Лимфоциты при лейкозе крс

  • Газеты
  • Журналы
  • Каталоги | Проспекты
  • Бюллетень
  • Словари
  • Справочники
  • Учебная
  • Техническая
  • Skip to content

СБОРНИК основных инструкций и наставлений по борьбе с болезнями сельскохозяйственных животных - *** МЕТОДИКА исследования крови крупного рогатого скота при лейкозе


***

МЕТОДИКА
исследования крови крупного рогатого скота при лейкозе

Лейкоз крупного рогатого скота характеризуется у большинства животных увеличением общего количества лейкоцитов, а также увеличением как процентного, так и абсолютного количества лимфацитов, с появлением незрелых клеток. При алейкемических формах •лейкоза количество лейкоцитов не превышает нормы.

Исследование крови проводится в комплексе с другими методами диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Получение крови для исследования. Для гематологических исследований кровь берут из сосуда внутренней или наружной поверхности уха или яремной вены, непосредственно в пробирку, в которую предварительно насыпают стабилизатор. 10—15 раз осторожно переворачивают пробирку вверх и вниз, при этом кровь полностью перемешивается со стабилизатором.

Наиболее употребительными стабилизаторами являются лимонно-кислый натр, добавляемый из расчет а 0.3 сухого порошка на 100 мл крови, или щавелево-кислый натр — 0,15 на 100 мл крови.

Подсчет лейкоцитов и приготовление мазков. Подсчет лейкоцитов рекомендуется проводить в счетной камере Горяева. Мазки крови должны быть тонкими. Для исследования мазки фиксируют метиловым спиртом в течение 3 минут летом и 5 минут в холодное время года, абсолютным этиловым спиртом в течение 20 минут, смесью этилового спирта с эфиром в равных объемах - 5 минут, ацетоном — 5 минут. Лучшим фиксатором является метиловый спирт.

Окраска мазков. Наилучшим для окраски мазков является метод по Романовскому-Гимза. Правильно окрашенные мазки имеют розовый цвет. Ярко-красная окраска указывает на избыток кислотности воды, серо-голубая или фиолетовая — на избыток щелочи.

Перекрашенные мазки имеют грязно-фиолетовый цвет

Лейкоцитарная формула. Лучшей методикой для подсчета лейкоцитарной формулы крупного рогатого скота является метол Филиппченко. Мазок крови при этом делится на части: начальную, среднюю и конечную. В каждой части мазка подсчет ведут от одного края мазка до другого: во всех частях мазка подсчитывают в сумме 200 клеток. Этот метод подсчета в трех различных частях мазка дает наиболее правильную среднюю цифру количества белых кровяных телец. При большом количестве лейкоцитов в крови (свыше 30 тысяч в 1 мм3) лейкоцитарная формула может быть подсчитана на середине мазка.

Количество лейкоцитов и лимфоцитов у здоровых, подозрительных по заболеванию и больных лейкозом животных, представлено в следующей таблице:

При выявлении на ферме (отделении, скотном дворе) животных с клинической формой лейкоза, остальных животных подвергают поголовному гематологическому исследованию, кроме молодняка до 4—5-месячного возраста.

В первичных случаях выявления животных с увеличенным против норм количеством лейкоцитов и лимфоцитов в крови выводят в отдельное помещение, за ними ведут ветеринарное наблюдение и через 1—2 месяца повторно исследуют для выяснения окончательного диагноза. Диагноз на заболевание животных лейкозом ставят комиссионно, с учетом данных комплекса исследований.

При гематологическом исследовании учитывают: количество лейкоцитоз и лимфоцитов в 1 мм3, процент лимфоцитов в лейкоцитарной формуле и наличие незрелых клеток. Оценку гематологических результатов проводят в соответствии с данными, указанными в таблице.

Во избежание ошибок при постановке диагноза на лейкоз необходимо иметь в визу лейкомоидные реакции, т.е. изменения показателей белой крови при других заболеваниях—незаразных (маститы, эндометриты, травматический перекардит, ратикулиты и др.) и заразных (туберкулез, бруцеллез, паратуберкулез и др.), нe связанных с лейкозным процессом.


Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Внутриклеточный рН и морфофункциональные параметры лимфоцитов периферической крови в норме и при лейкозе крупного рогатого скота

ВСЕСОЮЗНЫМ ОРДЕНА ЛЕНИНА НАУЧНО-ИССЛВДОВАТЕЛЬСКШ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРЮЛЕНТМЫЮЛ ВЕТЕРИНАРИИ имени Я.Р. КОВАЛЕНКО

ВСЕСОЮЗНОЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ АКАДОШ СЕЛЬСКОХОЗШСТВЕННиХ НАУК имени В.И. ЛЕНИНА

На правах рукописи

АБРАМЯН ЛЕОНИД ЙРАНТОВИЧ

ШУТРШИВТОЧШй рН И лЮРФОФУНКЦИОНАЛЬШЕ ' ПАРАМЕТРЫ ЛШЮЦИТОВ ПЕР®ЕР1ШЕСКОЙ КРОВИ В НОРМЕ И ПРИ ЛЕЙКОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТ0РВ5ЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена в Центральном отделе лейкозов, сравнительно!! и экспериментальной онкологии Всесоюзного ордена Ленина научно-исследовательского института экспериментально" ветеринарии ;;м.

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор Г.А. Симонян

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник З.Б. Туровецкий

1. Заслуженный деятель науки PCFCP, доктор биологических наук, профессор Дьяконов Л.П. (ВИЗВ).

2, Кандидат ветеринарных наук, стариий научны": сотрудник Петровский Г.С. (МВА).

Ведущее учреждение - Институт иммунологии Литовской Академии наук.

Защита диссертации состоится ф 1990г.

в /6 —часов на заседании Специализированного совета Д 020.26.02 по зачтите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Всесоюзном ордена Ленина научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко по адресу: 109472, Москва, Кузьминки, ВЙЭВ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЭВ Автореферат разослан " ^ " oi^iii^1Я 1990г.

кандидат биологических наук В.В. Амелина

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность теш. Одной из ваанейших задач современной лей-козологии является разработка новых и совершенствование существующих методов ранней и дифференциальной диагностики гемооласто-зов. За последние десятилетия отечественными исследователями внесен огромный вклад в изучение лейкоза крупного рогатого скота (Б.Б.Ермолаев, 1963; Г.А.Симонян, 1963, 1975; Т.П.Кудрявцева. 196?; Н.В.Румянцев, 1975; В.П.ШишкоВ, 1975; Г.Ф.Коромыслов, 1975; Г.С.Петровский, 1979; Л.Г.Бурба, 1983; В.И.Нахмансон, 1986; В.И.Тамошюнас, 1987 и др.). Методами комплексных клинико-гематоло-гических, цитологических, иммунологических, биохимических и вирусологических исследований били всесторонне изучены особенности патологических изменений при данной болезни. *1з разработанных прижизненных методов диагностики лейкоза сравнительно достоверным остается гематологический, а для уточнения и подтверждения диагноза - цитоморфологичесхие методы. Вместо с тем, диагноз, установленный морфологическим методом исследования не всегда подтверждается патоморфологическям анализом, незначительный лимфоцитоз может тлеть место и при некоторых заболеваниях нелелкозной природы, а зрелые лимфоциты не во всех случаях поддаются идентификации. Исходя из этого перед лейкозологаии встала необходимость изыскания дополнительных тестов, позволяющих дифференцировать незначительные морфологические и структурно-функциональные изменения в крови при лейкозе от таковых, обусловленных причинами нелейкозного характера.

В настоящее время все большее применение получают физико-химические метода изучения структуры и функций клеток, среди которых значительное место принадлежит методу флуоресцентных зондов. Благодаря способности целого ряда флуоресцирувдих соединений (как внутриклеточной природы, так и вводимых в клетку извне) отвечать изменением параметров собственной флуоресценции на изменение физико-химических свойств окружения, создается возможность следить с их помощью за такими параметрами клеток, как внутриклеточный рН, содержание Са2+, состояние мятохондрлального и лшзосомального аппарата, состояние клеточных мембран, синтетическая активность клетки, содержание некоторых внутриклеточных соединений и др. (Ю.А.Владимиров, Г.Е.Добрэцов, 1980; В.П.Зорин, 1984). Все это дает возможность изучать различные системы клеточной регуляции, к числу наиболее важных из которых относят систему рН-регуляцки.

Анализ литературных данных о взаимосвязи между изменениями физико-химических свойств и функциональных характеристик клеток, скорости протекания внутриклеточных процессов, пролиферативной активности и т.п. с одной стороны, и пространственно-временными сдвигами величины внутриклеточного рН с другой, убедительно показывают, что ионы водорода могут и должны играть важную регуляторную роль в процессах клеточной жизнедеятельности (Л.Л.Литинская, А.М.Зекс-лер, В.Е.Туровецкий, 1987 и др.).

В то же время проблемы участия ионов водорода в лейкозной трансформации лимфоидных клеток изучена явно недостаточно (Т.Н.Багла-ев и др., 1982) и требует дальнейших углубленных исследований. При этом, особо перспективным представляется комплексный анализ изменений, происходящих на клеточном уровне, включающий в себя, наряду с изучением модификации внутриклеточного рН, исследование таких важных параметров структурно-функционального состояния как содержание АТФ, синтетическая активность и состояние клеточных.мембран.

Такой подход, в конечном итоге, должен обеспечить расшифровку механизмов лейкозной трансформации и, как следствие, создать дополнительные методы ранней и дифференциальной диагностики данного заболевания. Это, в значительной степени, и определяет важность и актуальность данной диссертационной работы.

Цель и задачи исследований. Целью наших исследований явилось изучение в сравнительном аспекте с помощью одного из наиболее перспективных направлений физико-химического анализа г метода флуоресцентных зондов и ряда других методов - отличительных особенностей лимфоцитов периферической, крови здорового и больного лейкозом поголовья коров, возможности использования полученных данных для идентификации нормальных лимфоцитов от. лейкемических в качестве , дополнительного критерия оценки лейкозного процесса и дифференциальной диагностики лейкоза крупного рогатого скота. •

Дня достижения поставленной цели, на-семи отобранных, группах коров (здоровые, инфицированные ВЛКРС и больные лейкозом животные, находящиеся в предлейкозном состоянии,, начальной, развернутой нетерминальной стадиях) ставилась задача, изучить в,сравнительном аспекте следующие параметры .клеток:

. I. Цито.морфологические. изменения лимфоцитов- периферической - . крови.. : - . ; - ■ • , ■■ ■ ■'

2. Внутриклеточный рН (концентрация ионов водорода).в■лимфоцитах периферической крови.

3. Интенсивность флуоресценции лимфоцитов периферической кро-

ви, окрашенных люминесцентным зондом.

4. Синтетическую активность лимфоцитов крови (отношение РНК к ДНК в клетке).

5. Содержание количества общего белка и внутриклеточной АТФ в лимфоцитах периферической 1фови.

6. Содержание липидов и микровязкость клеточных мембран лимфоцитов.

Научная новизна. Впервые методами комплексных гематологических, серологических (РИД), цитоморфологических и физико-химических исследований с применением флуоресцентных зондов проведено изучение морфосуункциональных особенностей лимфоцитов периферической крови у здоровых, инфицированных ВЛКРС и больных на различных стадиях лейкоза коров. Доказано, что в процессе развития заболевания прогрессивное нарастание числа лейкоцитов в крови сопровождается преимущественной пролиферацией средних и больших лимфоцитов, увеличением среднего их размера, значительным повышением внутриклеточного рН и связывания ими фдуоресцеина. Отмечается также одновременное возрастание уровня,АТ0 в клетках, повышение их синтетической активности, изменение микровязкости мембран лимфоцитов. Изменения в характере распределения .клеток в популяции по величине данных параметров имеют диагностическое и патогенетическое значение.

Практическое значение -работы. Развитые в диссертационной работе метода определения внутриклеточного рН и интенсивности флуоресценции, окрашенных флуоресцентным зондом клеток используются для изучения механизмов лейкозной трансформации и дифференциации лим-фоидных клеток. Данные методы вошли в сборник "Методические рекомендации по цитохимическим и физико-химическим методам диагностики гемобластозов крупного рогатого скота", предназначенные для научно-исследовательских учреждений, изучавших гемобластозы сельскохозяйственных животных и в "Программу профилактики и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в хозяйствах агропромышленного объединения "Новомосковское на 1987-1992 гг.". Полученные в диссертационной работе результаты, помимо важного теоретического, имеют также большое практическое значение и могут.послужить основанием для разработки соответствующих диагностических тестов.

Апробация работы. Основные положения диссертации долшены на "Координационном совещании по проблемам лейкозов человека и животных", (Кишинев, 1989); на научно-производственных совещаниях сот-

рудников Центрального отдела лейкозов, сравнительной и экспериментальной онкологии ВИЭВ в 1987, 1988, 1989 годах; на заседаниях Ученого Совета ВИЭВ в 1988 и 1989 годах; на научной конференции молодых ученых ВИЭВ в 1990 году;.на Республиканской научно-технической конференции "Ветеринарная медицина:.экономические, социальные и экологические проблемы" (Харьков, ноябрь, 1990).

Публикации. По теме диссертации опубликованы три научные статьи и две методические рекомендации.

0бъем_2абота. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста. Текст иллюстрирован II таблицами.и 18 рисунками. Работа, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов . исследований, результатов исследований, обсуждения полученных-результатов, выводов, практических.предложений. Список литературы содержит 179 наименований работ, в том числе 67..-зарубежных публикации. ■ . .

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ . •. 2.1; .Материалы и метода исследований

Работу проводили в Центральном отделе лёйкозов, сравнительной и экспериментальной онкологии ВИЭВ,1 Калужском отделе лейкозов ВИЭВ, на кафедрах биофизики биологического факультета и химической энзи-мологии химического факультета Московского Государственного университета им.. Ы.В.Ломоносова и в научно-исследовательском институте физико-химической медицины МЗ РСФСР. Экспериментальная часть работы по:подбору и,исследованию групп ливотных проводилась в хозяйствах Тульской (колхоз-племзавод им.В.И.Ленина,•агрофирма "Иван-озеро") и Калужской (госплемзаврд:им.Цветкова,; опытно-производственное хозяйство* "Калужское"), областей, v ■ !

При-массовых-гематологических и серологических (РИД) исследованиях крупного , рогатого.; скота, оздоравливаешх. от лейкоза из 2125 животных были отобраны 168 коров, которые в зависимости от количества лейкоцлтов (лимфоцитоз) в крови были: подразделены на семь групп: здоровые, инфицированные ВЛКРС, в предлейкозном состоянии, в начальной стадии с умеренным и высоким лейкоцитозом.в-крови,- в развернутой и терминальной стадиях лейкоза. Отобранные коровы в зависимости' от поставленной цели .были подвергнуты исследованиям от I до 15 раз с интервалами от нескольких часов до 3-6 месяцев,, а в некоторых случаях и до года, как для исключения ошибок методического

характера и определения воспроизводимости результатов исследований, так и установления факта прогрессировали лейкозного процесса у исследуемого животного.

Гематологические исследования проводили согласно "Методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота", одобренным ГУВ МСХ СССР 25 марта 1974 г.

Для выявления инфицированности животных ВЛКРС применяли реакцию иммунодиффузии (РИД) в геле агара согласно "Методическим рекомендациям по серологической диагностике лейкоза крупного рогатого скота", утвержденным ГУВ Госагропрома СССР от 30 ноября 1988 г.

Выделение лимфоцитов из цельной крови проводили по зоуип .и (1972) и ЛодинонзйЛ.а. (1982) на градиенте плотности фиколл-веро-графина.

Определение внутриклеточного рН и интенсивности флуоресценции лимфоцитов, выделенных из периферической крови проводили с использованием микрофлуориметричёского метода (Литинскэя Л.Л. и др., 1984) на серийно выпускаемом люминесцентном микроскопе марки Люмам-ИЗ, оснащенном фотометрической насадкой н;

Рис Л. Гистограмма распределения лимфоцитов периферической крови крупного рогатого скота по величине внутриклеточного рН в группе контрольных животных (а), начальной стадии лейкоза с высоким лейкоцитозом (б) и в терминальной, стадии (в).

2.2.3. Интенсивность флуоресценции лимфоцитов периферической крови крупного рогатого скота на разных стадиях развития лейкозного процесса


Лейкоз крупного рогатого скота — это хроническая инфекционная , медленно протекающая болезнь опухолевой природы. Болезнь сопровождается поражением органов кроветворной системы, появлением повышенного количества лимфоцитов в крови, иногда опухолеобразным поражением органов и тканей организма.

Возбудитель – вирус лейкоза крупного рогатого скота. Во внешней среде — малоустойчив. При температуре 76 градусов вирус инактивируется за 16 сек, кипячение убивает вирус мгновенно. Он быстро обеззараживается 2-3%-ными растворами едкого натра, 3% растворами формальдегидами, 2 % раствор хлора и т.д.

В развитии болезни различают 3 стадии – инкубационную, гематологичекую и опухолевую.

Источник инфекции является зараженное животное на всех стадиях течения болезни. Передается с инфицированными лимфоцитами. Возможен пренатальный (от матери к плоду), постнатальный ( при совместном содержании инфицированных и здоровых животных) и комбинированный пути передачи вируса.

Передача вируса происходит через кровь, молоко, биологические жидкости, предметы, содержащие лимфоидные клетки животного, а также сперму больных лейкозом быков. Случаи передачи вируса лейкоза через кровососущих насекомых не установлены. Заражение телят происходит после рождения – через молоко. Заразившись однажды, животное остается инфицированным пожизненно.

Лейкоз причиняет хозяйствам большой экономический ущерб, связанный с:

  • затратами на проведение противолейкозных мероприятий
  • снижением качества и количества молочной и мясной продукции
  • затратами на обеззараживание молока(пастеризация) Молоко, полученное из неблагополучных по лейкозу хозяйств, не допускается в свободную реализацию. Такое молоко можно использовать только после пастеризации или оно сдается на молокозаводы и реализуется после промышленной переработки
  • вынужденная выбраковка и убой больных лейкозом животных на мясокомбинатах
  • затрудняется ведение в хозяйстве племенной работы.

Возможность заражения человека лейкозом не доказана, так как существует видовой барьер.

Распространению заболевания способствует совместное содержание и пастьба здоровых и зараженных животных, выпаивание телятам молока от больных лейкозом коров, осеменение коров спермой от зараженных быков, использование в стаде быка (вольная случка).

Несоблюдение зооветспециалистами правил асептики и антисептики при проведении зооветеринарных мероприятий (биркование и мечение животных, взятие крови, лечение, исследование на стельность, оказание ветеринарной помощи)

Если сельхозпредприятия, имеющие своих специалистов, соблюдают правила закупки скота, то владельцы ЛПХ, КФХ часто их нарушают, когда покупают животных без проведения исследований на лейкоз, без оформления ветсправки формы № 4 или ветсвидетельства формы № 1 и паспортов, где указываются данные, что в течение месяца, когда животное было на карантине, проводились необходимые диагностические исследования, в том числе и на лейкоз КРС.
При покупке животных владельцы забывают о том, что они должны поставить в известность госветслужбу по месту жительства о приобретении животного, которая ставит во дворе владельца его на 1-месячный карантин, в течение которого повторные диагностические исследования, в том числе и на лейкоз.

Если в течение карантина госветслужбой у животного устанавливается лейкоз, то купивший данное животное владелец ЛПХ имеет полное юридическое право взыскать материальный ущерб, связанный с покупкой больного животного с лица, продавшего данное животное.

Отсутствие у населения и владельцев необходимых знаний о лейкозе, игнорирование существующих правил закупки часто приводят к распространению лейкоза в ЛПХ граждан. Особенно это опасно потому, что в дальнейшем реализация молока из частных подворий в несанкционированных местах торговли не поддается контролю.

Для лейкоза характерна длительность инкубационного (скрытого) периода от 2 до 6 лет.

В сельскохозяйственных предприятиях, КФХ, ЛПХ исследования на лейкоз проводят 2 раза в год (весной – перед выгоном на пастбища и осенью, при постановке скота на зимне-стойловое содержание).

В гематологической стадии лейкоза в ветлаборатории обнаруживают в клетках крови количественные и качественные изменения: увеличение числа лейкоцитов в лейкоцитарной формуле, появляются патологические и незрелые формы клеток. Такие изменения в крови говорят о том, что виру лейкоза начал свое действие, разрушая кроветворную систему организма. В третьей, последней стадии лейкоза у животного появляется клиника: ухудшение общего состояния, снижение продуктивности, нарушения в работе сердечно-сосудистой системы и, что самое характерное для лейкоза, происходит увеличение поверхностных лимфатических узлов ( предлопаточных, надвымянных и коленной складки).

Оздоровление поголовья от вирусного лейкоза крупного рогатого скота проводят разными способами, в зависимости от процента заражения и статуса хозяйства. Все методы оздоровления сводятся к периодическим систематическим исследованиям поголовья с изоляцией больных животных, их убоем, частичной заменой стада.

  • Болезни скота
  • Видео

Лимфолейкоз


Лейкозами (Leucosis) называются заболевания органов кроветворения, проявляющие­ся диффузной гиперплазией всего клеточного аппарата, продуцирующего лейкоциты, с обра­зованием очагов патологического кроветворения во многих органах.

Характерной особенностью лейкозов наряду с гиперплазией и метаплазией кроветвор­ной системы является появление в крови незрелых форм лейкоцитов. У больных, страдающих различными формами лейкоза, нарушается не только дифференциация, но и созревание кроветворных клеток.

Исходя из современных представлений о генезе форменных элементов крови и клинико-экспериментальных наблюдений может быть принята следующая схема классификации лейкозов.

Гемобластозы Лейкобластозы (лейкозы)

Лимфолейкоз Диффузная и опухолевая формы

Миелолейкоз (лимфосаркоматоз, лимфогрануло-

матоз и др.) Эритробластоз (эритремия)

В приведенной классификации указаны лишь основные формы лейкозов. В отношении других форм, как и эритробластоза животных, необходимо накопление соответствующих клинических данных.

Многочисленными исследованиями установлена вирусная природа лейкобластов у ря­да видов животных. Клиническому проявлению болезни способствует ряд факторов. К ним относятся химические канцерогены, ионизирующая радиация, токсины (афлатоксин и пр.), различные мутагены, способные при соответствующих условиях вызвать активацию генома вируса, включенного в ДНК клетки, что ведет к превращению нормальных клеток в опухоле­вые.

Лимфолейкоз(Lympholeucosis) — заболевание системы крови, характеризующееся гиперплазией ткани лимфоузлов, развитием лимфопоэза в костном мозге, печени, почках и других органах и поступлением в периферическую кровь лимфоцитов преимущественно молодых форм. Встречается лимфолейкоз у крупного рогатого скота (особенно у коров в 4—7-летнем возрасте), у собак, реже у лошадей, свиней и овец.

Можно считать установленным, что основной причиной лимфолейкоза у крупного рогатого скота является онкогенный вирус; он способен передаваться плоду и выделяться с молоком. Имеются случаи передачи возбудителя болезни быками-производителями. Инкубационный период длится 2—4 нед при лейкемической фазе заболевания и от нескольких месяцев до нескольких лет при опухолевой.

Патогенез. Ослабление интенсивности обмена нуклеиновых кислот, расстройство синтеза дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в хромосомах приводят к мутации (прежде всего родоначальных клеток кроветворных органов) и патологической лимфоидной пролиферации в лимфатической системе. Лимфоидная пролиферация идет в основном за счет недифференцированных клеток. В них отмечаются структурные изменения ядра и протоплазмы, нарушение липоидного обмена. Выявляются существенные сдвиги со стороны ферментативных систем клеток крови — падает уровень цитохромоксидазы, снижается содержание пероксидазы.

Гиперплазия лимфоидной ткани в костном мозге подавляет миелоэ-ритро- и тромбоцитопоэз. Значительно снижается количество зрелых гранулоцитов. Функциональная неполноценность лимфоидных элементов и гранулоцитов ослабляет сопротивляемость организма инфекциям. В силу нарушения эритропоэза развивается гипопластическая анемия. Тромбоцитопения и изменения в кровеносных сосудах обусловливают кровоточивость.

Патологоанатомические изменения. Отмечается нередко отечность межчелюстной области и подгрудка. При опухолевой форме все поверхностные и внутренние лимфоузлы увеличены и набухшие. Паренхима их сочная, иногда с кровоизлияниями. Капсула лимфоузлов напряженная, эластичная или мягкая. На разрезе паренхима имеет серо-белый или серо-желтый цвет с характерным лакоподобным блеском. Под капсулой и в ткани лимфоузлов иногда обнаруживаются некротические очаги желтоватого цвета, окруженные красноватым ободком.

Сердце обычно увеличено, мышца дряблая. На разрезе сердечная мышца серо-белого цвета с отдельными кровоизлияниями.

Селезенка в 30—50 % случаев увеличена, иногда до громадных размеров. У крупного рогатого скота, например, масса ее достигает 50 кг, у свиней — 4 кг, у собак — 2,5 кг. Капсула селезенки часто напряжена, а нередко разорвана. Поверхность разрыва темно-красного цвета, суховатая и крупнозернистая. Паренхима размягчена, усеяна кровоизлияниями и бледными некротическими очажками; фолликулы сильно увеличены; вся ткань, трабекулы и капсула инфильтрированы лимфоидными элементами. Разрастание лимфоидной ткани отмечается в сычуге, по ходу кишечника, в печени, почках, глотке, корне языка и других органах.

В корковом слое пораженной увеличенной почки обнаруживают многочисленные серо-белые саловидные узелки с кровоизлияниями.

Нередко увеличены зобная железа и печень. Последняя бывает мягкой или ломкой, иногда бугристой, пронизанной узелками серо-красного цвета. Костный мозг студневидной или желеподобной консистенции, желто-зеленого или желто-коричневого цвета. В матке, преджелудках, кишечнике обнаруживаются лимфоидные разрастания. В сычуге спиральные складки слизистой оболочки сильно утолщены, нередко имеются язвы.

Иногда находят саловидные лейкемические разрастания и в ске-летных, но чаще в жевательных, брюшных и грудных мышцах. По мере развития процесса ткани пораженных органов атрофируются.

Симптомы. Лимфолейкоз развивается постепенно, незаметно. Поэтому начальную стадию лейкоза часто не обнаруживают или принимают за другое заболевание. К ранним симптомам его относится быстрая утомляемость животного, даже при незначительных физических напряжениях. Затем постепенно нарастает общая слабость, теряются продуктивность и работоспособность, понижается аппетит, развивается истощение, у быков — импотенция. Нередко отмечаются атония преджелудков, поносы.

Видимые слизистые оболочки бледные, слегка желтушные. Сердечная деятельность учащается, появляются эндокардиальные систолические шумы. Тоны сердца часто глухие, ослабленные, иногда раздвоенные. Пульс слабый. Нередко отмечается застой крови в шейных венах. Животные много лежат. В ряде случаев развиваются хромота на одну или обе задние конечности, слабость зада, шаткость при движении; эти явления часто бывают обусловлены давлением увеличенных лимфоузлов на корешки нервов или на спинной мозг. Наблюдаются одностороннее или двустороннее пучеглазие, поражение век или мягких тканей орбиты, отек гортани.

В области шеи, подгрудка, на нижней стенке живота и на конечностях нередко возникают застойные отеки. Температура тела обычно нормальная или несколько ниже и повышается только при осложнениях.

Переход субклинической стадии в клиническую (в особенности в резко выраженную, так называемую опухолевую) происходит бурно и через короткий промежуток времени (2—3 нед) завершается смертью.

В этой стадии из общих клинических симптомов наибольшее значение имеет диффузное увеличение всех лимфоузлов, селезенки, а нередко и печени. Почти всегда сильно увеличиваются подчелюстные, околоушные, окологлоточные, предлопаточные, коленной складки, надвыменные и паховые лимфоузлы. Они подвижные, не спаяны друг с другом, безболезненны и довольно гладкие; кожа над ними не изменена. В отдельных случаях лимфоузлы, достигая больших размеров, давят на соседние ткани, органы и вызывают различные функциональные расстройства. Так, сдавливание бронхов или трахеи вызывает стенотическое дыхание, кашель, одышку и даже асфиксию. Сжатие кровеносных сосудов приводит к отекам, сердечной слабости и тромбозу сосудов. При сильной гиперплазии лимфоузлов брюшной полости увеличивается живот, наблюдаются асцит, тромбоз лимфатических сосудов, метеоризм, гипотония преджелудков, поносы, а у лошадей колики (на почве относительной непроходимости кишечника). Кал либо сухой, либо жидкий, имеет резкий запах, часто дегтеобразный, с жирным блеском. Селезенка обычно увеличена, на ощупь плотная, гладкая или бугристая. Печень в большинстве случаев умеренно увеличена. Иногда обнаруживаются мягкие плоские лейкемические инфильтраты или неспецифические высыпания на коже в форме фурункулеза, обусловливающие ее утолщение, а нередко и изъязвление. В моче иногда находят белок и повышенное содержание уробилина, индикана, в осадке — лейкоциты, эритроциты и почечный эпителий, в крови — увеличение кетоновых тел, снижение сахара и аскорбиновой кислоты.

Отмечается уменьшение общего белка крови до 5—6 г%, альбуминов и повышение бета – и гамма-глобулинов, иногда с резким увеличением бета-глобулиновой фракции. Количество остаточного азота увеличивается, падают щелочной резерв и кислотная емкость крови, особенно в терминальную стадию болезни.

Общее количество связанных с белками углеводов в сыворотке крови снижается до 105 мг % (при норме 160 мг %)-. Отмечаются расстройство ферментативной активности (снижается активность амилазы до 460 ед., фосфатазы — до 20), угнетение активности липазы. Аминокислоты снижаются на 20—22 %, исчезает из крови метионин.

Морфологическая картина крови при лимфолейкозе весьма вариабельна. Как количество лейкоцитов, так и лейкограмма изменяются в зависимости от стадии лейкозного процесса. В связи с этим абсолютное число лейкоцитов в 1 мкл у разных видов животных в различный период болезни колеблется в широких границах: у крупного рогатого скота — от 12 до 150 и выше, у лошадей — от 3,6 до 30, у свиней — от 15 до 240, у собак — от 20 до 320 тыс. В начале заболевания и в период ремиссии количество лейкоцитов у большинства больных животных находится в пределах нормы, а с развитием болезни возрастает.

Следует также отметить, что в самом начале развития заболевания нередко в лейкограмме отмечается сильная эозинофилия, процент эозино-филов достигает 25, что, возможно, связано с развитием аллергического состояния и нарушением регуляции гормональной системы (передней доли гипофиза и коры недпочечника). При сублейкемической, алейкемической стадии и при невысокой лейкемии отмечается резкий лимфоцитоз, достигающий 90 % и более (в норме у взрослого крупного рогатого скота меньше 70 % и у молодняка меньше 75%). Среди лимфоцитов много незрелых форм — лимфобластов и пролимфоцитов, попадаются лимфоциты с сегментированным или бобовидным ядром, вакуолизированной протоплазмой, голоядерные. Увеличивается число лимфоцитов, форм макро – и мезогенераций. Увеличение количества лимфоцитов часто свидетельствует об остроте процесса.

Особенностью крови при лимфолейкозе является обильное количество клеток лейколиза. Зернистые лейкоциты составляют небольшой процент (2—17); среди них могут обнаруживаться юные формы и миелоциты, что объясняется раздражением сохранившихся в костном мозге участков миелоидной ткани.

При алейкемической стадии лимфолейкоза количество лейкоцитов может быть нормальным и даже субнормальным (у крупного рогатого скота — от 2500 до 4500, у лошадей — до 3500 и у собак — до 9600 в 1 мкл). Среди основных симптомов заболевания часто отмечается довольно быстрое развитие анемии.

Количество кровяных пластинок непостоянно, в последней стадии заболевания оно чаще бывает понижено. Тромбоцитопения сопровождается явлениями геморрагического диатеза. Кровоизлияния локализуются в слизистых оболочках, в коже, мышцах, передней камере глаза, редко в центральной нервной системе. Иногда отмечаются упорные кровотечения из носа и желудочно-кишечного тракта. Кровь бледно-красного или шоколадно-бурого. цвета, медленно свертывается. У лошадей кровь после осаждения разделяется на три слоя: нижний — темно-красный (состоит из эритроцитов), верхний — желтоватый (из фибрина) и средний — серо-белый (из лейкоцитов). Кровь других животных при свертывании разделяется на два слоя, из которых нижний — фиолетовый — образуется эритроцитами, а верхний — серо-белый — фибрином и лейкоцитами.

При исследовании пунктата костного мозга обнаруживаются лимфоидная метаплазия с большим количеством лимфоидных элементов (70— 75%), резкое уменьшение клеток эритробластического и миелоидного ряда. В то же время процесс созревания и дифференцировки клеток нейтрофильного, эозинофильного и эритробластического рядов не нарушается.

Гепатоцитограмма, как правило, также дает резкую лимфоидную картину.

В пунктатах лимфоузлов отмечаются характерные явления для острого лимфолейкоза или для лимфолейкозов типа лимфосаркомы.

В молоке нередко отмечается повышенное количество лимфоидных клеток.

Необходимо учитывать, что при воспалительных процессах (пневмония, перитонит, мастит и т. д.) количество нейтрофилов может увеличиться до 40 % и более, что затушевывает лейкозный характер крови. После излечения вторичного заболевания в периферической крови восстанавливаются показатели, характерные для лимфолейкоза.

Течение. Лимфолейкоз при хроническом течении может длиться годами. Отчетливые клинические признаки проявляются лишь в конечной стадии болезни, когда наблюдается сильное увеличение всех лимфоузлов; эти признаки иногда развиваются несколько месяцев.

Болезнь завершается общим истощением, неподвижностью, потерей продуктивности, атонией желудочно-кишечного тракта, нефрозом и сердечно-сосудистой недостаточностью. У части коров лимфолейкоз заканчивается смертью, иногда внезапно от разрыва селезенки, а также паралича сердца, асфиксии.

Диагноз на заболевание лимфолейкозом ставят на основании комплекса исследований — клиническом, гематологическом, патологоанатомическом и гистологическом. Характерными клиническими признаками для лейкоза являются выраженное увеличение лимфоузлов, снижение упитанности и продуктивности, атакже симптомы, обусловленные сдавливанием сосудов, нервов и органов увеличенными лимфоузлами (пучеглазие, отек гортани, одышка, хромота, парез и др.). В крови увеличенное количество лимфоцитов и их молодых предстадий (пролимфоцитов и лимфобластов).

При гемоанализе у крупного рогатого скота рекомендуется пользоваться данными, опубликованными в таблице 7.

7. Количество лейкоцитов, в том числе лимфоцитов, в 1 мкл крови у здорового, подозреваемого в заболевании и больного лейкозом крупного рогатого скота

Здоровые животные Подозреваемые Больные лейкозом,

Возраст в заболевании, абсолютное

животного ——— :——- 1————— абсолютное коли- количество

(годы) лейкоциты, лимфоциты, чество лимфоцитов, лимфоцитов,

тыс., до %, до тыс. тыс., свыше

1—3 13 80 10,5—13 13

2—4 12 75 9—12 12

4—7 11 70 8—11 11

Больше 10 65 6,5—10 10

При выявлении в крови свыше 3% малодифференцированных форм клеток (лимфобластов, миелобластов) животные независимо от абсолютного содержания в крови лейкоцитов, в том числе лимфоцитов, должны рассматриваться как подозрительные по заболеванию лейкозом. К малодифференцированным элементам следует относить клетки с нежнозернистой или тонкопетлистой структурой ядра, часто с наличием нуклеолей.

Диагностика лейкоза на лейкемическом и гиперлейкемическом уровне менее затруднительна, так как нет ни одного заболевания, которое сопровождалось бы высоким лейкоцито-зом с преобладанием лимфоидных клеток. Наиболее трудно диагностировать лейкоз на сублейкемическом уровне, когда имеется наибольшее сходство с лейкемоидными реакциями.

Дифференциальный диагноз. Лимфолейкоз нужно отличать от других форм лейкозов. При миелолейкозе наряду с увеличением количества лейкоцитов отмечается преобладание нейтрофильных гранулоцитов в лейкограмме. В периферической крови появляются миелобласты, незрелые формы нейтрофилов: промиелоциты, миелоциты, метамиелоциты.

При опухолевых формах лимфолейкоза находят опухолевидные разрастания в различных участках тела — от горошины до больших размеров (рис. IV). Количество лейкоцитов удерживается чаще на алейкемическом или сублейкемическом уровне; в лейкограмме иногда 20—30% клеток, типа макрофагов.

Лимфоцитоз может быть при некоторых инфекционных и паразитарных болезнях, когда в процесс вовлекаются лимфоузлы. Это может быть при туберкулезе, пироплазмидозах (анаплазмозе, пироплазмозе).

Лейкемоидные реакции, сопровождающиеся лейкоцитозом, наблюдающиеся после прививок, в стадии выздоровления (например, при ящуре), имеют временный характер. В сомнительных случаях диагноз может быть подтвержден путем исследований пунктата костного мозга, печени, селезенки, лимфоузлов. Наряду с гематологическими методами используют также реакцию иммунодиффузии (РИД) и другие иммунологические методы.

Профилактика и меры борьбы. Эффективные методы лечения больных лейкозом животных не разработаны.

Для оздоровления хозяйств, неблагополучных по гемобластозам, а также для предупреждения их распространения рекомендуется система мероприятий. Больных лейкозом животных изолируют и отправляют на санитарную бойню. Животных, подозреваемых в заболевании, выделяют в особое помещение и подвергают повторному клинико-гематологическому исследованию через 2—3 мес. При необходимости производят диагностический убой отдельных животных. Если после трехкратного исследования будут установлены изменения в крови, характерные для больных или подозреваемых в заболевании, то их признают больными.

В хозяйствах, свободных от лейкоза, проводят клинико-гематологические исследования быков-производителей 2 раза в год, коров и нетелей — раз в год. Животных для племенных и продуктивных целей приобретают только в хозяйствах, благополучных по гемобластозам. В хозяйствах необходимо проводить селекционную работу по созданию семейств и линий животных, устойчивых к лейкозу. В каждом хозяйстве, на ферме, отделении или скотном дворе, неблагополучных по лейкозу, проводят комплекс мероприятий по ликвидации болезни согласно действующим инструкциям.

Необходимо строго соблюдать ветеринарно-санитарные правила при импорте и экспорте животных.

Читайте также: