Иммуногистохимический анализ рака почки


Иммуногистохимия, или иммуногистохимический анализ — исследование, во время которого в образцах ткани с помощью антител выявляют определенные молекулы. Этот метод диагностики нашел широкое применение в онкологии.


Немного теории и истории. Для того чтобы обнаруживать и уничтожать чужеродные вещества, иммунная система использует особые молекулы — антитела. Они отличаются специфичностью: каждое антитело может связываться строго с определенным антигеном.

В 1994 г. С. Тэйлор применил иммуногистохимический анализ, чтобы проверить 20 000 опухолей, и обнаружил, что диагнозы в половине случаев были ошибочными. Иммуногистохимия зарекомендовала себя как эффективный метод диагностики.

Какие задачи в онкологии помогает решать иммуногистохимия?

Иммуногистохимический анализ помогает врачам-онкологам:

  • Отнести злокачественную опухоль к тому или иному типу.
  • Выяснить, в каких генах опухолевых клеток произошли мутации, какие белки способствуют прогрессированию рака.
  • Выявить первичную опухоль и ее метастазы.
  • Определить, произошла ли злокачественная трансформация клеток.
  • Определить прогноз для пациента.
  • Разобраться, поможет ли в данном случае таргетная терапия.
  • Определить, чувствительны ли опухолевые клетки к химиотерапии, лучевой терапии.


Как это работает?

Иммуногистохимия бывает прямой и непрямой. В первом случае используют один вид антител, которые должны вступить в связь с определенной молекулой-мишенью. Если молекула-мишень присутствует в ткани, и реакция произошла, опухолевая ткань окрашивается:

  • Чаще всего к антителу присоединяют фермент, например, пероксидазу. Этот фермент катализирует химическую реакцию, которая приводит к изменению цвета.
  • Иногда к антителу присоединяют флюоресцин или родамин, при этом окрашивание выявляют с помощью флюоресцентной микроскопии.
  • всего применяют непрямую иммуногистохимию. При этом используют два антитела. Одно соединяется с антигеном, второе — с полученным комплексом антиген-антитело. Маркер, который вызовет изменение цвета, связывают со вторым антителом.

Непрямой метод имеет некоторые преимущества:

Как проводят исследование?

Для того чтобы выполнить иммуногистохимический анализ, нужно получить опухолевую ткань, то есть провести биопсию. В качестве материала можно использовать столбик ткани, полученный во время трепан-биопсии, фрагмент тканей или даже целый орган, удаленный во время операции.


Образец ткани фиксируют с помощью формальдегида (иногда используют метанол, ацетон и другие фиксаторы — это зависит от того, какой антиген нужно выявить, и реагирует ли он с теми или иными фиксаторами) и погружают в парафин. Парафинизация помогает законсервировать ткань, сохранить ее структуру на длительное время.

Затем ткань, помещенную в парафин, нарезают с помощью специального инструмента — микротома — на слои толщиной 3–5 мкм. Эти тонкие срезы помещают на стекло, покрытое, специальным клеем.

Некоторые образцы слишком чувствительны к реагентам, которые применяют во время вышеописанной процедуры. Их нельзя помещать в парафин. Такие ткани замораживают жидким азотом. Этим альтернативным методом пользуются редко, только в случае необходимости, так как у заморозки есть некоторые недостатки: она делает изображение под микроскопом не таким четким, требует специальных условий хранения образцов. Фиксацию ткани в таких случаях проводят уже после нанесения на стекло и размораживания, ацетоном или формальдегидом.

После того как срезы нанесены на стекло, из них нужно удалить весь парафин, иначе антитела не прореагируют с антигеном. Эта процедура называется депарафинизацией. Ее проводят с помощью ксилола. Затем выполняют еще некоторые подготовительные процедуры, чтобы антитела могли успешно прореагировать с нужными антигенами, и, наконец, проводят непосредственно иммуногистохимический анализ. Обработанную антителами ткань рассматривают под микроскопом, чтобы проверить, окрасилась ли она.

Какие молекулы-мишени выявляют во время иммуногистохимии?

Количество возможных мишеней измеряется сотнями. Перед исследованием врач должен понимать, что он ищет, и использовать соответствующие антитела. В онкологии мишенями являются опухолевые маркеры — вещества, которые в здоровых клетках отсутствуют вообще или присутствуют в значительно меньшем количестве. Вот некоторые примеры:

  • Рецепторы к эстрогенам и прогестерону помогают идентифицировать гормонально-позитивный рак молочной железы и разобраться, помогут ли женщине гормональные препараты.
  • Простатспецифический антиген (ПСА) имеет значение в диагностике рака простаты.
  • Альфа-фетопротеин — присутствует в гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени).
  • Цитокератины помогают в диагностике рака и некоторых сарком (злокачественных опухолей соединительной ткани).
  • Фермент CD10 (CALLA) связан с карциномой почек, лимфобластным лейкозом.


Какова роль иммуногистохимии в современной онкологии?

Иммуногистохимический анализ помогает изучить характеристики злокачественной опухоли, которые не могут выявить другие методы диагностики. Зачастую это играет важную роль в уточнении диагноза и назначении правильного лечения. Врач может определить, какие комбинации препаратов будут наиболее эффективны для конкретного больного, иными словами, реализуется принцип персонализированного лечения. Зачастую это помогает улучшить результаты, подобрать эффективное лечение для пациентов, которым не помогает стандартная терапия.

Маслякова Г.Н., Медведева А.В., Цмокалюк Е.Н., Воронцова С.В., Палатова Т.В.

Резюме

Ключевые слова

Статья

Введение. В последние годы в России и в мире появилась тенденция к увеличению частоты возникновения злокачественных новообразований, в том числе - почек, что привлекает внимание специалистов разных направлений (урологов, онкологов, патоморфологов). Злокачественные опухоли почек занимают 10-е место в раковом реестре среди всех новообразований, а наиболее распространенный в этой группе почечно-клеточный рак стоит на 3-м месте среди урологических опухолей [1,12]. Самой часто встречающейся опухолью почки считают злокачественную опухоль эпителиального происхождения - почечно-клеточный рак (ПКР) - 80-90% всех опухолей почек. ПКР имеет большое количество гистологических вариантов строения: наиболее часто встречается светлоклеточный вариант, реже встречаются папиллярный, хромофобный и другие варианты [1,12]. Иммуногистохимическое исследование в настоящее время считается одним из наиболее информативных, так как позволяет максимально точно определить как гистогенез опухоли, так и установить степень ее дифференцировки [5].

Целью нашего исследования явилось определение наиболее стабильных иммуногистохимических характеристик различных вариантов опухолей почек для своевременной и более точной диагностики новообразований этой локализации, что в перспективе позволяет прогнозировать течение опухоли.

Материалы и методы. Для достижения цели нашего исследования мы использовали следующие материалы и методы: данные историй болезни, морфологическое и иммуногистохимическое исследования операционного материала (опухолей почки), взятого от 487 больных, находящихся на лечении в урологических отделениях 3 ГКБ им. Р.В. Миротворцева г. Саратова за 5 лет с 2006 г. по 2010 г. Так как из 487 в 459 случаев у пациентов обнаруживалась злокачественная опухоль почки, что составляет 94,3% всех ренальных опухолевых процессов, то при дальнейшем описании опухолей почек мы будем упоминать злокачественное эпителиальное образование - почечно-клеточный рак.

Результаты. Согласно литературным данным, средний возраст, при котором выявляются злокачественные опухоли в почках, составляет 62 года [6,7,9], однако, при анализе историй болезни в нашем исследовании мы отмечали возникновение рака почек в более раннем возрасте – 57 лет. Некоторые случаи ПКР регистрировались в 30-35 лет и даже в более молодом возрасте. При этом нами было отмечено, что у лиц молодого возраста чаще выявляются редкие варианты ПКР (хромофобный, папиллярный, веретеноклеточный, мультилокулярный поликистозный).

Анализ литературных данных показал, что мужчины поражаются ПКР практически в 2 раза чаще женщин [9,10,12], однако в нашем исследовании опухоли почек одинаково часто диагностировались как у мужчин (52%), так и женщин (48%). Возможно, это связано с тем, что в литературе анализируется в основном наиболее распространенный почечно-клеточный рак, который действительно чаще встречается у мужчин. Если учитывать всю совокупность опухолей, то у женщин чаще развиваются редкие формы ПКР, а также доброкачественные мезенхимальные новообразования в почках.

В последние годы все чаще опухоли почек (особенно злокачественные) диагностируются поздно, когда патологический процесс уже имеет признаки агрессивного роста: прорастание опухоли в сосуды, что в дальнейшем приводит к образованию метастазов и сокращает сроки выживаемости больных [6,7,11]. В нашем исследовании было выявлено, что из 459 злокачественных новообразований почек, признаки инвазии имели 320, что составляет 69,7% всех злокачественных опухолей.

Прогноз злокачественных опухолей в почке, как и при опухолях других локализаций, зависит от наличия или отсутствия регионарных и отдаленных метастазов, от стадии и гистологического варианта заболевания, которые невозможно дифференцировать без морфологического исследования [2,3,4,8,13,14]. Часто на основании обычного гистологического исследования с использованием окраски гематоксилином и эозином возможно поставить патогистологический диагноз, на основании которого врачи-урологи назначают или корректируют дальнейшее лечение и составляют прогноз опухолевого процесса. Однако в последние годы все чаще встречаются сложные случаи, когда опухоль имеет настолько низкую дифференцировку, что становится трудно или даже невозможно поставить гистологический диагноз на основании обычного морфологического исследования, иногда тяжело высказаться даже о происхождении опухоли эпителиальный или мезенхимальный она имеет характер. В таких случаях на помощь приходит иммуногистохимическое исследование [5]. Чтобы выявить эпителиальное происхождение опухоли (почечно-клеточный рак), мы использовали группу цитокератинов (СК). Нами установлено, что СК 17, СК 18, СК 19, СК 20 дают более интенсивную реакцию на рак почки, чем СК 56, СК 7, СК 1013. Кроме того, было отмечено, что при различной дифференцировке (G) светлоклеточного ПКР интенсивность реагирования цитокератинов была различной (табл.1).

Каждый гистологический вариант ПКР дает своеобразную комбинацию и интенсивность окрашивания как СК, так и другими антителами (табл.2). Эпителиальный характер опухоли почек позволяют подтвердить такие антитела как рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) и AMACR. Известно, что AMACR - это специфический маркер для выявления рака предстательной железы, однако он дает реакцию и на злокачественные эпителиальные опухоли других локализаций [5].

Дифференцировку опухоли помогают установить антитела пролиферации и апоптоза: Р53, Р63, Ki-67, PCNA: чем интенсивнее экспрессия маркеров пролиферации, тем более агрессивно ведет себя опухоль и соответственно имеет более низкую дифференцировку. Соответственно для каждой опухоли почки, так же как и для каждого варианта ПКР имеется своя собственная оригинальная комбинация и интенсивность окраски антителами.

После проведения иммуногистохимических реакций в нашем исследовании были скорректированы диагнозы для некоторых опухолей и даже несколько опухолей были перенесены из одной группы в другую. Так, изначально после проведения гистологического исследования с помощью красителя гематоксилина и эозина в группе мультилокулярного поликистозного варианта ПКР находилось 13 случаев. Известно, что этот вариант почечно-клеточного рака наиболее благоприятен в плане прогноза – чаще имеет высокую дифференцировку и никогда не дает метастазов [13]. Но в одном из 13 случаев после проведения иммуногистохимического исследования было отмечено, что дифференцировка опухоли более низкая и после тщательного обследования у больного были обнаружены метастазы рака почки в регионарные лимфатические узлы. После проведения иммуногистохимического исследования в этом случае вместо первоначально поставленного диагноза мультилокулярного поликистозного варианта ПКР был выставлен диагноз светлоклеточного ПКР с кистозной трансформацией, больному назначена дополнительная иммунотерапия.

Заключение. Таким образом, иммуногистохимический метод исследования в диагностике опухолей почек играет важное диагностическое и прогностическое значение. Оно может оказать помощь врачам патогистологам в сложных и неоднозначных случаях правильно диагностировать ренальные новообразования. Это даст возможность назначить правильное лечение и прогнозировать течение злокачественного роста опухоли у больных.

Литература

Таблицы

Таблица 1. Сравнительная характеристика реагирования итокератинов при различной степени дифференцировки светлоклеточного почечно-клеточного рака





Иммуногистохимические исследования или иммуногистохимия (сокращенно ИГХ) — это анализ, который применяется для диагностики различных заболеваний и нашел особенно широкое применение в онкологии. С помощью него обнаруживают маркеры — вещества (белки), которые в больших количествах вырабатываются опухолевыми клетками. Это помогает врачам решать различные диагностические задачи.

Суть исследования ИГХ в том, что к образцу опухолевой ткани добавляют антитела, которые распознают искомое вещество как антиген и связываются с ним. Благодаря этому соответствующие участки опухолевой ткани окрашиваются, и их можно обнаружить при исследовании под микроскопом.



Для чего применяют анализ ИГХ в онкологии?

иммуногистохимия помогает решать следующие задачи:

Как проводят анализ?

Для того чтобы провести исследование на различные опухолевые маркеры, врач должен выполнить биопсию — получить фрагмент ткани злокачественной опухоли и отправить его в лабораторию. Там материал особым образом подготавливают (с помощью парафинизации или заморозки), обрабатывают соответствующими антителами и изучают под микроскопом. Иммуногистохимия опухолей позволяет не только выявить искомое вещество, но и оценить его локализацию в ткани, судить о количестве.

После того как исследование завершено, лечащий врач получает из лаборатории заключение. Сроки проведения анализа установлены пунктом 24 Приказа Минздрава России № 179н от 24 марта 2016 г. Если опухолевую ткань исследуют на 5 разных маркеров или меньшее количество, результат должен быть готов в течение одной недели, если на большее количество — в течение 15 дней.


При каких типах рака чаще всего применяют иммуногистохимические исследования?

Иммуногистохимическое исследование биопсийного материала помогает выявлять разные виды опухолевых маркеров. Вот некоторые:

  • При раке молочной железы: рецепторы к гормонам (эстрогенам, прогестерону), HER2.
  • При карциноидах (нейроэндокринных опухолях): рецепторы к гормону соматостатину типов 2А и 5.
  • При немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) и некоторых других типах рака: , ROS1, ALK.
  • При раке толстой кишки и некоторых других злокачественных опухолях: микросателлитная нестабильность.

Оставьте свой номер телефона

При раке молочной железы самое большое значение имеют три белка: рецептор к эстрогенам, рецептор к прогестерону и HER2. Присутствие этих молекул на поверхности раковых клеток делает их чувствительными к определенным лекарственным препаратам. Если по результатам иммуногистохимии ни одна из этих молекул не обнаружена, диагностируют тройной негативный рак молочной железы. Он отличается более агрессивным течением, его сложнее лечить.

В лаборатории содержание этих веществ в опухолевых клетках оценивают с помощью специальных шкал:


При раке легкого с помощью иммуногистохимии можно уточнить гистологический тип злокачественной опухоли. Разные подтипы клеток при немелкоклеточном раке легкого могут экспрессировать различные маркеры:

  • Большинство аденокарцином (злокачественные опухоли из клеток, вырабатывающих слизь): цитокератин 7 (СК7), тиреоидный транскрипционный (), опухолевый белок p63, цитокератин 20 (CK20), опухолевый белок p63, .
  • Плоскоклеточный рак (из плоского эпителия, который выстилает дыхательные пути): CK5/6, p63, 34bE12. и CK7 при плоскоклеточном раке легкого обычно не обнаруживают.

  • EGFR — рецептор эпидермального фактора роста, который находится на поверхности опухолевых клеток и заставляет их бесконтрольно размножаться. В данном случае могут быть эффективны таргетные препараты: эрлотиниб (Тарцева), афатиниб (Гилотриф), гефитиниб (Иресса), осимертиниб (Тагриссо), дакомитиниб (Визимпро), нецитумумаб (Portrazza).
  • ALK — мутация в этом гене встречается при немелкоклеточном раке легкого примерно в 5% случаев. Применяют таргетные препараты: кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), алектиниб (Алекенза), бригатиниб (Алунбриг), лорлатиниб (Лорбрена).
  • ROS1 — ген, мутации в котором возникают при немелкоклеточном раке легкого в 1–2% случаев. При этом помогают такие таргетные препараты, как кризотиниб (Ксалкори), церитиниб (Зикадия), лорлатиниб (Лорбрена), энтректиниб (Розлитрек).
  • — белок, который связывается с молекулой PD1 на поверхности , подавляет их активность, мешает атаковать опухолевые клетки. Если в опухолевой ткани обнаружен этот маркер, могут быть назначены иммунопрепараты из группы ингибиторов контрольных точек.

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело.

При иммуногистохимическом исследовании используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами - антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.




По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате биопсии или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании, это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

ER и PR - протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны - эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы. Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от 0 до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

Her2Neu - это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это - ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии. Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

  • 0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
  • 3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются таргетные препараты Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб). Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.



Ki-67 - это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение. И наоборот - чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

Белок p53 - это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке - активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется - индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию.


VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF - для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения таргетной терапии такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

Чаще всего определение гиперэкспрессии белка PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2 необходимо при меланоме, немелкоклеточном раке легкого, раке желудка и раке почки.

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH). При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.

Важнейшим пунктом при диагностике раковых заболеваний является иммуногистохимическое исследование. Ежедневно в организм человека проникают микроорганизмы, способные запустить развитие патологического процесса. Защитные силы противостоят этому, образуя антитела. Эта реакция и легла в основу создания ИГХ-исследования.


Суть метода

Данный способ диагностики раковых заболеваний является наиболее современным и достоверным. В процессе развития опухолевого процесса образуются чужеродные организму белки – антигены. В это же время иммунная система вырабатывает антитела, главная цель которых – предотвращение размножения патогенных микроорганизмов.

Задачей иммуногистохимического исследования является своевременное выявление раковых клеток. Для этого биологический материал пациента обрабатывается множеством антител, после чего тщательно изучается под микроскопом. Если данные белковые соединения свяжутся с опухолевыми клетками, будет визуализироваться их свечение. Возникновение эффекта флюоресценции и свидетельствует о наличии в организме раковых клеток.

На сегодняшний день в распоряжении специалистов, осуществляющих ИГХ-исследование, имеются практически все антитела к различным видам опухолей, что служит залогом получения достоверных результатов.


Возможности

Современный вид диагностики позволяет определить:

  • распространение опухолевого процесса;
  • скорость роста злокачественных новообразований;
  • вид опухоли;
  • источник метастазов;
  • уровень злокачественности.

Кроме того, с помощью иммуногистохимического исследования может оцениваться степень эффективности лечения раковых заболеваний.

Показания и противопоказания

С помощью данного способа существует возможность изучения любых тканей человеческого организма. Главным основанием для назначения иммуногистохимического исследования является подозрение о наличии злокачественного образования.

В этом случае метод используется для:

  • определения вида опухоли и области её локализации;
  • обнаружения метастазов;
  • оценки активности опухолевого процесса;
  • выявления патологических микроорганизмов.

Также анализ эффективен при проблемах с зачатием.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия показано при:

  • бесплодии;
  • заболеваниях матки;
  • наличии патологий в органах репродуктивной системы;
  • невынашивании беременности;
  • хронических заболеваниях эндометрия.

Кроме того, ИГХ-исследование назначается пациенткам, у которых не наступает беременность даже после нескольких попыток экстракорпорального оплодотворения. Метод позволяет определить, имеются ли в организме клетки, снижающие вероятность зачатия.

Противопоказаний к ИГХ-исследованию не существует. Единственным фактором, из-за которого невозможно провести анализ, является непреодолимая сложность при заборе биоматериала пациента.


Как проводится

В первую очередь методом биопсии получают образец ткани больного. Реже забор материала осуществляется в процессе эндоскопического обследования или хирургического вмешательства. Способ получения образца зависит от вида опухоли и её локализации.

Важным нюансом является то, что забор материала при первичном обследовании должен осуществляться до начала лечения. В противном случае результаты исследования могут быть искажены.

После забора биоматериала его помещают в формалин и отправляют в лабораторию, где он подвергается следующей обработке:

  1. Образец ткани обезжиривается и заливается парафином. В данном виде биологический материал может храниться очень долго, за счёт чего ИГХ-исследование может быть проведено повторно.
  2. С образца собирают несколько тонких срезов и перемещают их на специальные стёкла.
  3. На них биоматериал окрашивается растворами различных антител. На данном этапе может применяться как малая панель, так и большая. В первом случае изучаются реакции после использования 5 видов антител, во втором – до нескольких десятков.
  4. В процессе иммуногистохимического исследования при раке любого органа появляется эффект флюоресценции, что даёт возможность специалисту определить вид злокачественных клеток.


Интерпретация результатов

Как правило, заключение готово через 7–15 дней. Срок зависит от вида используемой панели (малой или большой). Расширенный способ занимает больше времени.

Изучением срезов биоматериала занимается патологоанатом, имеющий знания и навыки (подтверждённые официальным документом), необходимые для проведения анализа.

При интерпретации результатов особое внимание обращается на показатель Ki-67. Именно он предоставляет информацию о степени злокачественности процесса. Например, если результат показателя после проведения иммуногистохимического исследования при раке молочной железы составляет не более 15%, считается, что прогноз более чем благоприятный. Уровень в 30% свидетельствует об активности опухолевого процесса, т.е. о быстрой скорости его развития. Как правило, она останавливается после курса химиотерапии.

По некоторым статистическим данным, если Ki-67 составляет менее 10%, итог заболевания будет благоприятным (в 95% случаев). Отметка в 90% и выше означает почти 100%-ный летальный исход.

Кроме показателя злокачественности, в заключении указываются:

  • антитела, к которым выявлено сходство (тропность);
  • вид раковых клеток, их количественное значение.

Важно понимать, что точный диагноз ставится после получения и изучения информации, собранной посредством всех проведённых диагностических процедур. Несмотря на то, что ИГХ-анализ считается наиболее информативным методом по сравнению с гистологией, иногда необходимо использовать оба способа. Расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается исключительно онколог.


В заключение

В современной медицине особое внимание уделяется диагностике раковых заболеваний. Наиболее современным и информативным методом считается иммуногистохимическое исследование. С его помощью выявляется не только наличие раковых клеток, но и определяется их вид и скорость развития злокачественного процесса. Кроме того, на основании результатов производится оценка эффективности назначенного лечения.

Читайте также: