИЕ

Применяют для исследования сывороток крови в реакции иммунодиффузии в геле агара с целью выявления антител против гликопротеидного антигена вируса лейкоза.

ПРИМЕНЕНИЕ

Набор используется для лабораторной диагностики при исследовании сыворотки крови крупного рогатого скота в соответствии с наставлением по его применению.

ФОРМА ВЫПУСКА

Выпускается во флаконах. В коробке содержится по 4 флакона каждого компонента набора (1000 доз - III вариант комплектации). Возможны варианты комплектации наборов с контрольными сыворотками, указанные в наставлении по применению ( II вариант - по 250 и I вариант – по 1000 доз).

ХРАНЕНИЕ

Препарат сохраняет свои свойства при температуре от 0 до 6 0 С в течение 24 месяца с даты его изготовления.


НАБОР ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ИММУНОФЕРМЕНТНЫМ МЕТОДОМ (Вариант №1 – скрининг)

СОСТАВ

- компонент № 1 - полистироловый 96-луночный цельный или стрипованный планшет для иммуноферментного анализа с иммобилизованным в лунках гликопротеидным антигеном (gp51) ВLV – 2 планшета;
- компонент № 2 - сыворотка крови крупного рогатого скота, содержащая антитела к gp51 BLV (положительный контроль), цельная, прозрачная жидкость соломенно-жёлтого или красноватого цвета, 0,1 см3 – 1 флакон;
- компонент № 3 - сыворотка крови крупного рогатого скота, не содержащая антител к gp51 BLV (отрицательный контроль), цельная, прозрачная жидкость соломенно-жёлтого или красноватого цвета, 0,1 см3 – 1 флакон;
- компонент № 4 - молоко, содержащее антитела к gp51 BLV (положительный контроль), цельное, жидкость белого цвета, 1,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 5 - молоко, не содержащее антител к gp51 BLV (отрицательный контроль), цельное, жидкость белого цвета, 1,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 6 - антивидовой конъюгат (моноклональные антитела к IgG крупного рогатого скота, меченные пероксидазой), концентрированный, жидкость розового цвета, 0,5 см3 – 1 флакон;
- компонент № 7 - концентрат (x 20) буферного раствора для разведения контрольных и испытуемых проб сывороток крови и конъюгата, жидкость красного цвета, 20,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 8 - концентрат (x 20) промывочного буферного раствора, прозрачная бесцветная жидкость, 20,0 см3 – 2 флакона;
- компонент № 9 - раствор субстрата (Н202), прозрачная бесцветная жидкость, 22,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 10 - раствор хромогена (ТМБ), прозрачная бесцветная жидкость, 0,6 см3 – 1 флакон;
- компонент № 11 - стоп-раствор (0,2 М раствор серной кислоты), прозрачная бесцветная жидкость, 12,5 см3 – 1 флакон.

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для выявления антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота (BLV) в сыворотках крови и молоке крупного рогатого скота иммуноферментным методом, мониторинга эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота и проведении оздоровительных мероприятий. Вариант № 1 рассчитан на проведение 184 анализов.

ФОРМА ВЫПУСКА

Компонент №1 (96-луночный планшет) упакован в индивидуальный полиэтиленовый пакет с влагопоглотителем. Остальные компоненты набора расфасованы во флаконы из непрозрачного полиэтилена соответствующей вместимости, с завинчивающимися пробками. Флаконы упакованы в картонные коробки.

ХРАНЕНИЕ

Срок годности компонентов набора – 12 месяцев от даты изготовления при условии хранения и транспортирования набора в защищённом от света месте и температуре от 2 °С до 8 °С. Запрещено смешивать компоненты наборов разных серий и использовать набор по истечении срока годности. Не допускается замораживание компонентов!


НАБОР ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ИММУНОФЕРМЕНТНЫМ МЕТОДОМ (Вариант №2 – верификация)

СОСТАВ

- компонент № 1 - полистироловый 96-луночный цельный или стрипованный планшет для иммуноферментного анализа с иммобилизованным в лунках гликопротеидным антигеном (gp51) ВLV – 2 планшета;
- компонент № 2 - сыворотка крови крупного рогатого скота, содержащая антитела к gp51 BLV (положительный контроль), цельная, прозрачная жидкость соломенно-жёлтого или красноватого цвета, 0,1 см3 – 1 флакон;
- компонент № 3 - сыворотка крови крупного рогатого скота, не содержащая антител к gp51 BLV (отрицательный контроль), цельная, прозрачная жидкость соломенно-жёлтого или красноватого цвета, 0,1 см3 – 1 флакон;
- компонент № 4 - молоко, содержащее антитела к gp51 BLV (положительный контроль), цельное, жидкость белого цвета, 1,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 5 - молоко, не содержащее антител к gp51 BLV (отрицательный контроль), цельное, жидкость белого цвета, 1,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 6 - антивидовой конъюгат (моноклональные антитела к IgG крупного рогатого скота, меченные пероксидазой), концентрированный, жидкость розового цвета, 0,5 см3 – 1 флакон;
- компонент № 7 - концентрат (x 20) буферного раствора для разведения контрольных и испытуемых проб сывороток крови и конъюгата, жидкость красного цвета, 20,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 8 - концентрат (x 20) промывочного буферного раствора, прозрачная бесцветная жидкость, 20,0 см3 – 2 флакона;
- компонент № 9 - раствор субстрата (Н202), прозрачная бесцветная жидкость, 22,0 см3 – 1 флакон;
- компонент № 10 - раствор хромогена (ТМБ), прозрачная бесцветная жидкость, 0,6 см3 – 1 флакон;
- компонент № 11 - стоп-раствор (0,2 М раствор серной кислоты), прозрачная бесцветная жидкость, 12,5 см3 – 1 флакон.

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для подтверждения специфичности антител в пробах сыворотки крови и молока крупного рогатого скота, исследованных с положительным результатом с использованием варианта № 1 ИФА набора, при отрицательных результатах исследования в РИД и как самостоятельный тест. Вариант № 2 рассчитан на проведение 90 анализов.

ФОРМА ВЫПУСКА

Компонент №1 (96-луночный планшет) упакован в индивидуальный полиэтиленовый пакет с влагопоглотителем. Остальные компоненты набора расфасованы во флаконы из непрозрачного полиэтилена соответствующей вместимости, с завинчивающимися пробками. Флаконы упакованы в картонные коробки.

ХРАНЕНИЕ

Срок годности компонентов набора – 12 месяцев от даты изготовления при условии хранения и транспортирования набора в защищённом от света месте и температуре от 2 °С до 8 °С. Запрещено смешивать компоненты наборов разных серий и использовать набор по истечении срока годности. Не допускается замораживание компонентов!

Срок исполнения

Исследуемый материал

Метод определения

Вирус иммунодефицита кошек (FIV)

Вирус иммунодефицита кошек (Feline Immunodeficiency Virus, FIV) — это оболочечный вирус, принадлежащий роду Lentivirus семейства Retroviridae. Вирус поражает домашних и диких кошек повсеместно. Как и вирус иммунодефицита человека, FIV вызывает хроническую персистирующую инфекцию, которая у некоторых кошек становится причиной иммунодефицита.

FIV, как и другие ретровирусы, неустойчив к действию факторов внешней среды (выживает вне организма хозяина в течение нескольких минут) и быстро инактивируется дезинфектантами. FIV в. высокой концентрации содержится в слюне, основным путем передачи инфекции являются укусы больных животных. Имеются сведения о трансплацентарной передаче, передаче при родах, а также с молоком. В экспериментальных условиях эти пути передачи не являются значимыми в случае спонтанной инфекции, а у котят, инфицированных таким образом, может не происходить развития болезни. Данных о передаче инфекции половым путем нет, но FIV обнаруживается в сперме. Возможна передача вируса при переливании крови от инфицированного животного.

Средний возраст животных, в котором чаще всего диагностируется инфекция, составляет от шести до восьми лет (от 80 до 90% кошек). Коты бывают серопозитивными в 4,7 раза чаще, чем кошки. Содержание животных в помещении является фактором, снижающим вероятность передачи, но не исключает ее полностью.

Основной мишенью для FIV являются CD4+ . Однако вирус также поражает CD8+ , , макрофаги, дендритные клетки, клетки микроглии и астроциты. Влияние вируса на иммунную систему комплексное, до конца не изучено и включает как иммуносупрессию, так и активацию иммунитета.

Существуют три фазы болезни: острая (первичная), субклиническая и терминальная, хотя у спонтанно инфицированных кошек могут наблюдаться не все фазы. После инокуляции происходит репликация вируса в лимфоидной ткани. Через две недели после инфицирования отмечается виремия с высокой концентрацией вируса. Пиковые значения фиксируются через 8–12 недель после инфицирования. При этом наблюдается снижение концентрации CD4+ и CD8+ в периферической крови. Для некоторых кошек в острой фазе болезни характерны летаргия, лихорадка, анорексия, диарея, стоматит и/или лимфаденопатия.

В субклинической фазе болезни происходит восстановление уровня CD4+ , а концентрация вируса в плазме крови снижается до очень низкого уровня. Субклиническая инфекция у кошек может сохраняться в течение нескольких лет и даже на протяжении всей жизни. Эта фаза болезни не аналогична латентной инфекции, поскольку размножение вируса происходит в незначительном объеме. Наблюдается снижение показателя соотношения CD4+ : CD8+ ; у некоторых кошек отмечается гиперглобулинемия, вызванная гиперактивацией . Скорость прогрессирования субклинической фазы определяется такими факторами, как штамм вируса, наличие коинфекций другими патогенами, функциональным состоянием иммунной системы хозяина. У некоторых животных данные изменения в итоге приводят к развитию терминальной фазы заболевания, которая характеризуется клиническими симптомами оппортунистических инфекций, неоплазией, миелосупрессией и неврологическими симптомами. Эта фаза болезни чаще всего диагностируется у спонтанно инфицированных кошек. Однако у многих инфицированных животных никогда не происходит развития клинических симптомов даже при низком уровне CD4+ . Терминальная фаза инфекции FIV обычно сопровождается умеренным или тяжелым периодонтитом, лимфоплазмоцитарным стоматитом, гингивитом или одонтокластическими резорбтивными поражениями, которые могут быть вызваны опортунистическими бактериальными или вирусными инфекциями.

У многих кошек инфекция FIV диагностируется при проведении скрининга. Скрининг осуществляется с использованием методов, позволяющих обнаружить антитела к FIV, ввиду их доступности, чувствительности и быстроте проведения анализа.

При получении положительных результатов роль FIV в. развитии тех или иных симптомов может быть неочевидной. Однако вирус может быть причиной лимфомы, тяжелого стоматита, инфекций, вызванных другими патогенами (например, микоплазмами).

Для диагностики FIV доступны серологические методы исследования, направленные на обнаружение антител к вирусу иммунодефицита (иммунохроматографический анализ ‒ ИХА, ImmunoSorbent Assay ‒ ELISA). Также используется и метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для выявления заболеваний кошкам рекомендуется проводить дополнительные обследования (общий и биохимический анализ крови, анализ мочи и фекалий, тестирование на FeLV, ПЦР для исключения гемотропных микоплазм).

Для диагностики инфекции FIV был разработан ряд ПЦР (в реальном времени с обратной транскрипцией), с помощью которых обнаруживаются вирусная РНК, провирусная ДНК или РНК и провирусная ДНК в образцах периферической крови. Наиболее широкое применение нашла ПЦР, выявляющая провирусную ДНК в режиме реального времени. В сравнении с серологическими методами исследования чувствительность ПЦР может быть ниже (

Код Наименование услуг Цена, руб. Доступность экспресс Ед. измер. Материалы Заказать
4293 АТ к вирусу лейкоза КРС (ИФА) 600 p (Время исполнения 3-5 дней)
1 исслед. S P N V C

Цель исследования:
Тест предназначен для выявления в организме крупного рогатого скота антител к вирусу лейкоза КРС.
Преимущество данного теста в том, что есть возможность диагностировать антитела в сливных пробах молока от коров.
Результат оценивается в сравнении с пороговым коэффициентом = 1,0. Образцы считаются положительными (т.е. содержащими антитела к вирусу лейкоза) при значении оптической плотности больше величины порогового коэффициента

Диагностическая значимость:
Тест должен использоваться для подтверждения результатов, полученных экспресс методами, а также для верификации сомнительных результатов, полученных другими методами, не основанными на определении активности антител (например ПЦР).

Метод исследования:
Сендвич-вариант твердофазного иммуноферментного анализа;
Принцип непрямого варианта ИФА заключается в выявлении комплекса, образованного антигеном, иммобилизованным с помощью моноклональных антител на поверхности лунок полистиролового планшета и специфическими антителами, содержащимися в пробах сыворотки крови или молоке крупного рогатого скота. Специфический комплекс взаимодействует с антивидовым конъюгатом моноклональных антител к IgG крупного рогатого скота с пероксидазой и обнаруживается по изменению окраски раствора в результате химических превращений субстрата и хромогена. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации специфических антител в исследуемой пробе.

Требования к взятию материала: 1. Сыворотка. Кровь в пробирке для биохимии (с активатором свертывания или гранулами) или пустой пробирке - мин. объем 1 мл. Сыворотка- мин.объем 150 мкл. Без признаков гемолиза и бактериальной контаминации. 2. Плазма. Кровь в пробирке с ЭДТА - мин.объем 1 мл, или плазма - мин. объем 150 мкл. Без признаков гемолиза и бактериальной контаминации 3. Молоко, индивидуальные пробы. Объем не менее 5 мл. Рекомендовано брать из обмытого вымени в чистую (по возможности стерильную) посуду 4. Молоко, сливные (пулированные) пробы – допустимо до 50 индивидуальных образцов в пуле, минимальный объем индивидуального образца – не менее 5мл. Пул формируется из РАВНЫХ объемов индивидуальных образцов. 5. Молозиво, индивидуальные пробы. Объем не менее 5 мл. 6. Секрет вымени сухостойных коров, индивидуальные пробы. Объем не менее 5 мл. Стабильность антител в пробах крови и молоке: Допускается хранение образцов при температуре +2-+8 ⁰С в течение 72 ч.

Лейкоз крупного рогатого скота – хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, которая протекает бессимптомно или проявляется лимфоцитозом и злокачественными разрастаниями клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, в результате чего происходит диффузная инфильтрация органов этими клетками или появляются опухоли. Возбудителем лейкоза крупного рогатого скота является РНК–содержащий вирус семейства Retroviridae, классифицированный по морфологическим признакам как онковирус типа С млекопитающих, местом обитания и размножения которого являются лимфоциты. Клинические признаки. В настоящее время нет пород крупного рогатого скота, абсолютно устойчивых к заражению вирусом лейкоза КРС и заболеванию лейкозом. Различают две формы клинического течения болезни: энзоотическую и спорадическую. Энзоотический лейкоз поражает взрослых (5—8 лет) животных и протекает с длительным латентным периодом (до нескольких лет), который характеризуется стойким лимфолейкозом без клинических признаков болезни. Терминальная стадия сопровождается снижением массы тела, молочной продуктивности, увеличением лимфоузлов и заканчивается смертью. Экономический ущерб очень высокий. Спорадический лейкоз встречается редко и в экономическом отношении малоактуален. Поражается молодняк до трех лет. Болезнь протекает в трех формах: ювенальной, тимусной и кожной. Локализация вируса. Вирус локализуется в лимфоидных клетках разных органов, где сохраняется пожизненно (персистирует). В инфицированных лимфоцитах в форме провируса (непродуктивное состояние) вирус защищен от действия вируснейтрализующих антител и может передаваться потомству во время деления клеток. Провирус может изменять экспрессию генов клетки, что приводит к ее трансформации и развитию опухолевой стадии лейкоза. Постоянным признаком инфекции служит продукция специфических антител. Источник инфекции — больные животные. Возбудитель передается со всеми секретами и экскретами, содержащими зараженные вирусом лейкоциты (кровь, молоко, молозиво, сперма, носовая и влагалищная слизь, слюна). Чаще всего вирус передается с кровью. Наибольшую опасность с точки зрения распространения инфекции представляют животные с персистентным лимфоцитозом, у которых доля инфицированных лимфоцитов в периферической крови значительно выше, чем у животных инфицированных, но не достигших гематологической стадии заболевания. Основной путь передачи инфекции в естественных условиях через контаминированные вирусом инъекционные иглы, хирургические инструменты и т. д. при проведении санитарно-ветеринарных мероприятий. Кроме того, вирус может передаваться трансплацентарно (хромосомная или экстрахромосомная трансмиссия) от матери к плоду, алиментарно через молоко и молозиво, а также половым путем через инфицированную сперму. Распространяться инфекция может и кровососущими насекомыми. Метод ИФА позволяет обнаружить специфические антитела у инфицированных животных, начиная с 6-месячного возраста и старше (телята, выпаиваемые молозивом и молоком инфицированных коров, могут получать материнские антитела, которые сохраняются до 6 мес, следовательно при применении серологических методов исследования в этом возрасте могут быть получены ложноположительные результаты). Используется для быстрого скрининга стада на наличие инфицированных животных (допускается исследование в группах со смешиванием сывороток максимум от 10 голов), а так же для подтверждения результатов ПЦР в периоды, когда уровень провирусной ДНК минимален.

Читайте также: