C-kit мутация при меланоме

Меланома (или кожный рак) является онкологическим образованием, для которого характерны быстрое протекание, частые рецидивы и высокая вероятность метастазирования (причем в любые органы).

По этим причинам раннее диагностирование и квалифицированная помощь соответствующих специалистов – это залог успешного лечения. Мутация меланомы бывает: BRAF; NRAS; c-Kit, пределение которых позволяет понять механизм прогрессирования патологии и подобрать действенные лекарства.

Существует 3 наиболее распространенных мутации меланомы:

Мутация типа БРАФ

Данный вид диагностируется чаще всего (примерно в 60% случаев). Патологические изменения провоцирует ген BRAF, который отвечает за один из внутриклеточных сигнальных путей. При нормальном состоянии данный путь неактивен.

Но в случае проявления мутации меланомы БРАФ начинает выработку особого белка, провоцирующего разрастание клеток и появление болезнетворных образований. Мутация меланомы БРАФ называется позитивной.

Диагностирование положительно сказывается на лечебном прогнозе, ведь для устранения таких меланом уже разработаны специальные средства, блокирующие видоизмененный ген. Нужно помнить о том, что раннее выявление обеспечивает постановку более точного диагноза, а это повышает шансы на положительный исход.

Отклонение типа c-Kit

Данная мутация меланомы распространена меньше (ее диагностируют лишь в 15% случаев). Как правило, c-Kit находят в меланомах, поражающих ладони, ногти, слизистую оболочку носоглотки, прямой кишки, а также половых органов.

Иногда мутация c-Kit сочетается с патологией типа BRAF. Для устранения этого отклонения прописываются специальные средства-ингибиторы c-Kit. Терапия дает положительный результат примерно в каждом 3-м случае.

Отклонение типа НРАС

Этот тип патологии диагностируется приблизительно в четверти случаев. В комбинации с вышеупомянутыми патологиями он присутствует крайне редко. Белок NRAS активизирует патологическое разрастание клетки. Именно поэтому при его выявлении усилия направляются на блокировку выработки протеин-киназы.

Что касается лекарственных средств, используемых при устранении этого отклонения, то по многим из них еще ведутся исследования. Но их результаты позволяют делать хороший прогноз: у каждого 5-го пациента прогрессирование патологии значительно замедляется.

Почему стоит обращаться к нам?

При наличии меланомы крайне важно своевременно выявить патологический процесс и осуществить лечение (используя и традиционные методики, и более современные, которые пока не задействуются в других мед. учреждениях).

К услугам пациентов мы предоставляем:

• огромное количество методов раннего диагностирования, которые не используются в других клиниках в силу отсутствия специализированного оборудования, а также сертификации нужных медикаментов;
• прием у опытнейших дерматоонкологов – специалистов узкой направленности;
• хирургическое лечение, подразумевающее использование новых методик, а также иммунной и таргентной терапии;
• мониторинг больных с поздней стадией патологии.

Обратившись к нам, вы получите высокоэффективные методы лечения меланомы, основанные на биологических вакцинах, которые помогут перевести болезнь в хроническую форму и значительно повысит качество и продолжительность жизни.

Для подбора эффективного метода лечения вы можете обратиться за

- методы инновационной терапии;
- возможности участия в экспериментальной терапии;
- как получить квоту на бесплатное лечение в онкоцентр;
- организационные вопросы.

После консультации пациенту назначается день и время прибытия на лечение, отделение терапии, по возможности назначается лечащий доктор.

Рак кожи, более известный как меланома, являющаяся злокачественным новообразованием, протекает крайне быстро. При меланоме довольно часто возникают рецидивы, а метастазы проникают практически во все органы. Чтобы препятствовать скоротечному развитию данного заболевания просто необходимо раннее диагностирование, профессиональная и своевременная терапия в медицинских учреждениях, которые специализируются на лечении онкологии.

Меланома довольно часто мутирует. И поэтому в нашем лечебном учреждении в практику обязательного обследования входит и анализ на различные мутации меланомы. Определить наличие подобных мутаций и, непосредственно, их видов крайне важно. Во-первых, данный анализ позволяет оценить механизм развития злокачественных процессов в клетке. А, во-вторых, благодаря анализу подбираются те препараты, которые будут оказывать наиболее эффективное действие при лечении меланомы с определённым видом мутации. Происходит, так называемая, таргентная терапия.

Наиболее часто встречающихся мутаций меланомы три:

BRAF;
c-Kit;
NRAS;

Мутация BRAF

Этот вид мутации меланомы встречается чаще всего. Его выявляют примерно у 40-70% больных меланомой. Мутация BRAF имеет такое название в связи с тем, что именно ген BRAF, являющийся ответственным за один из сигнальных путей в клетках, когда происходит мутация, вырабатывает особый белок. Именно этот белок выступает своеобразным провокатором, из-за которого начинается рост клеток и появление новообразований. Необходимо сказать, что в нормальном состоянии путь, за который отвечает ген BRAF, является неактивным. Мутация BRAF, таким образом, выявленная в меланоме, имеет название – BRAF-позитивная. Выявить мутацию очень важно, так как она может положительно повлиять на прогноз лечения меланомы. Для BRAF-позитивной мутации разработаны особые препараты. Они выступают в качестве блокираторов мутирующего гена. Шансы на благоприятный исход очень сильно зависят от ранней диагностики и точности определения степени мутации.

Мутация c-Kit

Этот вид мутации встречается не так часто, как мутация BRAF. Его выявляют у 6-15% больных. Kit-мутации, как правило, выявляются в меланомах, которые находятся на слизистых половых органов, прямой кишки, носоглотки и носовых ходов. Выявляется мутация c-Kit и в меланомах, которые расположены на ногтях и ладонях. Кстати, меланома c-Kit может проявляться в сочетании с мутацией BRAF. При выявлении данного вида мутации назначают для лечения препараты-ингибиторы c-Kit. В 30% случаев терапия имеет положительный эффект.

Мутация NRAS

Данный вид мутации выявляется в 15-20% случаев. Данный вид мутации может выступать в сочетании с другими видами мутаций крайне редко. Также как и в случае с геном BRAF, NRAS вырабатывает белок, который является активатором злокачественного роста клетки. Самое главное, что стоит предпринять при выявлении данного вида мутации, это заняться блокировкой вырабатывания протеин-киназы. Препараты, которые следует применять при лечении мутации NRAS, всё ещё проходят клинические исследования. Однако даже на этой стадии положительный результат обнаруживается у 20% больных, которые подвергаются терапии данными препаратами. Выявлено, что процесс развития опухоли при лечении замедляется.

Наша клиника предлагает пациентам:

Различные методы раннего диагностирования болезни. Мы также проводим и диагностические операции. У нас есть всё необходимое оборудование и лучшие препараты.
Операбельное лечение, с использованием самых новых и щадящих методов.
Иммунотерапию.
Таргентную терапию, с применением самых современных лекарств.
Наблюдение у узкоспециализированных врачей – дерматоонкологов, которые имеют большой опыт именно в лечении рака кожи (меланомы).
Лечение больных даже на самых поздних стадиях заболевания.

Белок KIT является рецептором тирозинкиназы (РТК), которая играет важную роль в кроветворении. KIT необходим для клеточного роста и деления (пролиферации) множения клеток делением) и миграции клеток нервного гребня. c-kit присутствует на поверхности интерстициальных клеток Кахаля, клеток костного мозга, тучных клеток, меланоцитов и некоторых других

Мутация гена KIT(c-Kit, CD117) приводит к аномальной сигнализации и пролиферации клеток, несущих мутантный белок. KIT мутации связаны с рядом злокачественных новообразований, в том числе острой миелоидной лейкемией (ОМЛ), желудочно-кишечными стромальными опухолями и карциномой яичек.

Мутация гена KIT(c-Kit, CD117) связана с рядом злокачественных новообразований, в том числе острой миелоидной лейкемией (ОМЛ), желудочно-кишечными стромальными опухолями,карциномой яичек и проч.

Чтобы верно подобрать тактику лечения и соответствующие препараты необходимо знать, какая именно генная мутация произошла в организме человека.

Ряд болезней, ассоциированных с мутацией c-Kit:

23% всеч случаев меланом
70-90% случаев системного мастоцитоза
85% случаев ГИСО

Меланома (рак кожи)

Это злокачественное новообразование, характеризующееся быстрым течением заболевания, частыми рецидивами и проникновением метастаз почти во все органы. К неконтролируемому размножению клеток и образованию меланомы может привести c-Kit мутация меланоцита.

Наиболее часто c-Kit-мутация присутствует в меланомах:

расположенных на ладонях
локализованных на ногтях
на слизистых оболочках половых органов
на слизистых оболочках прямой кишки
на слизистой носовых ходов и носоглотки
появившихся на постоянно облучаемых ультрафиолетом участках кожи

Выявление патологий в гене c-Kit позволяет предельно точно подобрать лечение при строго определённом виде меланомы.

ГИСО (гастроинтестинальная стромальная опухоль)

Наиболее распространённая опухоль соединительной ткани желудочно-кишечного тракта. Зоны поражения:

желудок (70% случаев)
тонкая кишка (20% случаев)
пищевод (менее 10% случаев)

В подавляющем большинстве случаев заболевания именно мутация c-Kit является первым звеном процесса активации роста злокачественной опухоли.

Мастоцитоз

Заболевание системы крови. Характеризуется массивным образованием особых клеток - мастоцитов, тканевых базофилов или лаброцитов. Эти клетки пропитывают собой кожу и внутренние органы.

Кожная форма. Чаще встречается у детей (обычно до 2 лет,) большая часть случаев болезни самопроизвольно проходит к подростковому возрасту.
Системный мастоцитоз. Болезнь взрослых, которая протекает тяжелее и не имеет склонности к самоустранению.

При системном мастоцитозе внутренние органы пропитываются тучными клетками параллельно с поражением кожи или без него.

В 70-90% случаев рост тучных клеток объясняется наиболее распространенной мутацией KIT с заменой аспарагиновой кислоты в положении 816 с валин (D816V).

Чаще всего поражаются:

печень (увеличение, уплотнение, фиброзные узлы)
костная система (образование участков остеопороза и остеосклероза), болью в костях
лимфоузлы (увеличение и болезненность)
пищеварительный тракт (диарея, язвенные поражения)
селезенка(резкое увеличение)
костный мозг (замещение нормальных клеток на мастоциты, либо поражение костного мозга с формированием лейкоза)
нервная ткань

При кожной форме прогноз болезни довольно благоприятный, при системной форме - зависимости от количества пораженных органов и степени поражения, а при тучноклеточном лейкозе – крайне неблагоприятный.

Диагностировать c-Kit изменения крайне важно, чтобы составить план терапии на основе препаратов, специально на него воздействующих.

Дата создания: Октябрь 26, 2017

Дата изменения: Ноябрь 16, 2017

Виды мутаций меланомы

Меланома (рак кожи) — злокачественное новообразование, характеризующееся быстрым течением заболевания, часто возникающими рецидивами и способностью метастазировать почти во все органы. Поэтому ранняя диагностика, адекватная и своевременная терапия в клиниках, специализирующихся на лечении онкологических заболеваний, — необходимое условие на пути к излечению.

В число обязательных обследований в нашей клинике входит анализ на наличие в меланоме различных мутаций. Определение наличия мутации и ее вида очень важно: оно дает представление о механизме развития злокачественных процессов в клетке и предоставляет возможность подобрать препараты, наиболее действенные в лечении меланомы с конкретной мутацией (таргентная терапия).

Выделяют три наиболее часто встречающиеся мутации:

BRAF
c-Kit
NRAS

Мутация BRAF

Этот тип мутации обнаруживается наиболее часто: у 40–70% больных раком кожи. Патологические изменения связаны с геном BRAF, ответственным за один из сигнальных путей в клетках. В нормальном состоянии этот путь неактивен. При возникновении мутации ген BRAF начинает вырабатывать особый белок, который провоцирует рост клеток и появление новообразований.

Меланомы с обнаруженной мутацией BRAF называются BRAF-позитивными. Выявление мутации положительно влияет на прогноз лечения — для терапии BRAF-позитивных меланом разработаны специальные препараты, которые блокируют мутирующий ген. Важно помнить, что чем ранее выполнено исследование и чем точнее определена степень мутации, тем больше шансов на благоприятный исход.

Мутация c-Kit

Этот вид мутации не так распространен: чаще всего указывается диапазон от 6 до 15% случаев выявления патологического изменения гена. Наиболее часто c-Kit-мутация определяется в меланомах, расположенных на ладонях, ногтях, а также на слизистых оболочках^ половых органов, прямой кишки, носовых ходов и носоглотки. Меланома c-Kit может сочетаться с BRAF-мутацией. При положительном результате исследования назначаются препараты-ингибиторы c-Kit, ответ на терапию отмечается в 30% случаев.

Мутация NRAS

Мутация NRAS определяется в 15–25 % случаев. Очень редко может присутствовать в комплексе с другими мутациями. Выработка белка NRAS активизирует специфический (злокачественный) рост клетки, поэтому основная задача при обнаружении NRAS-мутации — блокировать выработку протеин-киназы. По препаратам, применяющимся в этом случае, еще ведутся клинические исследования, однако уже сегодня имеются обнадеживающие результаты: у 20% пациентов, получавших терапию соответствующими лекарствами, отмечено уменьшение развития опухоли.

Преимущества прохождения диагностики и лечения меланомы в Израиле

К нам за помощью обращаются пациенты из разных стран, и этому есть вполне обоснованные причины. Как уже говорилось выше, при меланоме (и других онкологических заболеваниях) очень важно вовремя диагностировать процесс и провести лечение при помощи как традиционных средств, так и современных препаратов, зачастую не применяющихся в других клиниках.

Мы предлагаем своим пациентам:

Большое количество методов ранней диагностики (в том числе диагностические операции), не применяемых в других странах из-за отсутствия соответствующего оборудования и сертификации необходимых препаратов.
Прием у дерматоонкологов — врачей с узкой специализацией и опытом в лечении именно меланомы.
Хирургическое лечение при помощи новейших, минимально травмирующих методов, иммунотерапию, таргентную терапию современными лекарствами.
Ведение пациентов на поздней стадии заболевания.

И, конечно же, при обращении в нашу клинику мы гарантируем доброжелательное отношение персонала, комфортные условия и создание психологического климата, помогающего в борьбе с болезнью.

Метастатическая меланома характеризуется неблагоприятным прогнозом. Стандартная химиотерапия принципиально не влияет на общую продолжительность жизни пациентов. Эффективность однокомпонентных режимов (монохимиотерапии) не превышает 10–15%. Увеличить эффективность терапии и общую продолжительность жизни больных метастатической меланомой можно за счет индивидуализации лекарственного лечения – определения молекулярно-генетических изменений в опухоли и назначения терапии на основании полученных результатов. В статье проанализированы подходы к персонализированной лекарственной терапии пациентов с метастатической меланомой и мутацией c-KIT.
В рамках статьи вопросы эффективности иммуноонкологической терапии у данной категории пациентов не рассматриваются.

Меланома кожи – опухоль нейроэктодермального происхождения, возникающая в результате злокачественной трансформации меланоцитов, расположенных преимущественно в коже. Однако встречаются и более редкие локализации – слизистые оболочки и увеальный тракт. В большинстве стран Евросоюза, а также в США и Австралии отмечается неуклонный рост заболеваемости меланомой кожи. Аналогичная тенденция наблюдается и в России. Так, по данным В.В. Старинского и соавт., в 2013 г. в нашей стране было зарегистрировано 8974 новых случая меланомы кожи, в 2015 г. – 9384. Причем доля больных, у которых заболевание выявлено на III–IV стадии, составляет около 20–25% [1–2]. Таким образом, у каждого четвертого пациента с вновь выявленной меланомой кожи имеют место метастатическая или местнораспространенная неоперабельная форма и неблагоприятный прогноз течения заболевания.

Достижения в области молекулярно-генетических исследований позволили охарактеризовать молекулярные механизмы, лежащие в основе многих злокачественных новообразований, и найти новые подходы к терапии и диагностике.

Меланома – молекулярно-гетерогенное заболевание с различными молекулярно-генетическими изменениями, зависящими от клинических и биологических факторов. Так, для меланомы, расположенной на участках кожи, не подверженных воздействию солнечных лучей, характерно наличие мутации в гене BRAF. Наиболее распространенной мутацией в гене BRAF (около 90%) при меланоме кожи считается мутация V600E – замена аминокислоты валина глутамином в 600-м кодоне. Как следствие – увеличение киназной активности фермента BRAF по отношению к нижестоящей киназе MEK во внутриклеточном пути передачи сигнала [3]. Помимо V600E в гене BRAF встречаются и другие виды мутаций (V600K, V600R, V600D), которые также повышают киназную активность фермента. Существует ряд препаратов, блокирующих данный путь и значительно увеличивающих общую продолжительность жизни пациентов с метастатической BRAF V600-позитивной меланомой. Речь идет об ингибиторах BRAF вемурафенибе и дабрафенибе, ингибиторах MEK траметинибе и кобиметинибе, а также их комбинации (вемурафениб + кобиметиниб, дабрафениб + траметиниб).

При меланоме, локализованной на слизистой оболочке, а также при акральных формах и меланоме кожи, возникшей на фоне хронического повреждения от воздействия солнечных лучей, J.A. Curtin и соавт. впервые описали активирующие мутации в тирозинкиназном рецепторе KIT [4–6]. Авторы исследовали 102 первичные меланомы. В 38 случаях имела место меланома слизистой локализации, в 28 – акральной, в 18 – меланома кожи с хроническим повреждением от воздействия солнечных лучей, в 18 – без такового [4]. Мутации и/или увеличение числа копий в гене KIT были выявлены в 39% случаев при меланоме слизистой локализации, в 36% – при акральной меланоме и в 28% – при меланоме кожи с хроническим повреждением от воздействия солнечных лучей. Вместе с тем при меланоме кожи без такого повреждения подобных изменений не зарегистрировано.

Исследование эффективности ингибиторов KIT при меланоме

Одним из основных исследуемых препаратов был иматиниб. Обобщенные результаты исследований II фазы представлены в табл. 1 [7–10]. Так, в исследовании II фазы с участием 43 пациентов с мутацией или амплификацией KIT в 23% случаев зарегистрирован объективный ответ (полный или частичный) [8]. В другом исследовании длительный ответ имел место у 16% пациентов (когорта из 51 пациента с мутацией или амплификацией гена KIT) [9]. Причем в указанных исследованиях мутации в 11-м и 13-м экзонах гена KIT (особенно мутация L576P в 11-м экзоне) были связаны с наилучшей частотой ответа.

В данной популяции пациентов изучали также сунитиниб и нилотиниб. В таблице 2 указаны исследования и препараты, эффективность которых изучали у пациентов с метастатической меланомой с мутацией/амплификацией гена KIT.

Нилотиниб, ингибитор тирозинкиназы, применяемый при рефрактерном к иматинибу хроническом миелолейкозе, является еще одним перспективным препаратом у больных метастатической меланомой с мутацией KIT.

Результаты исследования с участием 90 пациентов, посвященного оценке эффективности сунитиниба, были опубликованы в 2012 г. Мутации в гене KIT отмечались в 11% случаев. У десяти пациентов можно было оценить эффективность терапии. Был зарегистрирован один полный ответ длительностью 15 месяцев, два частичных ответа длительностью один и семь месяцев соответственно. Только у одного пациента зафиксировано прогрессирование заболевания. Из шести пациентов с амплификацией и гиперэкспрессией гена KIT лишь у одного зарегистрирован частичный ответ [11].

На конгрессе Американского общества клинической онкологии (American Society of Clinical Oncology) в 2016 г. K. Kalinsky представил результаты II фазы исследования дазатиниба у пациентов с метастатической меланомой слизистой и акральной локализации (ECOG-ACRIN Cancer Research Group). Это исследование проводилось в два этапа. Первый предполагал участие пациентов с мутацией и без мутации гена KIT с меланомой слизистой и акральной локализации, а также меланомой кожи с хроническим повреждением от воздействия солнечных лучей (n = 57). На этом этапе перед исследователями стояла основная задача – оценить частоту объективного ответа среди всех пациентов.

В ходе исследования все пациенты получали дазатиниб 70 мг перорально два раза в сутки. Частота объективного ответа у пациентов без мутации в гене KIT составила 5,9%. По завершении первого этапа исследования стало очевидно, что во втором этапе должны участвовать только пациенты с мутацией в гене KIT (n = 30). Набор пациентов в исследование продолжался с 2011 по 2015 г. В январе 2016 г. у 16/24 пациентов отмечалось прогрессирование заболевания (медиана выживаемости без прогрессирования (ВБП) – 4,0 месяца, 95%-ный доверительный интервал (ДИ) 1,3–25,0), 14/24 больных умерли (медиана общей выживаемости (ОВ) – 12,3 месяца, 95% ДИ 4,5–29,7). У десяти пациентов, которые были живы на момент проведения анализа, медиана ОВ составила 15,2 месяца (0,5–36,1). Из 17 участников второго этапа, информация о которых была доступна на момент анализа (январь 2016 г.), у четырех (23,5%) зарегистрирован частичный ответ, у шести (35%) – стабилизация болезни, у пяти (29,5%) – прогрессирование. Информация о двух пациентах оказалась недоступной.

На конгрессе в июне 2016 г. были представлены обновленные данные о том, что частота развития частичного ответа на лечение у пациентов с мутацией в гене KIT (18,0%) была выше, чем у пациентов без мутации (5,9%). При этом 20% частичных ответов наблюдалось среди пациентов с мутацией в 11-м или 13-м экзоне. K. Kalinsky сделал вывод, что дазатиниб может быть использован у пациентов с метастатической меланомой с мутацией в гене KIT. Однако препаратом первого выбора остается иматиниб [12].

Клинический случай

В отделение биотерапии НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина обратилась пациентка 1969 г.р. Из анамнеза известно, что в сентябре 2015 г. ей было выполнено хирургическое лечение в объеме подмышечной лимфаденэктомии, экзартикуляции большого пальца правой кисти по поводу меланомы кожи большого пальца правой кисти, транзиторных метастазов в области основания пальца, метастатического поражения лимфатических узлов подмышечной области, стадия IIIC. С октября по декабрь 2015 г. пациентка получала адъювантную иммунотерапию препаратами интерферона альфа-2b 3 млн МЕ подкожно три раза в неделю.

Прогрессирование заболевания выявлено в декабре 2015 г. (метастазы в легких и печени). С декабря 2015 г. по июнь 2016 г. проведено шесть курсов химиотерапии дакарбазином. Максимальный эффект – стабилизация болезни.

После шести курсов зафиксировано прогрессирование заболевания: рост имевшихся и появление новых метастатических образований.

Благодаря персонализированному подходу и молекулярному тестированию, несмотря на исходно неблагоприятный прогноз течения заболевания, у данной пациентки период от выявления метастатической формы меланомы до июня 2017 г. превысил 17 месяцев. Пациентка продолжает вести активный образ жизни, работает, получает противоопухолевую терапию.

При метастатической меланоме кожи с мутацией в гене BRAF широко применяются ингибиторы BRAF и MEK. Однако в отсутствие мутации в гене BRAF, а также при меланоме слизистой и акральной локализации следует рекомендовать молекулярное тестирование для выявления мутаций KIT. Это поможет решить вопрос о назначении лекарственной терапии иматинибом или другими препаратами, блокирующими KIT.

Результаты исследований подтверждают наличие определенной чувствительности к ингибированию гена KIT (наиболее чувствительны к терапии иматинибом пациенты с мутацией в 11-м и 13-м экзонах) в небольшой субпопуляции пациентов. Наличие только гиперэкспрессии или амплификации c-KIT не связано с ответом на терапию.

В отсутствие мутации в гене BRAF важно определение мутации в гене KIT для планирования лекарственной терапии в случае метастатической меланомы. Наличие мутации в свою очередь позволяет индивидуализировать лечение. Сказанное нашло отражение в практических рекомендациях Российского общества клинической онкологии. Так, пациентам с местнораспространенной неоперабельной или метастатической меланомой кожи с мутацией в гене KIT может быть назначен иматиниб 800 мг/сут (400 мг два раза в день). Лечение проводят до прогрессирования заболевания или признаков непереносимости терапии [13].

В норме ген BRAF вместе с факторами роста и гормонами участвует в регуляции деления клеток за счет активации специфического сигнального пути. Если же его структура изменяется, то процесс деления выходит из-под контроля. Мутации в гене BRAF выявляются при различных видах рака, однако на первом месте в списке онкологических заболеваний стоит меланома. Определить статус гена при данной болезни крайне важно, так как от этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения.

Частота и виды мутаций BRAF

Методы диагностики

Выявить мутации BRAF можно при помощи молекулярно-генетических методов диагностики. Для проведения исследования необходим образец тканей меланомы кожи, в которых содержится не менее 20% опухолевых клеток. Как правило, такой материал поступает в лабораторию после удаления, после чего он фиксируется в формалине и заключается в парафиновые блоки. Перед определением мутаций необходимо выполнить пробоподготовку. Материал извлекается из парафина, затем выполняется процесс экстракции ДНК, которая исследуется.

Базовым методом, который позволяет выявить мутации в гене BRAF, является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Это исследование является относительно простым и дешевым, обладает хорошей чувствительностью и специфичностью, однако имеет существенный недостаток. Один анализ позволяет определить только одну мутацию BRAF. Если же стоит задача выявить несколько мутаций, то исследование придется повторять.

Более совершенным считается секвенирование, при помощи которого можно установить точную последовательность ДНК целого гена. Данный метод более затратный и требует дорогостоящего оборудования, но при этом он позволяет одновременно выявить все мутации в гене BRAF за одно исследование. Среди недостатков секвенирования можно отметить риск получить ложноотрицательный результат (выявляется в 2%-10% случаев) из-за присутствия в материале большого количества нормальных клеток с неизмененной ДНК.

Зачем определять BRAF мутацию при меланоме

Определение мутации в гене BRAF имеет важное значение при подборе лечения меланомы. Одним из современных методов является таргетная терапия, которая направлена на устранение конкретного механизма образования опухолевых клеток. В случае с меланомой применяются ингибиторы мутированного фрагмента гена BRAF, которые прерывают цепочку биохимических реакций и не дают опухоли развиваться дальше. При назначении таких препаратов определение статуса гена BRAF должно проводиться в обязательном порядке. При отсутствии мутации дорогостоящее лечение окажется неэффективным, а в некоторых случаях может и ускорить прогрессирование опухолевого процесса.

Препараты из группы ингибиторов BRAF могут применяться только при лечении метастатической меланомы. При этом не изучена эффективность лечения в адъювантном режиме, поэтому такие препараты не назначают пациентам, у которых выполнялось хирургическое удаление опухоли или метастазов, а также химио- и лучевая терапия.

Первыми зарегистрированными препаратами из группы ингибиторов BRAF, которые начали применяться при лечении метастатической и неоперабельной меланомы, стали вемурафениб и дабрафениб. При проведении клинических испытаний, они показали очень хорошие результаты. В настоящее время применяется комбинированное лечение меланомы, при котором, кроме ингибиторов BRAF назначаются ингибиторы МЕК. Такое сочетание позволяет максимально замедлить прогрессирование заболевания и увеличить продолжительность жизни пациентов.

Несмотря на большие успехи в лечении меланомы, все еще остаются нерешенными несколько проблем. Во-первых, отсутствуют эффективные методы терапии, которые можно применять при отсутствии мутаций в гене BRAF. Во-вторых, при назначении ингибиторов BRAF у пациентов спустя некоторое время развивается устойчивость к такому лечению, и меланома начинает снова прогрессировать.

Читайте также: